[PDF] GB/T 23197-2008 - 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| GB/T 23197-2008 | 519 | GB/T 23197-2008 | <=3 | 鸡传染性支气管炎诊断技术 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB/T 23197-2008 (GB/T23197-2008) |
| 中文名称 | 鸡传染性支气管炎诊断技术 |
| 英文名称 | Diagnostic techniques for avian infectious bronchitis |
| 行业 | 国家标准 (推荐) |
| 中标分类 | B41 |
| 国际标准分类 | 11.220 |
| 字数估计 | 13,171 |
| 发布日期 | 2008-12-31 |
| 实施日期 | 2009-05-01 |
| 标准依据 | 国家标准批准发布公告2008年第27号(总第140号) |
| 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 |
| 范围 | 本标准规定了鸡传染性支气管炎病毒分离、反转录-聚合酶链反应、微量血凝抑制试验以及气管环组织培养血清中和试验等四种诊断方法的技术要求。本标准适用于鸡传染性支气管炎的诊断和检疫。 |
GB/T 23197-2008
Diagnostic techniques for avian infectious bronchitis
ICS １１．２２０
B４１
中华人民共和国国家标准
GB/T ２３１９７-２００８
鸡传染性支气管炎诊断技术
２００８-１２-３１发布
２００９-０５-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准对应于ＯＩＥ《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（２００４）２．７．６鸡传染性支气管炎（ａｖｉａｎｉｎｆｅｃ-
ｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ），其一致性程度为非等效。在此基础上，根据国内科研成果增加了反转录-聚合酶链反
应和气管环组织培养血清中和试验，用于病原的鉴定和抗体检测。
本标准的附录Ａ为规范性附录，附录Ｂ为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会（ＳＡＣ/TＣ１８１）归口。
本标准起草单位：中国动物卫生与流行病学中心、华南农业大学。
本标准主要起草人：吴延功、廖明、王志亮、郭霄峰、刘佩兰、王永玲、孙承英。
GB/T ２３１９７-２００８
鸡传染性支气管炎诊断技术
１ 范围
本标准规定了鸡传染性支气管炎病毒分离、反转录-聚合酶链反应、微量血凝抑制试验以及气管环
组织培养血清中和试验等四种诊断方法的技术要求。
本标准适用于鸡传染性支气管炎的诊断和检疫。
２ 临床诊断
２．１ 鸡传染性支气管炎是鸡的一种急性、接触性传染病，临床上有多种表现形式，根据病变类型，可将
其分为：呼吸道型、肾型等，但以经典的呼吸道型发生的最为普遍。
２．２ 呼吸道型表现为呼吸困难，有罗音或喘鸣音，雏鸡感染可引起死亡。
２．３ 青年鸡和产蛋鸡感染后，可引起产蛋鸡停产或产蛋下降。表现为产蛋鸡产蛋下降，产软皮蛋、砂壳
蛋或畸形蛋，蛋清稀薄如水。
２．４ 肾型表现为病鸡排白色稀粪，脱水，死亡率高。
２．５ 符合上述临床症状之一者，可以怀疑鸡群感染鸡传染性支气管炎病毒，确诊需经实验室检验。
３ 病原的分离
３．１ 样品的采集
３．１．１ 对于急性呼吸道型的病鸡，应采取气管渗出物；对于刚扑杀的病鸡则采取支气管和肺组织。
３．１．２ 对于肾型和产蛋下降型的病鸡，应采取发病鸡的肾脏或输卵管。也可从大肠，尤其是盲肠扁桃
体或粪便分离病毒，但从消化道分离到的病毒未必与现流行或发生的病毒有直接关系。
３．２ 样品的处理
３．２．１ 将病料放在含有１００００ＩＵ／ｍＬ青霉素和１０ｍｇ／ｍＬ链霉素的ｐＨ值为７．４的磷酸缓冲盐水
（ＰＢＳ）内，置冰盒内送往实验室。ｐＨ值为７．４的ＰＢＳ的配方见附录Ａ。
２０ｍｉｎ，取上清液，加入终浓度为１０００ＩＵ／ｍＬ的青霉素和终浓度为１ｍｇ／ｍＬ的链霉素，３７℃下作用
１ｈ后用于鸡胚接种。
３．３ 分离培养
３．３．１ 取病料上清液，接种于５枚９日龄～１１日龄的ＳＰＦ鸡胚尿囊腔内，另５枚接种ＰＢＳ，接种量均
为０．２ｍＬ／枚。３７℃孵育。每天照蛋，２４ｈ内死亡的鸡胚弃去。收集接种后３ｄ～７ｄ的鸡胚尿囊液，
将所有尿囊液混合，用含１０００ＩＵ／ｍＬ青霉素和１ｍｇ／ｍＬ链霉素的ＰＢＳ稀释５倍～１０倍，继续在鸡
胚内传代。典型的野毒株通常在鸡胚中传至第２代或第３代时，可见侏儒胚，传至第３代，某些鸡胚可
出现死亡。含毒尿囊液置-６０℃以下可长期保存，也可以冻干４℃保存。
３．３．２ 将分离物经鸡胚传至３代或３代以上，收获接种后７ｄ仍存活的鸡胚，取胎儿，用剪刀剪除胎儿
体外的附属物，并用吸水纸吸干胎儿表面的液体。如接种胎儿重量比对照胚最轻胎儿重量少２ｇ以上
者，可初步判定为有病毒感染。
３．３．３ 对病毒的进一步鉴定可通过反转录-聚合酶链反应（ＲＴ-ＰＣＲ）进行（见第４章）。
４ 反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）......