路径: 主页 > GB/T > 第627页 > GB/T 27539-2011 | 标准编号 | GB/T 27539-2011 (GB/T27539-2011) | | 中文名称 | 动物流感检测 A型流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法 | | 英文名称 | Animal influenza detection -- Method of real-time RT-PCR for detection of influenza virus A | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 10,128 | | 发布日期 | 2011-11-21 | | 实施日期 | 2012-03-01 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB 19489; GB/T 19495.2; GB/T 27401; SN/T 1330 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第18号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了A型流感病毒通用荧光RT-PCR检测的操作方法。本标准适用于活动物及其产品中A型流感病毒的检测。 | GB/T 27539-2011
Animal influenza detection.Method of real-time RT-PCR for detection of influenza virus A
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
动物流感检测 A型流感病毒
通用荧光RT-PCR检测方法
influenzavirusA
2011-11-21发布
2012-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检疫
局、深圳匹基生物工程有限公司。
本标准主要起草人:汪琳、林志雄、周琦、高志强、陈茹、乔彩霞、蒲静、杨伟、梁成珠。
动物流感检测 A型流感病毒
通用荧光RT-PCR检测方法
1 范围
本标准规定了A型流感病毒通用荧光RT-PCR检测的操作方法。
本标准适用于活动物及其产品中A型流感病毒的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
GB/T 19495.2 转基因产品检测 实验室技术要求
GB/T 27401 实验室质量控制规范 动物检疫
SN/T 1330 进出口生、熟毛皮检验规程
3 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
Ct值:每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数(Ctvalue)
RNA:核糖核酸(ribonucleicacid)
4 原理
流感病毒(influenzavirus)属正粘病毒科,根据抗原特性及其基因特性的不同,流感病毒分为甲
(A)、乙(B)、丙(C)型。乙型变异性较弱、丙型抗原性比较稳定,仅感染人类;甲(A)型抗原变异性最强,
感染人类和其他动物,常引起世界性大流行。编码基质蛋白的 M基因是A 型流感病毒共有且较保守。
采用Taqman技术,针对 M基因中特定序列,合成一对特异性引物和一条特异性的荧光双标记探针,探
针的5′端标记报告荧光基团(R),3′端标记淬灭荧光基团(Q)。在PCR退火阶段,一对引物和一条探针
同时与目的基因片段结合,探针上R基团发出的荧光信号被Q基团所吸收,仪器检测不到R所发出的
荧光信号;在PCR延伸阶段,Taq酶在引物的引导下沿着模板链合成新链,当链的延伸进行到探针结合
部位时,受到探针的阻碍而无法继续,Taq酶发挥5′→3′......
|