[PDF] GB/T 21674-2008 - 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| GB/T 21674-2008 | 209 | GB/T 21674-2008 | <=3 | 猪圆环病毒聚合酶链反应试验方法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB/T 21674-2008 (GB/T21674-2008) |
| 中文名称 | 猪圆环病毒聚合酶链反应试验方法 |
| 英文名称 | Detecting porcine circovirus with polymerase chain reaction |
| 行业 | 国家标准 (推荐) |
| 中标分类 | B41 |
| 国际标准分类 | 11.220 |
| 字数估计 | 9,966 |
| 发布日期 | 2008-04-09 |
| 实施日期 | 2008-06-01 |
| 标准依据 | 国家标准批准发布公告2008年第6号(总第119号) |
| 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 |
| 范围 | 本标准规定了猪圆环病毒(PCV)聚合酶链反应(PCR)检测方法的技术要求;本标准适用于猪血清和组织中的猪圆环病毒检测, 以及其Ⅰ型(PCV-1)和Ⅱ型( PCV-2 )的鉴别。 |
GB/T 21674-2008
Detecting porcine circovirus with polymerase chain reaction
ICS １１．２２０
B４１
中华人民共和国国家标准
GB/T ２１６７４-２００８
猪圆环病毒聚合酶链反应试验方法
２００８-０４-０９发布
２００８-０６-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准附录Ａ为规范性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：农业部兽医诊断中心。
本标准主要起草人：田克恭、王宏伟、孙明、王传彬、陈西钊。
GB/T ２１６７４-２００８
引 言
猪圆环病毒依据其致病性和基因组差异分为无致病性的猪圆环病毒Ⅰ型（ｐｏｒｃｉｎｅｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓｔｙｐｅｌ，
ＰＣＶ-１）和有致病性的猪圆环病毒Ⅱ型（ｐｏｒｃｉｎｅｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓｔｙｐｅ２，ＰＣＶ-２）。ＰＣＶ-２是引发仔猪断奶后多
系统衰弱综合征（ｐｏｓｔ-ｗｅａｎｉｎｇｍｕｌｔｉｓｙｓｔｅｍｗａｓｔｉｎｇｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＰＭＷＳ）的主要病原。该病主要以患畜
生长迟缓、进行性消瘦和多系统病理损伤为特征，给世界各国主要养猪地区的规模化养猪业造成了一定
的经济损失。
GB/T ２１６７４-２００８
猪圆环病毒聚合酶链反应试验方法
１ 范围
本标准规定了猪圆环病毒（ＰＣＶ）聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法的技术要求。
本标准适用于猪血清和组织中的猪圆环病毒检测，以及其Ⅰ型（ＰＣＶ-１）和Ⅱ型（ＰＣＶ-２）的鉴别。
２ 实验室生物安全要求
试验操作应在生物安全Ⅱ级（ＢＳＬ-２级）以上的实验室进行。
３ 实验材料、仪器设备和试剂
３．１ 实验材料
眼科剪、眼科镊、称量纸、１０ｍＬ一次性注射器、１．５ｍＬ灭菌离心管、０．２ｍＬ薄壁ＰＣＲ管、琼脂糖、
５００ｍＬ量筒、５００ｍＬ锥形瓶、吸头（１０μＬ、２００μＬ、１０００μＬ）、灭菌双蒸水。
３．２ 仪器设备
分析天平、高速离心机、真空干燥器、ＰＣＲ扩增仪、电泳仪、电泳槽、紫外凝胶成像仪（或紫外分析
仪）、液氮罐或-７０℃冰箱、微波炉、组织研磨器、-２０℃冰箱、水浴锅、可调移液器（最大量程为２μＬ、
２０μＬ、２００μＬ、１０００μＬ）。
３．３ 试剂
本标准所用试剂，除特殊标注外，均为分析纯。
３．３．１ 消化液（见第Ａ．１章）。
３．３．２ ２％蛋白酶Ｋ溶液（见第Ａ．２章）。
３．３．３ 酚-三氯甲烷-异戊醇混合液（见第Ａ．３章）。
３．３．４ ２．５ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ（见第Ａ．４章）。
３．３．５ １０ｐｍｏｌ／μＬＰＣＶ引物（见第Ａ．５章）。
３．３．６ ０．５Ｕ／μＬＴａｑＤＮＡ聚合酶（见第Ａ．６章）。
３．３．７ １０倍ＰＣＲ缓冲液（见第Ａ．７章）。
３．３．８ 溴化乙锭（ＥＢ）溶液（见第Ａ．８章）。
３．３．９ 电泳缓冲液（５０倍）（见第Ａ．９章）。
３．３．１０ １％琼脂糖凝胶（见第Ａ．１０章）。
３．３．１１ 上样缓冲液（见第Ａ．１１章）。
３．３．１２ 异丙醇。
３．３．１３ ７５％乙醇（见第Ａ．１２章）。
３．３．１４ １５ｍｍｏＬ／Ｌ氯化镁（见第Ａ．１３章）。
３．３．１５ 灭菌双蒸水（见第Ａ．１４章）。
３．３．１６ 电泳缓冲液（１倍）（见第Ａ．１５章）。
４ 操作程序
４．１ 样品的采集与处......