路径: 主页 > GB/T > 第627页 > GB/T 26436-2010 | 标准编号 | GB/T 26436-2010 (GB/T26436-2010) | | 中文名称 | 禽白血病诊断技术 | | 英文名称 | Diagnostic techniques for avian leukosis | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 23,282 | | 发布日期 | 2011-01-14 | | 实施日期 | 2011-07-01 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第185号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了病料中ALV特异血清抗体和外源性ALV的检测方法。本标准适用于判断鸡群或病料中是否有外源性ALV感染。 | GB/T 26436-2010
Diagnostic techniques for avian leukosis
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
禽白血病诊断技术
2011-01-14发布
2011-07-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准的附录A、附录B、附录C、附录D、附录E、附录F为规范性附录,附录G、附录 H为资料性
附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SC/TC181)归口。
本标准起草单位:山东农业大学、中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、华南农业大学。
本标准主要起草人:崔治中、孙淑红、赵鹏、杨素、沙才华、廖明、曹伟胜。
引 言
织的良性和恶性肿瘤,是鸡群中除马立克氏病病毒(MDV)和禽网状内皮增生症病毒(REV)外的又一
类重要的致肿瘤病毒。
禽白血病是一类由ALV相关的反转录病毒引起鸡的不同组织良性和恶性肿瘤病的总称。随发生
肿瘤的主要细胞成分不同,分别称之为不同名称的肿瘤。ALV可分为 A~J10个亚群,其中仅 A亚
群、B亚群、C亚群、D亚群、E亚群、J亚群病毒与鸡相关。A亚群、B亚群、C亚群、D亚群、J亚群属外
源性ALV,与禽白血病的不同类型肿瘤发病相关。E亚群病毒基因组可完整地整合进感染鸡的染色体
基因组并稳定地遗传下去,也可从中再复制出传染性病毒颗粒,因而称之为内源性病毒。此外,在一些
鸡的染色体的不同部位,还可能带有一些ALV的基因组片段。E亚群ALV的致病性很低或没有致病
性,不属于净化对象,但很多鸡群中包括一些无特定病原(SPF)鸡群都可能带有E亚群内源性ALV,它
的感染不会给鸡群带来不良影响,但会干扰检测。
目前,该病对我国养鸡业的危害很大。在国际种禽贸易中,外源性白血病病毒感染是最主要的检测
对象之一。
禽白血病诊断技术
1 范围
本标准规定了病料中ALV特异血清抗体和外源性ALV的检测方法。
本标准适用于判断鸡群或病料中是否有外源性ALV感染。
2 临床症状和病理变化
ALV主要引起感染鸡在性成熟前后发生肿瘤死亡,感染率和发病死亡率高低不等,死亡率最高可
达20%。一些鸡感染后虽不发生肿瘤,但可造成产蛋性能下降甚至免疫抑制。
淋巴样白血病是最为常见的经典型白血病肿瘤,肿瘤可见于肝、脾、法氏囊、肾、肺、性腺、心、骨髓等
器官组织,肿瘤可表现为较大的结节状(块状或米粒状),或弥漫性分布细小结节。肿瘤结节的大小和数
量差异很大,表面平滑,切开后呈灰白色至奶酪色,但很少有坏死区。在成红细胞性白血病、成髓性细胞
白血病、髓细胞白血病中,多使肝、脾、肾呈弥漫性增大。J亚群ALV感染主要诱发髓细胞样肿瘤,它最
常见的特征性变化主要为肝脾肿大或布满无数的针尖、针头大小的白色增生性肿瘤结节。在一些病例
中,还可能在胸骨和肋骨表面出现肿瘤结节。
单纯苏木精伊红染色(H.E染色)的病理组织切片观察在诊断上有一定参考意义。在表现为淋巴
样细胞肿瘤结节时,要注意与马立克氏病病毒(MDV)和禽网状内皮增生症病毒(REV)诱发的肿瘤相
区别;在表现为髓样细胞瘤时,既要与REV诱发的类似肿瘤细胞相区别,也要与嗜中性白细胞浸润性
炎症相区别,如鸡戊型肝炎病毒感染引起的肝局部炎症。最终的鉴别诊断以肿瘤组织中的病毒抗原检
测或病毒分离鉴定为最可靠依据。
3 病毒的分离培养、检测和鉴定
3.1 试剂和仪器
3.1.1 试剂
DMEM液体培养基(pH7.2)、0.25%胰酶、磷酸盐缓冲液(0.01mol/LPBS,pH7.2)、抽提缓冲液、
青霉素(10万U/mL)、链霉素(10万 U/mL)、抗ALV单抗、抗ALV单因子鸡血清、异硫氰酸荧光素
(FITC)标记的山羊抗小鼠IgG抗体、ALV-p27抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒、聚合酶链
反应(PCR)试剂、RT-PCR试剂、生理盐水(0.9%氯化钠)、无水乙醇(分析纯)、丙酮(分析纯)、甘油(分
析纯)、75%酒精、碘酒、细胞生长液(含有5%胎牛血清或小牛血清的DMEM液体培养基)、细胞维持液
(含有1%胎牛血清或小牛血清的DMEM液体培养基)、大肠杆菌(TG1)、蛋白酶K、70%冷乙醇、乙酸
钠(分析纯)、三氯甲烷(分析纯)、异戊醇(分析纯)、异丙醇(分析纯)、10×加样缓冲液、琼脂糖、D......
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