路径: 主页 > GB/T > 第658页 > GB/T 21827-2008 | 标准编号 | GB/T 21827-2008 (GB/T21827-2008) | | 中文名称 | 化学品 皮肤变态反应试验 局部淋巴结方法 | | 英文名称 | Chemicals -- Test method of skin sensitization -- Local lymph node assay (LLNA) | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | A80 | | 国际标准分类 | 13.300; 11.100 | | 字数估计 | 8,816 | | 发布日期 | 2008-05-12 | | 实施日期 | 2008-09-01 | | 采用标准 | OECD No.429-2002, IDT | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2008年第8号(总第121号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了皮肤变态反应试验——局部淋巴结法的范围、试验基本原则、试验方法、试验数据和报告。本标准适用于检测化学品致皮肤变态反应作用, 即检测皮肤变态反应诱导阶段淋巴细胞增殖的反应, 可以提供评估剂量-反应的量化数据。 | GB/T 21827-2008
Chemicals.Test method of skin sensitization.Local lymph node assay (LLNA)
ICS １３．３００；１１．１００
A８０
中华人民共和国国家标准
GB/T ２１８２７-２００８
化学品 皮肤变态反应试验
局部淋巴结方法
（LLNA）
２００８-０５-１２发布
２００８-０９-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准等同采用经济合作与发展组织（ＯＥＣＤ）化学品测试指南Ｎｏ．４２９（２００２年）《皮肤变态反应试
验 局部淋巴结法试验》（英文版）。
本标准做了下列编辑性修改：
---增加了“范围”一章；
---计量单位改为我国法定计量单位；
---删除了ＯＥＣＤ的参考文献部分。
本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会（ＳＡＣ/TＣ２５１）提出并归口。
本标准负责起草单位：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所。
本标准参加起草单位：上海出入境检验检疫局、宁波出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：刘清君、邱璐、孙金秀、史晓、马中春。
GB/T ２１８２７-２００８
OECD引言
１．ＯＥＣＤ试验指南立足从科学技术进步和动物福利的角度，对检测方法的建立和优化进行定期审
查，从而决定是否对现有的方法进行更新或者建立新的方法指南。基于此目的，一种新的方法，即利用
小鼠进行的判断皮肤变态反应的方法---局部淋巴结法（ＬＬＮＡ）已经得到充分的验证并被接受成为新
的ＯＥＣＤ指南。它是目前公布的第二个评估化学品对皮肤致敏作用的动物试验指南。另一个为利用
豚鼠进行的最大反应试验和局部封闭涂皮试验的指南。
２．ＬＬＮＡ的优点是既体现了科学的进步，又兼顾了动物福利的问题。它检测的是皮肤变态反应诱
导阶段淋巴细胞的增殖，可以提供评估剂量-反应量化的数据。关于ＬＬＮＡ验证过程以及相关工作的
综述已经发表。此外，值得注意的是，在豚鼠试验中推荐使用的轻-中强度的阳性对照致敏物，在ＬＬＮＡ
试验中同样适用。
３．ＬＬＮＡ是鉴别皮肤致敏化学品的可选择的方法之一，它既可以识别皮肤致敏化学品，也能够确
定那些没有明显皮肤致敏活性的化学品。当然这不是说在所有的情况下ＬＬＮＡ都可以替代豚鼠试验，
但这种方法具有一定的优点，是变态反应试验可选择的方法之一，通常也不需要对阳性和阴性结果再进
一步确认。
４．ＬＬＮＡ是一种体内试验，不可避免要使用一定量动物，但ＬＬＮＡ可以减少动物使用的数量，而
且优化了动物接触受试物的方法。ＬＬＮＡ是基于化学品刺激下致敏反应的诱导阶段建立的。与豚鼠
试验不同，ＬＬＮＡ不需要激发皮肤的超敏反应；而且也不需要豚鼠试验中的最大反应，因此不使用佐
剂，这样就减少了动物的痛苦。虽然ＬＬＮＡ比传统豚鼠试验具有这些优点，但同时必须认识到ＬＬＮＡ
也有一定的缺陷（如：在某些金属物质的试验中发现假阴性的结果，在某些皮肤刺激物试验中出现假阳
性结果），这时必须进行传统的豚鼠试验。
GB/T ２１８２７-２００８
化学品 皮肤变态反应试验
局部淋巴结方法
１ 范围
本标准规定了皮肤变态反应试验---局部淋巴结法的范围、试验基本原则、试验方法、试验数据和
报告。
本标准适用于检测化学品致皮肤变态反应作用，即检测皮肤变态反应诱导阶段淋巴细胞增殖的反
应，可以提供评估剂量-反应的量化数据。
２ 试验基本原则
ＬＬＮＡ的基本原则是致敏化学品在暴露后，能够诱导染毒部位的引流淋巴结内淋巴细胞的增殖。
增殖反应与化学品的剂量（和致敏原的致敏力）成比例，因此可以通过简单的方法获得客观、定量的致敏
试验数据。ＬＬＮＡ通过比较受试样品试验组与溶剂对照组增殖的剂量-反应关系来评估增殖状况。对
受试样品试验组与溶剂对照组的增殖比率即刺激指数（SI）进行比较，当该指数大于等于３时受试样品
才能作为潜在皮肤致敏物进行进一步评估。
本文所述ＬＬＮＡ法是通过放射标记检测细胞增殖。也可以使用其他的毒性终点的检测手段评价
细胞的增殖，但必须提供充足的理由和科学依据，包括完全引用和方法学的描述。
３ 试验方法
３．１ 受试物
受试样品可以是液态、固体和颗粒状。
赋形剂应在考虑最大试验浓度和可溶性的基础上进行选择，使形成的溶液／悬浮液适于使用。推荐
赋形剂按优先顺序为：丙酮／橄榄油（４∶１，体积分数）、二甲基甲酰胺、丁酮、丙二醇和二甲基亚砜，如具
备充分的科学依据，也可使用其他赋形剂。在某些情况下有必要增加受试物使用的临床赋形剂或商品
化制剂作为另外的对照。特别应注意要使亲水物质分散在赋形剂系统中，这样既能湿润皮肤，又不会立
即流失，但要避免使用只含水的赋形剂。
３．２ 实验动物和饲养环境
３．２．１ 动物种属
选择未生育过和未怀孕的成年雌性小鼠（ＣＢＡ／Ｃａ或ＣＢＡ／Ｊ品系）。试验开始时鼠龄为８周～
１２周，体重变异应小于平均体重的２０％。选择其他种属或雄性动物时应有充足的证据表明在该试验中
不存在种属和性别的差异。
３．２．２ 动物饲养
动物单笼饲养，实验动物房温度应为２３℃±３℃，除了清理动物房时外，其他时间的相对湿度应在
３０％～７０％之间，最好保持在５０％～６０％。应采用人工照明，每天１２ｈ明暗......
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