路径: 主页 > GB/T > 第627页 > GB/T 27540-2011 | 标准编号 | GB/T 27540-2011 (GB/T27540-2011) | | 中文名称 | 猪瘟病毒实时荧光RT-PCR检测方法 | | 英文名称 | Method of the real-time RT-PCR for the detection of classical swine fever virus | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 9,924 | | 发布日期 | 2011-11-21 | | 实施日期 | 2012-03-01 | | 引用标准 | 中华人民共和国农业部公告第302号 兽医实验室生物安全技术管理规范 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第18号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)实时荧光RT-PCR检测方法。本标准适用于猪瘟的诊断和监测, 适用于猪活体及其脏器、血液、排泄物和细胞培养物中CSFV核酸的检测。 | GB/T 27540-2011
Method of the real-time RT-PCR for the detection of classical swine fever virus
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
猪瘟病毒实时荧光RT-PCR检测方法
2011-11-21发布
2012-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:中国兽医药品监察所。
本标准主要起草人:王琴、王泰健、徐璐、范学政、刘俊、蒋春燕、赵启祖、宁宜宝、邹兴启。
猪瘟病毒实时荧光RT-PCR检测方法
1 范围
本标准适用于猪瘟的诊断和监测,适用于猪活体及其脏器、血液、排泄物和细胞培养物中CSFV核
酸的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
中华人民共和国农业部公告第302号 兽医实验室生物安全技术管理规范
3 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
Ct值:达到阈值的循环数(cyclethreshold)
RNA:核糖核酸(ribonucleicacid)
4 试剂和材料
除另有说明,所用试剂均为分析纯;所有试剂均用无RNA酶的容器分装。
4.1 Trizol:RNA抽提试剂,外观为粉红色,分装至棕色瓶中,于4℃~8℃保存。
4.2 氯仿:4℃预冷。
4.3 异丙醇:4℃预冷。
4.4 75%乙醇:用新开启的无水乙醇和DEPC水配制,-20℃预冷。
4.5 DEPC水:去离子水中加入0.1%DEPC,37℃作用1h,(121±2)℃,高压灭菌15min。
4.6 RNA酶抑制剂(30U/μL)。
4.7 10×PCRbuffer(10mmol/LpH8.3Tris-HCl,50mmol/LK......
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