路径: 主页 > GB/T > 第618页 > GB/T 23182-2025 | 标准编号 | GB/T 23182-2025 (GB/T23182-2025) | | 中文名称 | 饲料质量安全检测方法建立、确认、验证和实验室内部质量控制实施指南 | | 英文名称 | Guideline for method development, validation and verification and internal quality control in feed quality and safety detection | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B46 | | 国际标准分类 | 65.120 | | 字数估计 | 18,119 | | 发布日期 | 2025-08-29 | | 实施日期 | 2026-03-01 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 23182-2008 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会 | GB/T 23182-2025: 饲料质量安全检测方法建立、确认、验证和实验室内部质量控制实施指南
ICS 65.120
CCSB46
中华人民共和国国家标准
代替GB/T 23182-2008
饲料质量安全检测方法建立、确认、验证和
实验室内部质量控制实施指南
2025-08-29发布
2026-03-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件代替GB/T 23182-2008《饲料中兽药及其他化学物检测实验规程》,与GB/T 23182-2008
相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下:
a) 更改了范围(见第1章,2008年版的第1章);
b) 删除了“饲料采样”(见2008年版的第4章);
c) 将“饲料中兽药及其他化学物的检测”更改为“方法建立”和“方法确认”(见第4章和第5章,
2008年版的第5章);
d) 将“检出兽药及其他化学物的确证”更改为“方法验证”(见第6章,2008年版的第6章);
e) 增加了“实验室内部质量控制”(见第7章);
f) 删除了“结果计算和表述”和“试验报告撰写”(见2008年版的第7章和第8章)。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口。
本文件起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、全国畜牧总站、中国农业大学、
上海市动物疫病预防控制中心、山东省畜产品质量安全中心。
本文件主要起草人:常碧影、田双喜、樊霞、张凤枰、粟胜兰、赵恩泽、李俊玲、黄士新、程林丽、刘晓露、
商军、索德成。
本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为:
---2008年首次发布为GB/T 23182-2008;
---本次为第一次修订。
饲料质量安全检测方法建立、确认、验证和
实验室内部质量控制实施指南
1 范围
本文件提供了饲料质量安全检测化学分析方法建立、确认、验证和实验室内部质量控制的指导和
建议。
本文件适用于饲料和饲料添加剂质量安全检测化学分析方法的建立、确认、验证和实验室内部质量
控制。
本文件不适用于生物学分析方法。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
GB 5009.295-2023 食品安全国家标准 化学分析方法验证通则
GB 13078 饲料卫生标准
GB/T 32465-2015 化学分析方法验证确认和内部质量控制要求
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
定性方法 qualitativemethod
根据物质的化学、生物或物理性质对其进行鉴定的分析方法。
[来源:GB/T 27417-2017,3.5]
3.2
定量方法 quantitativemethod
测定被分析物的质量或质量分数的分析方法。
注:用适当单位的数值表示。
[来源:GB/T 27417-2017,3.6,有修改]
3.3
确证方法 confirmatorymethod
能提供目标物全部或部分信息,依据这些信息可以明确定性,在必要时在关注的浓度水平上进行定
量的方法。
[来源:GB/T 27417-2017,3.7]
3.4
筛选方法 screeningmethod
具有高效处理大量样品的能力,用于检测一种物质或一组物质在所关注的浓度水平上是否存在的
方法。
注:这些方法用于筛选大量样品可能的阳性结果,并用来避免假阴性结果。此类方法所获得的检测结果通常为定
性结果或半定量结果。
[来源:GB/T 27417-2017,3.8]
3.5
灵敏度 sensitivity
分析方法对单位浓度或单位量待测物变化所产生的响应量的变化程度。
3.6
正确度 trueness
无穷多次重复测量值的平均值与一个参考量值间的一致程度。
[来源:ISO/IEC 指南99:2007,2.14]
3.7
准确度 accuracy
样品中待测物测定值(结果)与被测量真值或约定真值间的一致程度。
3.8
基质效应 matrixeffects
样品基质中的一种或多种成分对目标分析物检测结果的影响。
注:相比于试剂中目标分析物检测结果,基质效应可能会造成目标分析物响应信号增强或减弱。
[来源:GB/T 32467-2015,9.29]
3.9
线性范围 linearrange
被测物浓度与仪器响应值呈线性关系并且能满足定量要求(精密度和准确度)的浓度范围。
3.10
检出限 limitofdetection;LOD
分析方法在给定的置信度内从样品背景信号中检出被测物的最低量(或最低浓度),但不一定准确
定量。
3.11
分析方法在满足定量要求(精密度及准确度)的前提下,能定量测出样品中被测物的最低量(或最低
浓度)。
3.12
回收率 recovery
已知确切含量样品中的待测物或添加到空白样品中的测试物测定值占其真实值的百分比。
3.13
精密度 precision
分析方法重复测定同一样品所得测定值间的一致程度。
3.14
多次测定值的标准差(SD)与算术平均值的百分比。
3.15
重复性 repeatability
在重复性条件下,相互独立的测试结果之间的一致程度。
3.16
在同一实验室,由同一操作者使用相同设备和试剂,按相同的测试方法,并在短时间内从同一被测
对象取得相互独立结果的条件。
3.17
再现性 reproducibility
在再现性条件下,测试结果之间的一致程度。
3.18
在不同的实验室,由不同的操作者使用不同的设备和试剂,按相同的测试方法,从同一被测对象取
得测试结果的条件。
3.19
最低限量 minimumlimit
对某一定量特性规定和要求的物质限值。
[来源:GB/T 27417-2017,3.9,有修改]
3.20
方法选择性 methodselectivety
方法能够区分目标分析物和样品中其他成分(如其他待测物、基质成分、其他可能的干扰物)的
程度。
[来源:GB/T 32467-2015,9.14]
3.21
方法稳健性 methodruggedness
方法耐用性 methodrobustness
分析方法对实验室一般不刻意控制或不能完全保持完全一致的微小条件变化的敏感性。
[来源:GB/T 32467-2015,9.15]
3.22
方法确认 methodvalidation
实验室通过试验,提供客观有效证据证明特定检测方法满足预期的用途。
3.23
在一个实验室内,在合理的时间间隔内,用一种方法在预定的条件下,对相同或不同样品进行的分
析试验,以证明特定检测方法满足预期的用途。
[来源:GB/T 27417-2017,3.3]
3.24
在两个或多个实验室间依照预定的条件对相同的方法对相同的样品的测定,以证明特定检测方法
满足预期用途。
[来源:GB/T 27417-2017,3.4]
3.25
方法验证 methodverification
实验室通过核查,提供客观有效证据证明满足检测方法规定的要求。
[来源:GB/T 27417-2017,3.2]
3.26
建立并确认系列质量控制程序,通过实施此程序,对检测操作和检测结果实施连续监控的过程,判
断对外发布的检测结果是否足够可靠。
[来源:GB/T 32467-2015,9.1,有修改]
4 方法建立
4.1 总则
所建立的饲料质量安全检测化学分析方法需考虑但不限于下列几点:
---与饲料原料目录、饲料添加剂品种目录和饲料添加剂安全使用规范,以及饲料卫生标准等强制
性标准相协调;
---方法具有科学性、合理性和实用性;
---方法内容完整、表述准确,易于理解,可操作性强,便于实施;
---检测结果准确、稳定、可靠,且能实现量值溯源;
---方法相关技术文件和数据资料完整。
4.2 方法建立
4.2.1 概述
饲料质量安全检测化学分析方法建立前,全面了解并分析下述情况:
---待测物的功效和/或风险,有关法律法规和相关标准是否有待测物的允许使用量范围、限量或
禁用规定;
---待测物在饲料中的存在状态(游离/结合),待测物的化学结构、理化性质、对光热等的稳定性和
可能的量值范围;
---饲料基质对待测物的影响,是否存在待测物的类似物和/或干扰物;
---国内外相关标准方法和文献方法查询、分析和比较;
---确定拟建立方法的类型、适用范围和方法建立及验证的完整技术路线。
4.2.2 前期准备
4.2.2.1 了解待测物在饲料中的营养价值、功能、作用或对动物健康危害与环境的潜在风险;了解国内
外相关法律法规规定、限量规定、强制性标准要求和监测要求。
4.2.2.2 调研国内外相关方法标准,了解其适用范围、待测物、方法、技术先进性或缺陷、应用情况等。
4.2.2.3 收集国内外相关文献资料,了解分析方法和相关测试手段的最新研究进展。
4.2.3 方案制定与试验准备
4.2.3.1 方案制定
在前期调研基础上制定工作方案,具体如下:
---根据文献资料分析待测物的种类和性质,确定分析方法的类型(容量法、重量法、光谱法、色谱
法、质谱法等);
---根据方法原理确定方法的基本程序、试验步骤,以及各试验步骤需考察优化的试验条件和
参数;
---根据样品类型、待测物性质与含量范围、方法要求等,确定样品量、制备方法、粉碎粒度和样品
贮存条件(如是否需要特殊包装或避光、保存温度等)、贮存时间及空白样品等要求。
4.2.3.2 试验准备
准备试验所需的仪器设备、标准物质、标准样品、试剂、耗材、典型样品、空白样品等。
4.2.4 方案实施
4.2.4.1 总则
方案的具体实施步骤如下:
---分析方法的基本程序和步骤分为前处理和测定两步,前处理包括消解/提取、净化/富集等,测
定包括仪器配置、测定条件与重要参数确定、定性(待测物的识别和确定)和定量分析等;
---分析方法制定顺序不一定与分析方法过程顺序一致,如液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法从
测定部分开始,先确定质谱最佳工作参数和定性定量离子,再确定色谱分离条件,最后确定样
品提取/净化条件;
---每段研究均需分别考察确定可能影响该段试验效果的试验条件或重要仪器参数,并考察是否
适用于范围中的所有样品类型。
4.2.4.2 消解/提取
4.2.4.2.1 容量法、光谱法、色谱法、质谱法等测定对象均为溶液中的待测物,溶解待测物的方法包括但
不限于以下:
---矿物质元素、蛋白质及其他有机物等多采用消解(酸解)、酶解或其他方式;
---添加剂、真菌毒素、兽药残留、农药残留等有机物选用适当的溶剂,采用涡旋、振荡、超声、微波、
加速溶剂萃取、固相分散萃取(QuEChERS)等方式提取。
4.2.4.2.2 选择消解/提取后确定具体条件,如试样用量、消解用酸/皂化用碱的种类、浓度和用量,消
解/皂化的温度和时间,以及其他消解方式(如高压罐消解、微波消解)等试验条件与操作参数的研究和
确定。
4.2.4.2.3 确定适宜的提取溶剂、提取方式、提取时间、提取次数等。
4.2.4.3 净化
以液液萃取(LLE)、固相萃取(SPE)、固相分散萃取(QuEChERS)等方法净化,需优化试验条件,包
括但不限于:
---LLE萃取溶剂、萃取次数;
---SPE净化小柱类型、柱容量、柱活化平衡、试样溶液加载量、加载速度、淋洗液和洗脱液等;
---QuEChERS吸附剂类型和用量、吸附剂组合、溶剂类型和用量、吸附时间等。
4.2.4.4 富集
采用氮吹、蒸发等浓缩方式,确定温度、复溶溶液等条件。
4.2.4.5 仪器设备和测试条件确定
4.2.4.5.1 仪器设备
4.2.4.5.1.1 除常规仪器设备和专用仪器设备(如凯氏定氮仪、脂肪测定仪、纤维测定仪、氨基酸测定仪
等)外,常用光谱类和色谱质谱类仪器如下:
---光谱类:紫外-可见光分光光度计、旋光仪、原子吸收光谱(AAS)仪、原子荧光光谱(AFS)仪、荧
光分光光度(FLS)计、电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)仪和电感耦合等离子体发射质
谱(ICP-MS)仪等;
---色谱质谱类:气相色谱(GC)仪、液相色谱(LC)仪、离子色谱(IC)仪、气相色谱质谱联用(GC-
MS)仪、气相色谱-三重四级杆串联质谱(GC-MS/MS)仪和液相色谱-三重四级杆串联质谱
(LC-MS/MS)仪等。
4.2.4.5.1.2 仪器设备选择主要依据待测物的理化性质和饲料质量安全检测要求,常量、微量和痕量元
素测定采用光谱类仪器,有机物测定采用色谱质谱类仪器,易挥发或可衍生为易挥发物的测定采用气相
色谱仪和气相色谱质谱联用仪,禁用物测定采用气相色谱质谱联用仪、气相色谱-三重四级杆串联质谱
仪和液相色谱-三重四级杆串联质谱仪。
4.2.4.5.2 测试条件
仪器设备确定后,通过试验研究选择和确定测定条件和参数。
---光谱法:通过待测物的吸收或发射光谱特性定量,分光光度法、火焰光度法和原子吸收光谱法
需给出待测元素的吸收波长或发射波长等参数;原子荧光光谱法需设定仪器参数灯电流、光电
倍增管负高压、炉温、炉体高度、保护气流量等参数;电感耦合等离子体发射光谱法和电感耦合
等离子体发射质谱法则需给出待测元素激发光波长、元素质量数、等离子气流速、载气流速、射
频功率和雾化室温度等参数。
---色谱质谱法:气相色谱法需确定色谱柱类型、色谱柱温度、进样口温度和检测器参数、流动相速
度等参数;液相色谱法需确定色谱柱类型(正相、反相)、色谱柱温度、检测器参数、耐受pH、流
动相组成和速度、洗脱方式等参数;气相色谱-质谱联用法需确定电子轰击电离(EI)或化学电
离(CI)、全扫描或选择离子扫描(SIM)数据采集等参数;液相色谱-串联质谱法需确定电喷雾
电离(ESI+或ESI-)、大气压化学电离(APCI)等电离模式,并确定全扫描、选择离子扫描
(SIM)、选择反应检测(RSM)、多反应监测(MRM)等数据采集模式。
4.2.4.6 基质效应
4.2.4.6.1 评价
采用色谱-质谱联用技术测定时,需确认试样溶液中某些组分或共流出物是否会产生基质效应
(ME)。通过柱后注射法、提取后添加法、相对响应值法或标准曲线法检验,即比较正常的标准(系列)
溶液和用同类型空白试样提取液配制的标准(系列)溶液的相对响应值或标准曲线斜率来鉴别,如果相
对响应值或标准曲线斜率差异大于±20%,则证明有基质效应存在。基质效应的评价方法如下。
---响应值比较法:基质效应(%)=基质溶液中分析物峰面积/纯溶剂中分析物峰面积×100%。
当ME在80%~120%之间不存在基质效应;当ME低于80%时,则认为基质对目标化合物的
响应产生抑制作用;当 ME高于120%时,则认为基质对目标化合物的响应存在增强作用。
---曲线斜率比较法:F=基质匹配曲线斜率/纯溶剂曲线斜率。当F 在0.8~1.2之间时不存在
基质效应;当F 低于0.8时,则认为基质对目标化合物的响应产生抑制作用;当 F 高于
1.2时,则认为基质对目标化合物的响应存在增强作用。
4.2.4.6.2 消除
4.2.4.6.2.1 GC-MS法、GC-MS/MS法通过在标准系列溶液和试样溶液中加入保护剂或改用适当进样
方法来消除;LC-MS/MS法用基质匹配标准曲线校准定量和内标法来消除。
4.2.4.6.2.2 基质匹配标准曲线校准时,标准曲线符合4.2.4.8.1的要求。
4.2.4.6.2.3 内标法校准时,用待测物同位素内标或试样中不存在且与待测物不发生反应的其他化合
物作内标物。若内标物在上机测定前加入,需保证试样溶液和标准系列溶液同样的质量浓度;若在试样
提取前添加,需保证试样溶液中内标物添加量在上机前达到与标准系列溶液中同样的质量浓度。
4.2.4.7 标准溶液和试样溶液稳定性试验
4.2.4.7.1 标准溶液
开展标准储备溶液和标准中间溶液中待测物的稳定性试验。配制标准溶液和首次浓度检测后,按
表1储存标准储备溶液和标准中间溶液,并分别于1周、4周和8周后测定待测物的浓度,确定待测物
降低10%的时间点,以及标准储备溶液和标准中间溶液的最佳储存条件和稳定时间。
表1 标准溶液待测物稳定性试验
储存条件 ≤-18℃ 2℃~8℃ 室温
避光 10份 10份 10份
光照 - - 10份
4.2.4.7.2 试样溶液
根据待测物性质、试样溶液特性,研究确定试样溶液的贮存条件和稳定时间。在规定贮存条件和贮
存时间内,试样溶液中待测物含量无显著差异。
4.2.4.8 测定
4.2.4.8.1 标准曲线的建立与校准
标准曲线的建立与校准步骤如下:
---按照试剂空白、样品空白、标准曲线、试样的顺序进样测定;
---标准曲线至少6个点均匀分布于线性范围内,其最低点需低于或等于方法定量限对应的浓度;
---定量方法的线性回归方程相关系数不低于0.99,定性方法不低于0.98,各浓度点对线性方程响
应的偏离不超过±20%;
---定量采用多点校准和单点校准,多点校准时,试样溶液中待测物的响应值需在标准曲线的线性
范围之内,且对线性方程的偏离在±20%之内;单点校准时试样溶液中待测物的检测响应值与
校准标准溶液中该待测物的响应值相一致,相对偏差在±30%之内。
4.2.4.8.2 定性
4.2.4.8.2.1 色谱
色谱识别需满足但不限于如下情况:
---待测物的色谱峰保留时间大于死时间的2倍;
---色谱峰峰形对称,各组分分离度需达1.5以上;
---试样溶液中待测物的色谱峰保留时间与标准系列溶液质量浓度相当者保留时间一致,GC相
对偏差在±0.5%之内,HPLC相对偏差在±2.5%之内,UPLC要求相差不超过0.1min。随
着仪器性能的提高,GC要求提高至相差不超过0.1min,LC-MSn 要求提高至相差不超过
0.2min。
4.2.4.8.2.2 质谱
质谱定性分析包括质谱识别和选择离子识别。
a) 质谱识别
质谱仪提供的质谱图、同位素模型和/或选择离子信息对于待测物具有很强的特异性,但需考虑以
下几点:
---待测物参比谱图和试样在相同仪器、相同试验条件下获得;
---避免因待分析物浓度过载、而使离子比发生变化;
---仪器软件中的参比谱图是在同批分析中由无基质效应的标准溶液得出的;
---对于全扫描测量,通过反褶积或其他算法,用手动或自动方式扣除背景,确保由色谱峰得到的
质谱具有代表性,且在整个批次测试中使用统一的校正方法。
b) 选择离子识别
选择离子满足但不限于如下情况:
---待测物在其分析的基质中和一定的浓度范围内有足够的选择性;
---在测定和识别程序中尽可能使用待测物的分子离子,(去)质子化分子或加合物离子;
---高质荷比的离子选择性较好,故不选择m/z< 100的离子,也不选择只失去水分子或失去分子
中相同部分的离子;
---试样提取离子的色谱图与同批分析的、浓度相当的标准溶液、提取离子的色谱图具有相似的保
留时间、峰形和响应比。来自待测物的不同选择性离子的色谱峰需完全重叠,如果一个离子的
色谱图有明显的干扰不能用于识别;
---不同类型和型号的质谱检测器选择性不同,识别置信度也不同。不同质谱技术的识别要求见
表2,作为识别的指导性标准;
---用于识别的、试样选择离子相对强度(丰度)比需与相同分析序列、同样条件下测定的校准标准
获得的选择离子的参比离子相对强度的平均值相匹配,差异不超过±30%;
---对于高分辨质谱仪,虽然其离子强度比也受提取离子色谱峰的信噪比、碎片离子产生方式以及
基质的影响。但由于能得到更精确的质量测量值,没必要考虑试样选择离子相对强度与校准
标准的匹配关系,作为识别的另一证据;
---其他的质谱信息,如全扫描光谱的评估、同位素模型、加成离子、精确碎片离子质量,更多的子
离子或精确的子离子质量等,进一步提高识别的置信度。
表2 质谱识别要求
MS检测器/特性
分辨率 典型系统(示例)
数据采集处理
识别要求
最小离子数 其他
质谱分辨
单元
单级质谱(MS)
四级杆、离子阱、飞行时
间质谱(TOF)
全 扫 描,限 制 m/z 范
围,单离子检测(SIM)
3个离子
串联质谱(MS/MS)
三重四级杆、离子阱、四
级 杆-离 子 阱 (Q-离 子
阱)、四级杆-飞行时间质
谱(Q-TOF)、四级杆-轨
道阱(Q-轨道阱)
选择或多反应监测(SRM
或 MRM),母离子分离等
于或 好 于 单 位 质 子 分
辨率
2个子离子
1)信噪比(S/N)≥3d;2)待
测物子离子和从色谱提取离
子的色谱峰需完全重合;3)试
样选择离子......
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