[PDF] GB/T 22333-2008 - 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| GB/T 22333-2008 | 239 | GB/T 22333-2008 | <=3 | 日本乙型脑炎病毒反转录聚合酶链反应试验方法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB/T 22333-2008 (GB/T22333-2008) |
| 中文名称 | 日本乙型脑炎病毒反转录聚合酶链反应试验方法 |
| 英文名称 | Reverse transcription polymerase chain reaction for Japanese B encephalitis virus |
| 行业 | 国家标准 (推荐) |
| 中标分类 | B41 |
| 国际标准分类 | 11.220 |
| 字数估计 | 6,645 |
| 发布日期 | 2008-08-22 |
| 实施日期 | 2008-12-01 |
| 标准依据 | 国家标准批准发布公告2008年第14号(总第127号) |
| 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 |
| 范围 | 本标准规定了日本乙型脑炎病毒核酸的反转录聚合酶链反应试验的技术要求。本标准适用于动物脑组织中日本乙型脑炎病毒核酸的检测。 |
GB/T 22333-2008
Reverse transcription polymerase chain reaction for Japanese B encephalitis virus
ICS １１．２２０
B４１
中华人民共和国国家标准
GB/T ２２３３３-２００８
日本乙型脑炎病毒
反转录聚合酶链反应试验方法
２００８-０８-２２发布
２００８-１２-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准的附录Ａ为规范性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：农业部兽医诊断中心。
本标准主要起草人：王宏伟、孙明、王传彬、陈西钊、田克恭。
GB/T ２２３３３-２００８
日本乙型脑炎病毒
反转录聚合酶链反应试验方法
１ 范围
本标准规定了日本乙型脑炎病毒核酸的反转录聚合酶链反应试验的技术要求。
本标准适用于动物脑组织中日本乙型脑炎病毒核酸的检测。
２ 试剂
２．１ 变性液（见第Ａ．１章）。
２．２ ２ｍｏｌ／Ｌ乙酸钠溶液（ｐＨ４．０）。
２．３ 酚-三氯甲烷-异戊醇混合液（见第Ａ．２章）。
２．４ ２．５ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ。
２．５ ８ｍｍｏｌ／Ｌ上下游引物混合液（引物序列见第Ａ．３章）。
２．６ １０倍ＰＣＲ缓冲液。
２．７ １％溴化乙锭（ＥＢ）溶液。
２．８ ＴＡＥ电泳缓冲液。
２．９ １％琼脂糖凝胶。
２．１０ 上样缓冲液（见第Ａ．４章）。
２．１１ 其他试剂：１０Ｕ／μＬＡＭＶ反转录酶、１００ｂｐＤＮＡ分子质量标准物 、５０Ｕ／μＬＲＮＡ酶抑制剂、
５Ｕ／μＬT犪狇ＤＮＡ聚合酶、异丙醇、７５％乙醇溶液、２５ｍｍｏｌ／Ｌ氯化镁溶液、ＤＥＰＣ处理过的无菌双
蒸水。
３ 实验室条件
３．１ 实验室级别要求
实验室必须为生物安全Ⅲ级（ＢＳＬ-３级）实验室。
３．２ 实验室分区
ＲＴ-ＰＣＲ试验区域分反应液配制区（配液区）、核酸提取区、扩增区、电泳区。流程顺序为配液区→
核酸提取区→扩增区→电泳区。严禁器材和试剂倒流。
３．３ 实验室应配备的仪器及耗材
３．３．１ 仪器：分析天平、高速离心机、真空干燥器、ＰＣＲ扩增仪、电泳仪、电泳槽、紫外凝胶成像仪（或紫
外分析仪）、液氮罐或-７０℃冰箱、微波炉、组织研磨器、-２０℃冰箱、水浴锅、可调移液器（最大量程分
别为２μＬ、２０μＬ、２００μＬ、１０００μＬ）。
３．３．２ 耗材：眼科剪、眼科镊、称量纸、１０ｍＬ一次性注射器、１．５ｍＬ灭菌离心管、０．２ｍＬ薄壁ＰＣＲ
管、琼脂糖、５００ｍＬ量筒、５００ｍＬ锥形瓶、吸头（１０μＬ、２００μＬ、１０００μＬ）、灭菌双蒸水。
４ ......