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[PDF] GB/T 23239-2009 - 英文版

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GB/T 23239-2009 229 GB/T 23239-2009 <=3 伊氏锥虫病诊断技术
基本信息
标准编号 GB/T 23239-2009 (GB/T23239-2009)
中文名称 伊氏锥虫病诊断技术
英文名称 Diagnostic techniques for trypanosomosis evansi
行业 国家标准 (推荐)
中标分类 B41
国际标准分类 11.220
字数估计 10,160
发布日期 2009-03-09
实施日期 2009-05-01
标准依据 国家标准批准发布公告2009年第2号(总第142号)
发布机构 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会
范围 本标准规定了新鲜血片、薄血涂片染色、毛细管集虫、实验动物接种等病原鉴定方法和乳胶凝集试验、间接血凝试验和酶联免疫吸附试验等血清学试验技术。本标准适用于伊氏锥虫病的诊断、检疫、流行病学调查。

GB/T 23239-2009 Diagnostic techniques for trypanosomosis evansi ICS 11.220 B41 中华人民共和国国家标准 GB/T 23239-2009 伊氏锥虫病诊断技术 2009-03-09发布 2009-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布 前言 本标准的制定参照了世界动物卫生组织(OIE)编写的《陆生动物诊断试验和疫苗手册(哺乳动物、 禽鸟与蜜蜂)》(第五版,2004)。 本标准的附录A、附录B和附录C为资料性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:中国农业科学院上海兽医研究所。 本标准主要起草人:周金林、沈杰。 GB/T 23239-2009 伊氏锥虫病诊断技术 1 范围 本标准规定了新鲜血片、薄血涂片染色、毛细管集虫、实验动物接种等病原鉴定方法和乳胶凝集试 验、间接血凝试验和酶联免疫吸附试验等血清学试验技术。 本标准适用于伊氏锥虫病的诊断、检疫、流行病学调查。 2 临床诊断 依家畜种类不同,临床症状表现不同。马(骡、驴)一般呈急性经过,感染后,体温突然升高到40℃ 以上,稽留数日,而后经短时间的间隙,再行发作,体表水肿为常见症状,结膜和第三眼睑常有出血斑。 黄牛、水牛及骆驼等一般呈慢性经过,有不定期的间歇发热,食欲不振,消瘦,肿脚和耳、尾干枯症状,许 多慢性感染病例无明显病变。 有以上临床症状者,可以怀疑感染,确诊需要实验室检验。 3 病原鉴定 3.1 采血样 可从耳静脉或尾静脉采取外周血,从颈静脉或其他大静脉采取深部血液,因伊氏锥虫喜欢寄生于深 部血液,处于低虫血症时,外周血检出率常低于深部血的50%。 3.2 新鲜血片检查 在干净载玻片上滴上一小滴鲜血,盖上盖玻片,使血液扩散成为细胞单层,再用光学显微镜(200倍) 观察活动锥虫。为防止血液在观察时干涸,也可先在载玻片滴血时加一滴生理盐水或3%柠檬酸三钠 生理盐水。 3.3 薄血膜染色检查 将一小滴血放在清洁载玻片一端约20mm处,按常用方法推成薄血膜,迅速风干,用甲醇固定 2min,干燥后,再加姬氏染色液(配法参见附录 A)染色25min,倾去染色液,自来水冲洗,干燥后用 400倍~1000倍显微镜检查。 3.4 毛细管集虫检查 3.4.1 材料准备 肝素处理过的毛细管(管内径1.5mm,长75mm的玻璃或无色透明的硬质塑料管,在拟进血的一 端吸入3%肝素钠10mm,用烤箱70℃~80℃烤干后备用),显微镜一台,离心机一台,载玻片,盖玻 片,12号以上注射针头(或金属针),塑泥(橡皮泥)。 3.4.2 采集待检血样 从动物耳静脉或尾静脉穿刺获得血液。先用酒精棉擦净拟采血处皮肤,干后用针头穿刺血管,血流 出时用毛细管吸入达40mm深(即70μL血),封闭未沾染血的另一端(可用塑泥或火焰加热封闭)。 3.4.3 集虫 3.4.4 检查 在毛细管的血浆与红细胞分界线下1mm处将管折断(切断、剪断),将带有少量红细胞的血浆滴于 载玻片上,盖上盖玻片,使血液扩散成细胞单层。在350倍~400倍放大的光......

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