[PDF] GB 29989-2013 - 中国标准 英文版
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| GB 29989-2013 | 70 | GB 29989-2013 | 9秒内发货PDF | 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB 29989-2013 (GB29989-2013) |
| 中文名称 | 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定 |
| 英文名称 | Determination of L-carnitine in infant foods and dairy products |
| 行业 | 国家标准 |
| 中标分类 | C53 |
| 国际标准分类 | 67.020 |
| 字数估计 | 7,753 |
| 标准依据 | 国家卫计委公告2013年第7号 |
| 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 |
| 范围 | 本标准规定了婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定。 |
GB 29989-2013: 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
GB 29989-2013 英文名称: Determination of L-carnitine in infant foods and dairy products
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
1 范围
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定方法。
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定。
2 原理
试样经过水提取，用高氯酸沉淀蛋白质后过滤。滤液经碱皂化后使溶液中结合态的左旋肉碱游离
出来。左旋肉碱与乙酰辅酶 A在乙酰肉碱转移酶的催化下反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶 A。游离的
辅酶 A和 2-硝基苯甲酸反应生成黄色物质，其颜色深浅与游离的辅酶 A含量成正比。因游离的辅酶 A
与左旋肉碱是等摩尔反应关系，可间接求出试样中左旋肉碱含量。
3 试剂和材料
注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682规定的三级水。
3.1 试剂
3.1.1 高氯酸(HClO4)。
3.1.2 氢氧化钠(NaOH) 。
3.1.3 氢氧化钾(KOH) 。
3.1.4 2-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)。
3.1.5 N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(C8H18N2O4S)。
3.1.6 乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2Na2·2H2O）。
3.1.7 乙酰辅酶 A（AcetylCoA）：在 2℃~8℃保存。
3.1.8 乙酰肉碱转移酶(CAT)：在 2℃~8℃保存。
3.2 试剂配制
3.2.1 高氯酸溶液（13%）：13 mL高氯酸稀释至 100 mL。
3.2.2 氢氧化钠溶液（10 mol/L）：称取 40 g氢氧化钠用水溶解，冷却后稀释至 100 mL。
3.2.3 氢氧化钾溶液（4.0 mol/L）：称取 22.4 g氢氧化钾用水溶解，冷却后稀释至 100 mL。
3.2.4 显色储备液：分别称取 50 mg 2-硝基苯甲酸、5.96 g N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、185 mg
乙二胺四乙酸二钠溶于 30 mL去离子水中，用 10 mol/L NaOH溶液调 pH至 7.4～7.6，然后用水定容
至 50 mL。此液置于 4℃冰箱中可保存 3个月。
3.2.5 显色工作液：吸取 5.0 mL显色储备液用水定容至 25 mL。
3.2.6 乙酰辅酶 A（AcetylCoA）溶液：称取 20.0 mg乙酰辅酶 A溶于 2.0 mL水中。临用时配制。
3.2.7 乙酰肉碱转移酶(CAT)溶液：吸取 100 µL乙酰肉碱转移酶悬浮液，经 1500 r/min离心 10 min，
弃去上层清液，沉淀用 2 mL水溶解。临用时配制。
3.3 标准品
左旋肉碱标准品（C7H15NO3）：纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制
3.4.1 左旋肉碱标准储备液（80 µg/mL）：准确称取 20 mg（精确 0.0001g）于 102℃±2℃烘箱中烘
2 h的左旋肉碱，用水定容至 250 mL容量瓶中。此液置于 4℃冰箱中可保存 1个月。
3.4.2 左旋肉碱标准工作液：分别吸取左旋肉碱标准储备液 0.5 mL、1 mL、2 mL、3 mL、5 mL于
25 mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。此溶液仅限于当天使用。
4 仪器和设备
4.1 分析天平：感量 0.1 mg。
4.2 pH计：精度 0.01。
4.3 离心机：转速≥1500 r/min。
4.4 恒温水浴锅：温度可控制在 40℃±2℃。
4.5 分光光度计。
5 分析步骤
5.1 试样处理
准确称取 5 g（精确 0.0001g）混合均匀的试样于烧杯中，用 30 mL40℃温水溶解，转入 100 mL
容量瓶中。加入 10 mL13%高氯酸溶液，混合均匀后静止 20 min。用蒸馏水定容至刻度，混匀，用定
量滤纸过滤。
取滤液 20 mL，用 4 mol/L氢氧化钾溶液调 pH为 12.5～13.0后，置于 40˚C水浴 60 min。冷却后
用 13%高氯酸调 pH为 7.0～7.5。将样液转入 50 mL容量瓶中，用蒸馏水定容。混匀后置于 4℃冰箱中
过夜。将试样处理液从冰箱中取出放置至室温，取上清液用 0.45 µm滤膜过滤后备用。
5.2 标准曲线的绘制
吸取左旋肉碱标准工作液 2.0 mL于 1 cm比色皿中，加入 0.8 mL显色工作液和 100 µL乙酰辅酶
A溶液，盖上比......