[PDF] GB/T 22916-2008 - 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| GB/T 22916-2008 | 209 | GB/T 22916-2008 | <=3 | 水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测方法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB/T 22916-2008 (GB/T22916-2008) |
| 中文名称 | 水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测方法 |
| 英文名称 | Protocol of fluorogenic RT-PCR for vesicular stomatitis virus |
| 行业 | 国家标准 (推荐) |
| 中标分类 | B41 |
| 国际标准分类 | 11.220 |
| 字数估计 | 9,977 |
| 发布日期 | 2008-12-31 |
| 实施日期 | 2009-05-01 |
| 标准依据 | 国家标准批准发布公告2008年第25号(总第138号) |
| 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 |
| 范围 | 本标准规定了水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测的操作方法。本标准适用于动物及其产品中水泡性口炎病毒的检测。 |
GB/T 22916-2008
Protocol of fluorogenic RT-PCR for vesicular stomatitis virus
ICS １１．２２０
B４１
中华人民共和国国家标准
GB/T ２２９１６-２００８
水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测方法
２００８-１２-３１发布
２００９-０５-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准参考了世界动物卫生组织（ＯＩＥ）《陆生动物诊断试验和疫苗手册（哺乳动物、禽鸟与蜜蜂）》
（第５版）。
本标准的附录Ａ为规范性附录，附录Ｂ为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检
疫局。
本标准主要起草人：花群义、周晓黎、曾少灵、曹琛福、詹爱军、张彩虹、林庆燕、陈兵、杨云庆、孙洁。
GB/T ２２９１６-２００８
水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测方法
１ 范围
本标准规定了水泡性口炎病毒荧光ＲＴ-ＰＣＲ检测的操作方法。
本标准适用于动物及其产品中水泡性口炎病毒的检测。
２ 缩略语
下列缩略语适用于本标准。
２．１ 荧光RT-PCR
荧光反转录-聚合酶链反应。
每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。
２．３ RNA
核糖核酸。
２．４ DEPC
焦碳酸磷酯。
２．５ PBS
磷酸盐缓冲盐水（配方见附录Ａ）。
２．６ T犪狇酶
T犪狇ＤＮＡ聚合酶。
２．７ 犞S犞
水泡性口炎病毒。
３ 原理
水泡性口炎病毒属ＲＮＡ病毒，根据水泡性口炎病毒两型共有基因特定的序列，合成一对特异性引
物和一条特异性的荧光双标记探针。通过严格设计和筛选的引物和探针，涵盖水泡性口炎病毒的两个
型和突变株，为水泡性口炎病毒的特异性通用引物和探针。探针的５′端标记ＦＡＭ荧光素，它发出的荧
光能够被检测仪器接收，称为报告荧光基团；３′端标记ＴＡＭＲＡ荧光素，它在近距离内能吸收５′端报告
荧光基团发出的荧光信号，称为淬灭荧光基团。在扩增时，T犪狇酶发挥它的５′→３′端外切核酸酶的功
能，将探针水解成单核苷酸，消除阻碍，标记在探针两端的报告荧光基团和淬灭荧光基团均游离于溶液
中，仪器检测到发出的荧光信号。
４ 材料与试剂
４．１ 仪器与器材
４．１．１ 荧光ＲＴ-ＰＣＲ检测仪。
４．１．２ 高速台式冷冻离心机（离心速度１２０００ｒ／ｍｉｎ以上）。
４．１．３ 台式离心机（离心速度３０００ｒ／ｍｉｎ）。
４．１．４ 混匀......