路径: 主页 > GB/T > 第658页 > GB/T 21786-2008 | 标准编号 | GB/T 21786-2008 (GB/T21786-2008) | | 中文名称 | 化学品 细菌回复突变试验方法 | | 英文名称 | Chemicals -- Test method of bacterial reverse mutation | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | A80 | | 国际标准分类 | 13.300; 11.100 | | 字数估计 | 9,916 | | 发布日期 | 2008-05-12 | | 实施日期 | 2008-09-01 | | 采用标准 | OECD No.471-1997, IDT | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2008年第7号(总第120号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了化学品细菌回复突变试验的范围、术语和定义、试验基本原则、试验方法、试验数据和报告。本标准适用于检测化学品(有杀菌作用的除外)的致突变性。 | GB/T 21786-2008
Chemicals.Test method of bacterial reverse mutation
ICS １３．３００；１１．１００
A８０
中华人民共和国国家标准
GB/T ２１７８６-２００８
化学品 细菌回复突变试验方法
２００８-０５-１２发布
２００８-０９-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准等同采用经济合作与发展组织（ＯＥＣＤ）化学品测试指南Ｎｏ．４７１（１９９７年）《细菌回复突变试
验》（英文版）。
本标准作了以下编辑性修改：
---增加了范围部分；
---计量单位改成我国法定计量单位；
---删除了ＯＥＣＤ的参考文献部分。
本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会（ＳＡＣ/TＣ２５１）提出并归口。
本标准负责起草单位：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所。
本标准参加起草单位：北京市疾病预防控制中心、宁波出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：邓瑛、穆啸群、吴维皑、赵超英、龙再浩。
GB/T ２１７８６-２００８
OECD引言
验的原理是检测试验株中存在的回复突变并恢复合成必需氨基酸的能力。发生回复突变的细菌能在缺
乏特定必需氨基酸的条件下生长，而亲代菌株则不能生长，故能检出。当营养缺陷型菌株在受试样品作
用下发生回复突变后，即恢复了合成特定氨基酸的能力，因此可以在不含该氨基酸的培养基上形成菌
落，而那些没有发生突变的菌株和突变菌株的亲代菌株则因无法合成特定氨基酸而不能在不含该氨基
酸的培养基上形成菌落。
２．点突变是人类的很多遗传性疾病的原因，而且，目前已有充足的证据证明，人和实验动物体细胞
的癌基因和抑癌基因的点突变与肿瘤发生有关。细菌回复突变试验具有快速、经济和操作相对简便等
优点。很多试验菌株还具有某些特征，使其对某类致突变物更加敏感，这些特征包括回复突变位点的应
答性ＤＮＡ序列、细胞对大分子物质的通透性增高以及ＤＮＡ修复系统的消除（缺失）或ＤＮＡ易错修复
增多等。通过特异性菌株获得的试验结果可为遗传毒性物质诱发的突变类型提供有价值的研究资料。
已建立了包含大量不同结构化学物的细菌回复突变试验结果的数据库，可以从中得到所需资料，同时，
还为测试不同理化性质的化学物（例如可对挥发性物质）建立了完善的方法。
３．细菌恢复突变试验应用的是原核细胞，其在吸收、代谢、染色体结构、ＤＮＡ修复过程等方面与哺
乳动物细胞都有差别。且本试验是体外试验，一般需要加入外源性代谢活化系统。但外源性代谢活化
系统不能完全模拟体内代谢条件，因此，本试验的结果不能为受试样品对哺乳动物的致突变性和致癌性
提供直接证据。
４．细菌回复突变试验通常作为遗传毒性初筛试验，尤其适用于对受试样品诱发点突变能力的检
测。大量研究数据表明，很多在本试验中获得阳性结果的化学物在其他试验中也具有致突变活性。但
也有一些致突变剂在本试验中（结果）为阴性的例子，本试验存在这种缺陷可能是由于检测终点的特殊
性质、代谢活化过程不同以及生物利用度的差异等原因造成的。另一方面，一些使本试验灵敏度增加的
因素也会造成对致突变活性估计过高。
５．细菌回复试验不适合评价某些类型的化学物，例如，具有较强杀菌作用的化合物（如某些抗生
素）、认为或已知对哺乳动物细胞复制过程有特异性干扰作用的化合物（如拓扑异构酶抑制剂、核苷酸类
似物等），这些物质选用哺乳动物的致突变试验更合适。
６．尽管很多在本试验中获得阳性结果的化学品是哺乳动物的致癌物，但这种相关性并不是绝对
的，而是与化学物的种类有关。还有一些致癌物不能用本试验检出，因为这些物质是通过其他的、非遗
传致癌机制或受试菌株不具备（存在）的机制引发癌症的。
GB/T ２１７８６-２００８
化学品 细菌回复突变试验方法
１ 范围
本标准规定了化学品细菌回复突变试验的范围、术语和定义、试验基本原则、试验方法、试验数据和
报告。
本标准适用于检测化学品（有杀菌作用的除外）的致突变性。
２ 术语和定义
下列定义和术语适用于本标准。
２．１
株（分别为组氨酸和色氨酸）的突变，以产生一株不依赖外界提供氨基酸的菌株。
２．２
能够引起ＤＮＡ碱基改变的物质。在回变试验中，这种改变可发生在原发突变位点，在细菌基因组
中也可在第二位点发生突变。
２．３
能够引起ＤＮＡ中单个或多个碱基对的增加或缺失，继而改变了ＲＮＡ的读码框的物质。
３ 试验基本原则
３．１ 细菌悬液分别在加入或不加入外源性代谢活化系统的条件下与受试样品接触，在平皿掺入试验
中，将上述混合物与顶层琼脂充分混匀，迅速倾入底层琼脂平板（最低营养琼脂）上。在预孵育试验中，
先将细菌悬液与受试样品混合进行预孵育，然后再与顶层琼脂充分混匀，迅速倾入底层琼脂平板（最低
营养琼脂）上。上述平皿培养２ｄ～３ｄ后，计数回复菌落数并与溶剂对照组的自发回复菌落数进行
比较。
３．２ 细菌回复突变试验有数种操作方法，其中最常用的是平皿掺入法、预孵育法、震荡培养法和悬浮培
养法等。还有用于检测气体或蒸气的改良方法。
３．３ 本标准所描述的主要是平皿掺入法和预孵育法。这两种方法在加入或不加入代谢活化系统的条
件下都能进行。有些化学品用预孵育法更有效，包括短链脂族亚硝胺、二价金属、醛类、偶氮染料和重氮
化合物、千里光生物碱、烯丙基化合物和硝基化合物。在研究中还发现某些类别的化学品用标准的方
法，如平皿掺入法和预孵育法并非总能检出阳性结果，这种情况应视作“特例”，并强烈建议采用其他替
代试验程序进行检测。在文献中，已......
|