路径: 主页 > GB/T > 第627页 > GB/T 27533-2011 | 标准编号 | GB/T 27533-2011 (GB/T27533-2011) | | 中文名称 | 犬细小病毒病诊断技术 | | 英文名称 | Diagnostic techniques for canine parvovirus disease | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 9,967 | | 发布日期 | 2011-11-21 | | 实施日期 | 2012-03-01 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第18号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了犬细小病毒病的临床检查、血凝与血凝抑制试验、PCR检测的操作方法。本标准适用于犬细小病毒病的鉴定及其流行病学调查、诊断和监测。其中病毒分离、血凝与血凝抑制试验、PCR检测适用于犬细小病毒病的病原诊断。 | GB/T 27533-2011
Diagnostic techniques for canine parvovirus disease
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
犬细小病毒病诊断技术
2011-11-21发布
2012-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准的附录A和附录B为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:青岛农业大学动物科技学院、中华人民共和国上海出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:单虎、温建新、熊炜、黄娟、秦晓冰、于鹏程。
犬细小病毒病诊断技术
1 范围
本标准规定了犬细小病毒病的临床检查、血凝与血凝抑制试验、PCR检测的操作方法。
本标准适用于犬细小病毒病的鉴定及其流行病学调查、诊断和监测。其中病毒分离、血凝与血凝抑
制试验、PCR检测适用于犬细小病毒病的病原诊断。
2 试剂和材料
2.1 FK81细胞(猫肾细胞)。
2.2 0.9%生理盐水:配制参见附录A中A.1。
2.3 1% 猪红细胞液:配制参见附录A中A.2。
2.4 犬细小病毒阳性血清。
2.5 96孔“v”形微量反应板。
2.6 Taq酶及10倍Taq酶反应缓冲液:Taq酶浓度为5U/μL,-20℃保存。
2.7 1.5mLEppendorf管。
2.8 0.2mLPCR薄壁管。
2.9 dNTP:含dCTP、dGTP、dATP、dTTP各10mmol/L,-20℃保存。
2.10 引物:浓度为20μmol/L,其序列如下:
2.11 10%十二烷基硫酸钠:配制参见附录A。
2.12 蛋白酶K贮备液:配制参见附录A中A.4。
2.13 5×TBE电泳缓冲液:配制参见附录A中A.6。
3 器材和设备
3.1 PCR仪。
3.2 高速台式冷冻离心机:可控温至4℃、离心速度可达12000g以上。
3.3 水平电泳仪。
3.4 凝胶成像系统。
4 临床检查
4.1 临床特征
4.1.1 潜伏期1周到2周,病初无任何症状,食欲减退或废绝,体温40℃以上,粉红色黏稠血样物。
4.1.2 病犬先出现呕吐,呕吐出白色泡沫或黄色液体,继而腹泻,粪便稀薄而恶臭,剧烈的腹泻呈喷射
状,粪便呈红色,混有大量黏液或假膜。后期排番茄汁样稀便,并有特殊的腥臭味。
4.1.3 患犬迅速消瘦,倦卧不起,目光呆滞,眼窝下陷,腹围紧缩,机体脱水,皮肤干燥、弹性降低。
4.2 病理变化
4.2.1 心脏肿大呈灰黄色,切面外翻,质地松软,心肌有出血性斑纹。
4.2......
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