路径: 主页 > GB > 第164页 > GB 14923-2010 | 标准编号 | GB 14923-2010 (GB14923-2010) | | 中文名称 | 实验动物 哺乳类实验动物的遗传质量控制 | | 英文名称 | Laboratory animal -- Genetic quality control of mammalian laboratory animals | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | B44 | | 国际标准分类 | 65.020.30 | | 字数估计 | 17,177 | | 发布日期 | 2010-12-23 | | 实施日期 | 2011-10-01 | | 旧标准 (被替代) | GB 14923-2001 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2010年第10号(总第165号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了哺乳类实验动物的遗传分类及命名原则、繁殖交配方法和近交系动物的遗传质量标准。本标准适用于哺乳类实验动物的遗传分类、命名、繁殖及近交系小鼠、大鼠的遗传纯度检测。 | GB 14923-2010
Laboratory animal.Genetic quality control of mammalian laboratory animals
ICS 65.020.30
B44
中华人民共和国国家标准
代替GB 14923-2001
实验动物
哺乳类实验动物的遗传质量控制
2010-12-23发布
2011-10-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准的第3章(举例内容除外)、4.1.1、4.1.2、4.2.1、4.2.2、4.2.3、5.1、5.3为强制性的,其余为
推荐性的。
本标准代替GB 14923-2001《实验动物 哺乳类实验动物的遗传质量控制》。
本标准与GB 14923-2001相比,主要变化如下:
a) 增加了染色体置换系、核转移系等特殊近交系的内容,与国际上最新版本的权威文件一致;
b) 增加了对遗传修饰动物的说明;
c) 对封闭群动物提出了检测要求;
d) 补充了杂交群的繁殖方法;
e) 对附录进行了修订。
本标准附录A为规范性附录,附录B、附录C为资料性附录。
本标准由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口。
本标准起草单位:全国实验动物标准化技术委员会。
本标准主要起草人:岳秉飞、高翔、鲍世民、张连峰、邢瑞昌。
本标准于1994年1月首次发布,2001年8月第一次修订。
实验动物
哺乳类实验动物的遗传质量控制
1 范围
本标准规定了哺乳类实验动物的遗传分类及命名原则、繁殖交配方法和近交系动物的遗传质量
标准。
本标准适用于哺乳类实验动物的遗传分类、命名、繁殖及近交系小鼠、大鼠的遗传纯度检测。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
2.1
近交系 inbredstrain
在一个动物群体中,任何个体基因组中99%以上的等位位点为纯合时定义为近交系。
经典近交系经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成。品系内所有个体都可追溯到起源于第
20代或以后代数的一对共同祖先。
经连续20代以上亲子交配与全同胞兄妹交配有等同效果。近交系的近交系数(inbreeding
2.2
亚系 substrain
一个近交系内各个分支的动物之间,因遗传分化而产生差异,称为近交系的亚系。
2.3
RI
由两个近交系杂交后,经连续20代以上兄妹交配育成的近交系。
2.4
RC
由两个近交系杂交后,子代与两个亲代近交系中的一个近交系进行数次回交(通常回交2次),再经
不对特殊基因选择的连续兄妹交配(通常大于14代)而育成的近交系。
2.5
除了在一个特定位点等位基因不同外,其他遗传基因全部相同的两个近交系。
一般由近交系发生基因突变或者人工诱变(如基因剔除)形成。用近交代数表示出现突变的代数,
如F110+F23,是近交系在110代出现突变后近交23代。
2.6
同源导入近交系 congenicinbredstrain
同类近交系
通过回交(backcross)方式形成的一个与原来的近交系只是在一个很小的染色体片段上有所不同
的新的近交系。
要求至少回交10个世代,供体品系的基因组占基因组总量在0.01以下。
2.7
为把某一染色体全部导入到近交系中,反复进行回交而育成的近交系。与同类系相同,将F1作为
第1个世代,要求至少回交10个世代。
2.8
核转移系 conplasticstrains
将某个品系的核基因组移到其他品系细胞质而培育的品系。
2.9
混合系 mixedinbredstrains
由两个亲本品系(其中一个是重组基因的ES细胞株)混合制作的近交系。
2.10
两个近交系间繁殖到F2,采取避免兄妹交配的互交所得到的多个近交系。由于其较高的相近基因
位点间的重组率而被应用于突变基因的精细定位分析。
2.11
经人工诱发突变或特定类型基因组改造建立的动物。包括转基因动物、基因定位突变动物、诱变动
物等。
2.12
封闭群 closedcolony
远交群 outbredstock
以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群,在不从外部引入新个体的条件下,至少连续
繁殖4代以上的群体。
2.13
杂交群 hybrids
由两个不同近交系杂交产生的后代群体。子一代简称F1。
3 实验动物的遗传分类及命名
3.1 遗传分类
根据遗传特点的不同,实验动物分为近交系、封闭群和杂交群。
3.2 命名
3.2.1 近交系
3.2.1.1 命名
近交系一般以大写英文字母命名,亦可以用大写英文字母加阿拉伯数字命名,符号应尽量简短。如
A系、TA1系等。
3.2.1.2 近交代数
近交系的近交代数用大写英文字母F表示。例如当一个近交系的近交代数为87代时,写成
(F87)。如果对以前的代数不清楚,仅知道近期的近交代数为25,可以表示为(F? +25)。
3.2.1.3 亚系的命名
亚系的命名方法是在原品系的名称后加一道斜线,斜线后标明亚系的符号。
亚系的符号可以是以下几种:
a) 培育或产生亚系的单位或个人的缩写英文名称,第一个字母用大写,以后的字母用小写。使用
缩写英文名称应注意不要和已公布过的名称重复。例如:A/He,表示A近交系的 Heston亚
系;CBA/J,由美国杰克逊研究所保持的CBA近交系的亚系;
b) 当一个保持者保持的一个近交系具有两个以上的亚系时,可在数字后再加保持者的缩写英文
名称来表示亚系。如:C57BL/6J,C57BL/10J分别表示由美国杰克逊研究所保持的C57BL近
交系的两个亚系;
c) 一个亚系在其他机构保种,形成了新的群体,在原亚系后加注机构缩写。如:C3H/HeH是由
Hanwel(H)保存的Heston(He)亚系;
d) 作为以上命名方法的例外情况是一些建立及命名较早,并为人们所熟知的近交系,亚系名称
可用小写英文字母表示,如BALB/c、C57BR/cd等。
3.2.1.4 重组近交系和重组同类系命名
3.2.1.4.1 重组近交系的命名
在两个亲代近交系的缩写名称中间加大写英文字母X命名。相同双亲交配育成的一组近交系用
阿拉伯数字予以区分,雌性亲代在前,雄性亲代在后。
示例:
由BALB/c与C57BL两个近交系杂交育成的一组重组近交系,分别命名为CXB1、CXB2
如果雄性亲代缩写为数字,如CX8,为区分不同RI组,则用连接符表示为CX8-1、CX8-2
常用近交系小鼠的缩写名称如下:
近交系 缩写名称
C57BL/6 B6
BALB/c C
DBA/2 D2
C3H C3
CBA CB
3.2.1.4.2 重组同类系的命名
在两个亲代近交系的缩写名称中间加小写英文字母c命名,用其中做回交的亲代近交系(称受体近
交系)在前,供体近交系在后。相同双亲育成的一组重组同类系用阿拉伯数字予以区分。如CcS1,表示
以BALB/c(C)为亲代受体近交系,以STS(S)品系为供体近交系,经2代回交育成的编号为1的重组同
类系。
同样,如果雄性亲代缩写为数字,如Cc8,为区分不同RC组,则用连接符表示为Cc8-1。
3.2.1.5 同源突变近交系的命名
在发生突变的近交系名称后加突变基因符号(用英文斜体印刷体)组成,二者之间以连接号分开,
如:DBA/Ha-D,表示DBA/Ha品系突变基因为D的同源突变近交系。
当突变基因必须以杂合子形式保持时,用“+”号代表野生型基因,如:A/Fa-+/c。
129S7/SvEvBrd-Fyntm1Sor表示用来源129S7/SvEvBrd品系的AB1ES细胞株制作的Fyn基因变异
的同源突变系。
3.2.1.6 同源导入近交系(同类近交系)
同源导入系名称由以下几部分组成:
a) 接受导入基因(或基因组片段)的近交系名称;
b) 提供导入基因(或基因组片段)的近交系的缩写名称,并与a之间用英文句号分开;
c) 导入基因(或基因组片段)的符号(用英文斜体),与b之间以连字符分开;
d) 经第三个品系导入基因(或基因组片段)时,用括号表示;
e) 当染色体片段导入多个基因(或基因组片段)或位点,在括号内用最近和最远的标记表示出来。
示例:
B10.129-H-12b 表示该同源导入近交系的遗传背景为C57BL/10sn(即B10),导入B10的基因为H-12b,基因提
供者为129/J近交系。
C.129P(B6)-Il2tm1Hor 经过第三个品系B6导入的。
B6.Cg-(D4Mit25-D4Mit80)/Lt 导入的片段标记为D4Mit25-D4Mit80。
3.2.1.7 染色体置换系的命名
表示方法为HOSTSTRAIN-Chr#DONORSTRAIN,如C57BL/6J-Chr19SPR为M.spretus的第19染色
体回交于B6的染色体置换系。
3.2.1.8 核转移系的命名
命名方法为NUCLEARGENOME-mtCYTOPLASMICGENOME,如:C57BL/6J-mtBALB/c指带有C57BL/6J核
基因组和BALB/c细胞质的品系。这样的品系是以雄的C57BL/6J小鼠和雌的BALB/c小鼠交配,子
代雌鼠与C57BL/6J雄鼠反复回交10代而成。
3.2.1.9 混合系的命名
3.2.1.9.1 两个品系缩写之间用分号,如:B6;129-Acvr2tm1Zuk为 C57BL/6J和敲除Acvr2基因的
129ES细胞株制作的品系。
3.2.1.9.2 由两个以上亲本品系制作的近交系,或者受不明遗传因素影响的突变系,作为混合系,用
STOCK空格后加基因或染色体异常来表示,如STOCKRb(16.17)5Bnr为具有Rb(16.17)5Bnr的、含
有未知或复杂遗传背景的混合系。
3.2.1.10 互交系的命名
由实验室缩写编码:母系亲本,父系亲本-G#表示。如 Pri:B6,D2-G#为 Priceton研究所用
C57BL/6J和DBA/2制作的互交品系,G#表示自F2后交配的代数。
3.2.1.11 遗传修饰动物的命名
遗传修饰动物包括转基因、基因定位突变、诱变等动物,属于特殊近交系,其命名见附录A。
3.2.2 封闭群(远交群)的命名
封闭群由2个~4个大写英文字母命名,种群名称前标明保持者的英文缩写名称,第一个字母须大
写,后面的字母小写,一般不超过4个字母。保持者与种群名称之间用冒号分开。
示例:
N:NIH表示由美国国立卫生研究院(N)保持的NIH封闭群小鼠。
Lac:LACA表示由英国实验动物中心(Lac)保持的LACA封闭群小鼠。
某些命名较早,又广为人知的封闭群动物,名称与上述规则不一致时,仍可沿用其原来的名称。如:
Wistar大鼠封闭群,日本的ddy封闭群小鼠等。
把保持者的缩写名称放在种群名称的前面,而二者之间用冒号分开,是封闭群动物与近交系命名中
最显著的区别。除此之外,近交系命名中的规则及符号也适用于封闭群动物的命名。
3.2.3 杂交群的命名
杂交群应按以下方式命名:以雌性亲代名称在前,雄性亲代名称居后,二者之间以大写英文字母
“X”相连表示杂交。将以上部分用括号括起,再在其后标明杂交的代数(如F1、F2等)。
对品系或种群的名称常使用通用的缩写名称。
示例:
(C57BL/6 X DBA/2)F1=B6D2F1
B6D2F2:指B6D2F1同胞交配产生的F2;
B6(D2AKRF1):是B6为母本,与(DBA/2XAKR/J)的F1父本回交所得。
4 实验动物的繁殖方法
4.1 近交系动物的繁殖方法
4.1.1 原则
选择近交系动物繁殖方法的原则是保持近交系动物的同基因性及其基因纯合性。
4.1.2 引种
作为繁殖用原种的近交系动物必须遗传背景明确,来源清楚,有较完整的资料(包括品系名称、近交
代数、遗传基因特点及主要生物学特征等)。引种动物应来自近交系的基础群(foundationstock)。
stock)。当近交系动物生产供应数量不是很大时,一般不设血缘扩大群,仅设基础群和生产群。
4.1.4 基础群
4.1.4.1 设基础群的目的,一是保持近交系自身的传代繁衍,二是为扩大繁殖提供种动物。
4.1.4.2 基础群严格以全同胞兄妹交配方式进行繁殖。
4.1.4.3 基础群应设动物个体记录卡(包括品系名称、近交代数、动物编号、出生日期、双亲编号、离乳
日期、交配日期、生育记录等)和繁殖系谱。
4.1.4.4 基础群动物不超过5代~7代都应能追溯到一对共同祖先。
4.1.5 血缘扩大群
4.1.5.1 血缘扩大群的种动物来自基础群。
4.1.5.2 血缘扩大群以全同胞兄妹交配方式进行繁殖。
4.1.5.3 血缘扩大群动物应设个体繁殖记录卡。
4.1.5.4 血缘扩大群动物不超过5代~7代都应能追溯到其在基础群的一对共同祖先。
4.1.6 生产群
4.1.6.1 设生产群的目的是生产供应实验用近交系动物,生产群种动物来自基础群或血缘扩大群。
4.1.6.2 生产群动物一般以随机交配方式进行繁殖。
4.1.6.3 生产群动物应设繁殖记录卡。
4.1.6.4 生产群动物随机交配繁殖代数一般不应超过4代。
4.2 封闭群动物的繁殖方法
4.2.1 原则
选择封闭群动物繁殖方法的原则是尽量保持封闭群的动物的基因异质性及多态性,避免近交系数
随繁殖代数增加而过快上升。
4.2.2 引种
作为繁殖用原种的封闭群动物必须遗传背景明确,来源清楚,有较完整的资料(包括种群名称、来
源、遗传基因特点及主要生物学特性等)。
为保持封闭群动物的遗传异质性及基因多态性,引种动物数量要足够多,小型啮齿类封闭群动物引
种数目一般不能少于25对。
4.2.3 繁殖
为保持封闭群动物的遗传基因的稳定,封闭群应足够大,并尽量避免近亲交配。根据封闭群的大
小,选用循环交配法等方法进行繁殖。具体方法参见附录B。
4.3 杂交群的繁殖方法
将适龄的雌性亲代品系动物与雄性亲代品系动物杂交,即可得到F1动物。雌雄亲本交配顺序不
同,得到的F1动物也不一样。F1动物自繁成为F2动物。除特殊需要外F1动物一般不进行繁殖。
5 近交系动物的遗传质量监测
5.1 近交系动物的遗传质量标准
近交系动物应符合以下要求:
a) 具有明确的品系背景资料,包括品系名称、近交代数、遗传组成、主要生物学特性等,并能充分
表明新培育的或引种的近交系动物符合近交系定义的规定;
b) 用于近交系保种及生产的繁殖系谱及记录卡应清楚完整,繁殖方法科学合理;
c) 经遗传检测(生化标记基因检测法,免疫标记基因检测法等)质量合格。
5.2 近交系小鼠、大鼠遗传检测方法及实施
5.2.1 生化标记检测(纯度检测的常规方法)
5.2.1.1 抽样
对基础群,凡在子代留有种鼠的双亲动物都应进行检测。
对生产群,按表1要求从每个近交系中随机抽取成年动物,雌雄各半。
表1
生产群中雌性种鼠数量 抽样数目
100只以下 6只
100只以上 ≥6%
5.2.1.2 生化标记基因的选择及常用近交系动物的生化遗传概貌
近交系小鼠选择位于10条染色体上的14个生化位点,近交系大鼠选择位于6条染色体上的11个
生化位点,作为遗传检测的生化标记。以上生化标记基因的名称及常用近交系动物的生化标记遗传概
貌参见附录C。
5.2.1.3 结果判断
见表2。
表2
检测结果 判 断 处 理
与标准遗传概貌完全一致 未发现遗传变异,遗传质量合格 -
有一个位点的标记基因与标准遗传
概貌不一致
可疑
增加检测位点数目和增加检测方法
后重检,确实只有一个标记基因改变
可命名为同源突变系
两个或两个以上位点的标记基因与
标准遗传概貌不一致
不合格 淘汰,重新引种
5.2.2 免疫标记检测
5.2.2.1 皮肤移植法:每个品系随机抽取至少10只相同性别的成年动物,进行同系异体皮肤移植。移
植全部成功者为合格,发生非手术原因引起的移植物的排斥判为不合格。
5.2.2.2 微量细胞毒法:按照5.2.1.1的抽样数量检测小鼠 H-2单倍型,结果符合标准遗传概貌的为
合格,否则为不合格。
5.2.3 其他方法
除以上两种方法外,还可选用其他方法进行遗传质量检测,如毛色基因测试(coatcolorgene
DNA多态性检测法(DNApolymorphisms)、基因组测序法(genomicsequence)等。
5.3 检测时间间隔
近交系动物生产群每年至少进行一次遗传质量检测。
6 封闭群动物的遗传质量监测
6.1 封闭群动物的遗传质量标准
封闭群动物应符合以下要求:
a) 具有明确的遗传背景资料,来源清楚,有较完整的资料(包括种群名称、来源、遗传基因特点及
主要生物学特性等);
b) 用于保种及生产的繁殖系谱及记录卡应清楚完整,繁殖方法科学合理;
c) 封闭繁殖,保持动物的基因异质性及多态性,避免近交系数随繁殖代数增加而过快上升;
d) 经遗传检测(生化标记基因检测法,DNA 多态性分析等)基因频率稳定,下颌骨测量法
6.2 封闭群动物小鼠、大鼠遗传检测方法及实施
6.2.1 生化标记基因检测(多态性检测)
6.2.1.1 抽样
随机抽取雌雄各25只以上动物进行基因型检测。
6.2.1.2 生化标记基因的选择
选择代表种群特点的生化标记基因,如小鼠选择位于10条染色体上的14个生化位点,大鼠选择位
于6条染色体上的11个生化位点,作为遗传检测的生化标记。
6.2.1.3 群体评价
按照哈代-温伯格(Hardy-Weinberg)定律,无选择的随机交配群体的基因频率保持不变,处于平衡
状态。根据各位点的等位基因数计算封闭群体的基因频率,进行χ2 检验,判定是否处于平衡状态。处
于非平衡状态的群体应加强繁殖管理,避免近交。
6.2.2 其他方法
除以上方法外,还可选用其他方法进行群体遗传质量检测,如下颌骨测量法 (mandible
发育、繁殖性状、血液生理和生化指标等多种参数,通过连续监测把握群体的正常范围。
6.3 检测时间间隔
封闭群动物每年至少进行一次遗传质量检测。
7 杂交群动物的遗传质量监测
由于F1动物遗传特性均一,不进行繁殖而直接用于试验,一般不对这些动物进行遗传质量监测,
需要时参照近交系的检测方法进行质量监测。
附 录 A
(规范性附录)
遗传修饰动物
A.1 分类与定义
遗传修饰动物是指经人工诱发突变或特定类型基......
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