路径: 主页 > GB/T > 第627页 > GB/T 25878-2010 | 标准编号 | GB/T 25878-2010 (GB/T25878-2010) | | 中文名称 | 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)检测 PCR法 | | 英文名称 | Polymerase chain reaction (PCR) method for infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV) | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 65.020.30 | | 字数估计 | 9,988 | | 发布日期 | 2011-01-10 | | 实施日期 | 2011-06-01 | | 引用标准 | SC/T 7202.1-2007; SC/T 7202.2-2007 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第1号(总第166号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)聚合酶链式反应(PCR)检测方法的原理、所需试剂和材料、仪器和设备、操作步骤和结果判定。 本标准适用于对虾、环境生物、饵料生物和其他各种非生物样品中传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的定性检测。不适于对病毒量或感染活性的估测以及宿主感染程度的评估。 | GB/T 25878-2010
Polymerase chain reaction (PCR) method for infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV)
ICS 65.020.30
B41
中华人民共和国国家标准
对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒
(IHHNV)检测 PCR法
2011-01-10发布
2011-06-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准的附录A和附录B为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国水产标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所、农业部全国水产技术推广总站。
本标准主要起草人:黄倢、杨冰、朱泽闻、宋晓玲、孙喜模、赵红萍、刘莉。
对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒
(IHHNV)检测 PCR法
警告:使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验,本标准并未指出所有可能的安全问题。
使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件。
1 范围
本标准规定了对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)聚合酶链式反应(PCR)检测方法的
原理、所需试剂和材料、仪器和设备、操作步骤和结果判定。
本标准适用于对虾、环境生物、饵料生物和其他各种非生物样品中传染性皮下及造血组织坏死病毒
(IHHNV)的定性检测。不适于对病毒量或感染活性的估测以及宿主感染程度的评估。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
SC/T 7202.1-2007 斑节对虾杆状病毒诊断规程 第1部分:压片显微镜检查法
SC/T 7202.2-2007 斑节对虾杆状病毒诊断规程 第2部分:PCR检测法
3 原理
3.1 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒及其流行特征
IHHNV)粒子大小为20nm~22nm,是无囊膜二十面体,在氯化铯中的浮力密度为1.40g/mL,含线
状单链DNA,长度为4.1kb,衣壳由4个分子质量分别为74kD、47kD、39kD、37.5kD的多肽组成。
会引起慢性“矮小残缺综合症”(RDS),主要影响是患病对虾生长缓慢,畸形,受感染存活对虾终生带毒,
通过垂直和水平传播。
3.2 技术原理
长度的特异性DNA序列作为模板,以与模板两端序列互补的一对特异性寡核苷酸序列作为引物,在四
种脱氧核糖核苷三磷酸存在下,利用依赖DNA的DNA聚合酶的合成作用,经过数十次变性、退火和延
伸的反应循环,使模板上介于两个引物之间的DNA片段得到特异性地级数扩增,再通过电泳等手段检
测到被特异性扩增的片段,从而揭示微量IHHNVDNA的存在。
4 试剂和材料
4.1 所需试剂除引物、阳性对照和阴性对照以外,按照SC/T 7202.2-2007中第5章的规定。
4.2 100ng/μL引物F:5′-CGG-AAC-ACA-ACC-CGA-CTT-TA-3′,-20℃保存。
4.3 ......
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