[PDF] GB/T 17494-2009 - 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| GB/T 17494-2009 | 359 | GB/T 17494-2009 | <=3 | 马传染性贫血病间接ELISA诊断技术 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB/T 17494-2009 (GB/T17494-2009) |
| 中文名称 | 马传染性贫血病间接ELISA诊断技术 |
| 英文名称 | Diagnostic techniques of indirect ELISA technique for equine infectious anemia disease |
| 行业 | 国家标准 (推荐) |
| 中标分类 | B41 |
| 国际标准分类 | 11.220 |
| 字数估计 | 9,963 |
| 发布日期 | 2009-04-23 |
| 实施日期 | 2009-09-01 |
| 旧标准 (被替代) | GB/T 17494-1998 |
| 标准依据 | 国家标准批准发布公告2009年第5号(总第145号) |
| 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 |
| 范围 | 本标准规定了马传染性贫血病间接ELISA诊断技术的测定原理、材料准备、操作方法和结果判定等。本标准适用于检测马血清中的马传贫病毒抗体。可用于生产和经营马匹者对未注射马传贫疫苗马匹的检疫、马传贫病马的定性, 也可用于对注射马传贫疫苗马匹的免疫状态进行测定。 |
GB/T 17494-2009
Diagnostic techniques of indirect ELISA technique for equine infectious anemia disease
ICS １１．２２０
B４１
中华人民共和国国家标准
GB/T １７４９４-２００９
代替GB/T １７４９４-１９９８
马传染性贫血病间接ELISA诊断技术
２００９-０４-２３发布
２００９-０９-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准参照世界动物卫生组织（ＯＩＥ）最新公布的《陆生动物诊断试验和疫苗手册》２００４年版，并结
合我国现有动物卫生法规及农业部对马传贫的相关政策和措施修订，其技术内容与ＯＩＥ所推荐的基本
一致。
本标准代替GB/T １７４９４-１９９８《马传染性贫血病间接ＥＬＩＳＡ技术规程》。
本标准与GB/T １７４９４-１９９８相比主要变化如下：
---“前言”部分作适当变动；
---删除第２章的内容；
---第４章“仪器设备”和第５章“试剂”部分改为“材料准备”，并对内容作较大的改动；
---第６章“配制溶液”部分放置在附录内；
---修订原标准中的所有语句和计量单位等错误用法。
本标准的附录Ａ、附录Ｂ、附录Ｃ和附录Ｄ为规范性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会（ＳＡＣ/TＣ１８１）归口。
本标准由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所负责起草。
本标准主要起草人：相文华、郭巍、赵立平、戴玉坤。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
---GB/T １７４９４-１９９８。
GB/T １７４９４-２００９
马传染性贫血病间接ELISA诊断技术
１ 范围
本标准规定了马传染性贫血病间接ＥＬＩＳＡ诊断技术的测定原理、材料准备、操作方法和结果判
定等。
本标准适用于检测马血清中的马传贫病毒抗体。可用于生产和经营马匹者对未注射马传贫疫苗马
匹的检疫、马传贫病马的定性，也可用于对注射马传贫疫苗马匹的免疫状态进行测定。
２ 测定原理
用制备的马传贫病毒抗原，包被聚苯乙烯微量板孔，使免疫反应在固相载体上进行。当被检血清中
有马传贫病毒抗体存在时，则与孔壁上的抗原形成抗原-抗体复合物，再与酶标记的抗体（抗马免疫球蛋
白）反应，最后通过测定酶作用底物催化后的产物，进行马传贫病毒抗体的定性、定量测定。
３ 材料准备
３．１ 器材
３．１．１ ９６孔平底微量反应板。
３．１．２ 微量移液器。
３．１．３ 酶标测定仪。
３．１．４ 恒温箱。
３．１．５ 保湿盒等。
３．２ 试剂
３．２．１ 兔抗马ＩｇＧ辣根过氧化物酶结合物（简称酶标抗体）为冻干品，见附录Ａ。
３．２．２ 马传贫病毒抗原包被板见附录Ｂ。
３．２．３ 马传贫病毒标准阳性血清和标准阴性血清均为冻干品。
３．２．４ 磷酸盐缓冲液（０．０２ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ７．２，ＰＢＳ）配制方法见第Ｃ．１章。
３．２．５ 洗涤缓冲液（０．０２ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ７．２，ＰＢＳ-０．０５％吐温-２０）的配制方法见第Ｃ．２章。
３．２．６ 血清及酶标记抗体稀释液（０．０２ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ７．２，ＰＢＳ-０．０５％吐温-２０-０．１％白明胶-１０％健康牛
血清）的配制方法见第Ｃ．３章。
３．２．７ 底物缓冲液（ｐＨ５．０磷酸盐-柠檬酸缓冲液，内含０．０４％邻苯二胺及０．０４５％过氧化氢）的配制
方法见第Ｃ．４章。
３．２．８ 终止液（２ｍｏｌ／Ｌ，硫酸）的配制方法见第Ｃ．５章。
４ 操作方法
４．１ 冲洗包被板：向各孔注入洗涤缓冲液，浸泡３ｍｉｎ，甩干，再注入洗涤缓冲液，重复３次。甩干孔内
残液，在滤纸上吸干。
４．２ 加被检血清及对照血清：将每份被检血清样品各取５０μＬ加入到血清稀释板的各孔内，再将稀释
液０．９５ｍＬ依次加入各孔内，作１∶２０倍稀释。混匀后分别取１００μＬ依次加入抗原包被反应孔中，每
份血清加两个孔。每块反应板设阴性血清和阳性血清对照各两孔，每孔１００μＬ。盖......