路径: 主页 > GB > 第29页 > GB 31658.23-2022 | 标准编号 | GB 31658.23-2022 (GB31658.23-2022) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 动物性食品中硝基咪唑类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 | | 英文名称 | (National food safety standards-Determination of nitroimidazole drug residues in animal foods-liquid chromatography-tandem mass spectrometry) | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X04 | | 字数估计 | 11,114 | | 发布日期 | 2022-09-20 | | 实施日期 | 2023-02-01 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31658.23-2022: 食品安全国家标准 动物性食品中硝基咪唑类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
GB 31658.23-2022 英文名称: (National food safety standards-Determination of nitroimidazole drug residues in animal foods-liquid chromatography-tandem mass spectrometry)
中华人民共和国国家卫生健康委员会
食品安全国家标准动物性食品中硝
基咪唑类药物残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
中华人民共和国国家标准
发 布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中华人民共和国农业农村部
前 言
本文件按照GB/T １１-２０２０«标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定
起草.
本文件系首次发布.
食品安全国家标准
动物性食品中硝基咪唑类药物残留量的测定
液相色谱Ｇ串联质谱法
１ 范围
本文件规定了动物性食品中甲硝唑、羟基甲硝唑、地美硝唑和羟基地美硝唑残留量检测的制样和液相
色谱Ｇ串联质谱测定方法.
本文件适用于猪、牛、羊和鸡的肌肉、肝脏和肾脏组织中甲硝唑、羟基甲硝唑、地美硝唑和羟基地美硝
唑残留量的测定.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试样中残留的硝基咪唑类药物经乙酸乙酯提取,正己烷液液萃取除脂,固相萃取柱净化,液相色谱Ｇ串
联质谱检测,基质匹配内标法定量.
５ 试剂与材料
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５１ 试剂
５１１ 乙酸乙酯(C４H８O２):色谱纯.
５１２ 乙腈(CH３CN):色谱纯.
５１３ 甲醇(CH３OH):色谱纯.
５１４ 正己烷(C６H１４):色谱纯.
５１５ 甲酸(HCOOH):色谱纯.
５１６ 氨水(NH３H２O).
５１７ 盐酸(HCl).
５２ 溶液配制
５２１ ０１mol/L盐酸溶液:取浓盐酸８３mL,加水稀释至１L,混匀.
５２２ ２％氨水溶液:取氨水２mL,加水稀释至１００mL,混匀,现用现配.
５２３ 洗脱液:取甲醇８０mL,加水１５mL、氨水５mL,混匀,现用现配.
５２４ ０１％甲酸水溶液:取水５００mL,加甲酸５００μL,混匀.
５２５ ０１％甲酸乙腈溶液:取乙腈５００mL,加甲酸５００μL,混匀.
５３ 标准品
甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑、甲硝唑ＧD３、地美硝唑ＧD３、羟基甲硝唑ＧD２、羟基地美硝
唑ＧD３,含量均≥９５％.具体见附录A.
５４ 标准溶液制备
５４１ 标准储备液:取甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑标准品适量(相当于各有效成分
１０mg),精密称定,用甲醇溶解并稀释定容于１０mL容量瓶,配制成浓度为１mg/mL的甲硝唑、地美硝
唑、羟基甲硝唑和羟基地美硝唑标准储备液.-１８℃以下保存,有效期６个月.
５４２ 内标储备液:取甲硝唑ＧD３、地美硝唑ＧD３、羟基甲硝唑ＧD２和羟基地美硝唑ＧD３标准品适量(相当于
各有效成分１０mg),精密称定,用甲醇溶解并稀释定容于１０mL容量瓶,配制成浓度为１mg/mL的甲硝
唑ＧD３、地美硝唑ＧD３、羟基甲硝唑ＧD２和羟基地美硝唑ＧD３内标储备液.-１８℃以下保存,有效期６个月.
５４３ １０μg/mL混合标准工作液:分别精密量取标准储备液各０１mL于１０mL容量瓶中,用甲醇稀释
至刻度,配制成浓度为１０μg/mL的混合标准工作液.-１８℃以下保存,有效期６个月.
５４４ １μg/mL混合标准工作液:精密量取１０μg/mL混合标准工作液１mL于１０mL容量瓶中,用甲
醇稀释至刻度,配制成浓度为１μg/mL的混合标准工作液.-１８℃以下保存,有效期３个月.
５４５ ０１μg/mL混合标准工作液:精密量取１μg/mL混合标准工作液１mL于１０mL容量瓶中,用甲
醇稀释至刻度,配制成浓度为０１μg/mL的混合标准工作液.-１８℃以下保存,有效期１个月.
５４６ １０μg/mL混合内标工作液:分别精密量取内标储备液各０１mL于１０mL容量瓶中,用甲醇稀释
至刻度,配制成浓度为１０μg/mL的混合内标工作液.-１８℃以下保存,有效期６个月.
５４７ １μg/mL混合内标工作液:精密量取１０μg/mL内标工作液１mL于１０mL容量瓶中,用甲醇稀
释至刻度,配制成浓度为１μg/mL的混合内标工作液.-１８℃以下保存,有效期３个月.
５５ 材料
５５１ 混合型强阳离子交换反相固相萃取柱:６０mg/３mL,或相当者.
５５２ 微孔滤膜:０２μm,水相.
６ 仪器和设备
６１ 液相色谱Ｇ串联质谱仪:配电喷雾离子源.
６２ 分析天平:感量０００００１g和００１g.
６３ 氮吹仪.
６４ 涡旋混合器.
６５ 离心机.
６６ 组织匀浆机.
６７ 固相萃取装置.
７ 试样的制备与保存
７１ 试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,绞碎,并均质.
a) 取均质后的供试样品,作为供试试样;
b) 取均质后的空白样品,作为空白试样;
c) 取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准溶液,作为空白添加试料.
７２ 试样的保存
-１８℃以下保存.
８ 测定步骤
８１ 提取
称取试样２g(准确至±００５g),于５０mL塑料离心管,加１μg/mL混合内标工作液１０μL,涡旋３０s
混匀,静置１０min.加乙酸乙酯１５mL,涡旋２min,１００００r/min离心５min.取上清液于另一５０mL离
心管中,残渣中加乙酸乙酯１５mL,重复提取一次,合并２次提取液,于２５℃水浴氮气吹干.
８２ 净化
残余物中加０１mol/L盐酸溶液５mL,涡旋１min充分溶解,加正己烷５mL,振摇１min,５０００r/min
离心５min,弃正己烷层.下层再加正己烷５mL重复除脂一次,弃正己烷层,备用.
固相萃取柱依次用甲醇２mL和０１mol/L盐酸溶液２mL活化,取备用液过柱,依次用０１mol/L
盐酸溶液２mL、甲醇１mL和２％氨水１mL淋洗,用洗脱液２mL洗脱.收集洗脱液,３５℃水浴氮气吹
干,残余物中加水０５mL涡旋１min,滤膜过滤,供液相色谱Ｇ串联质谱测定.
８３ 基质匹配标准曲线的制备
取经提取和净化的空白试料溶液,加入适量的混合标准工作液和１μg/mL混合内标工作液１０μL,
３５℃水浴氮气吹干,加水０５mL涡旋１min,配制成浓度为２μg/L、４μg/L、２０μg/L、４０μg/L、２００μg/L
和４００μg/L的基质匹配标准溶液,过滤后供液相色谱Ｇ串联质谱测定.以测得的硝基咪唑类药物与相应
内标的特征离子峰面积之比为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线,求回归方程和相关系数.
８４ 测定
８４１ 液相色谱参考条件
a) 色谱柱:C１８色谱柱 (５０mm×２１mm,１７μm)或相当者;
b) 流动相:A为０１％的甲酸水溶液,B为０１％甲酸乙腈溶液,梯度洗脱程序见表１;
c) 流速:０３mL/min;
d) 柱温:３０℃;
e) 进样量:１０μL.
８４２ 质谱参考条件
a) 离子源:电喷雾(ESI)离子源;
b) 扫描方式:正离子扫描;
c) 检测方式:多反应监测;
d) 喷雾电压:３０００V;
e) 雾化温度:３５０℃;
f) 源温:１００℃;
g) 锥孔气流速:３０L/h;
h) 雾化气流速:６００L/h;
i) 待测药物定性离子对、定量离子对、锥孔电压和碰撞能量的参考值见表２.
８４３ 测定法
８４３１ 定性测定
在同样测试条件下,试料溶液中硝基咪唑类药物的保留时间与基质匹配标准工作液中硝基咪唑类药
物的保留时间之比,偏差在±２５％以内,且检测到的相对离子丰度,应当与浓度相当的基质匹......
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