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[PDF] GB/T 34806-2017 - 英文版

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GB/T 34806-2017 225 GB/T 34806-2017 9秒内发货PDF 化妆品中13种禁用着色剂的测定 高效液相色谱法
基本信息
标准编号 GB/T 34806-2017 (GB/T34806-2017)
中文名称 化妆品中13种禁用着色剂的测定 高效液相色谱法
英文名称 Determination of 13 kinds of prohibited colourants in cosmetics -- High performance liquid chromatography
行业 国家标准 (推荐)
中标分类 Y42
国际标准分类 71.100.70
字数估计 13,164
发布日期 2017-11-01
实施日期 2018-05-01
标准依据 国家标准公告2017年第29号
发布机构 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会

GB/T 34806-2017: 化妆品中13种禁用着色剂的测定 高效液相色谱法 ICS 71.100.70 Y42 中华人民共和国国家标准 化妆品中13种禁用着色剂的测定 高效液相色谱法 2017-11-01发布 2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。 本标准起草单位:大连市食品检验所、大连市产品质量检测研究院、上海市日用化学工业研究所。 本标准主要起草人:毛希琴、任国杰、戴学东、李春玲、李鹏、李肖斐、顾鑫荣、勇艳华、郭无暇、 董广彬、沈敏。 引 言 本标准的被测物质是我国《化妆品安全技术规范》规定的禁用物质。 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范》规 定:若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时,应进行安全性风险评估,确保在正常、合理及可 预见的使用条件下不得对人体健康产生危害。 目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。 化妆品中13种禁用着色剂的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了化妆品中13种禁用着色剂(酸性黄36、酸性紫49、颜料红53、溶剂红49、碱性紫1、分 散黄3、碱性紫3、颜料橙5、苏丹Ⅰ、苏丹红Ⅱ、溶剂蓝35、苏丹红Ⅳ、碱性紫10)测定的高效液相色谱法 及其质谱确证方法。 本标准适用于唇膏等蜡基类、指甲油类、粉类等化妆品中13种禁用着色剂的定量测定。 本标准中13种禁用着色剂的检出限和定量限参见表A.1。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法提要 待测样品经四氢呋喃分散,然后加入含有醋酸铵的甲醇-水混合溶液,超声提取目标物,离心并过滤 后,用反相高效液相色谱分离,二极管阵列检测,标准曲线外标法定量。液相色谱法确定为阳性的样品 需经高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)进行确证。 4 试剂和材料 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,所用水为GB/T 6682中规定的一级水。 4.1 标准物质名称(英文名称)、CI号、CAS号、分子式、分子结构式、相对分子质量、纯度见表B.1。 4.2 四氢呋喃。 4.3 甲醇。 4.4 甲醇-四氢呋喃(1+1)溶液:将四氢呋喃和甲醇(4.3)按照1+1(V+V)的比例混合。 4.5 甲醇:色谱纯,用于质谱确证时流动相的配制。 4.6 乙腈:色谱纯。 4.7 醋酸铵:色谱纯。 4.8 甲酸:色谱纯。 4.9 甲醇-醋酸铵水溶液:取醋酸铵0.77g,加入到100mL水中充分溶解,再加入甲醇(4.3)100mL,充 分混匀,制得醋酸铵浓度为50mmol/L的甲醇-醋酸铵水溶液。 4.10 标准储备溶液的配制:称取颜料橙5、分散黄3各10mg(精确至0.1mg),分别用四氢呋喃和甲醇 溶解后,定容至50mL配制成浓度为0.2mg/mL的标准储备溶液。称取颜料红53和苏丹红Ⅳ各 10mg(精确至0.1mg),分别用二甲基亚砜和四氢呋喃溶解后,定容至10mL,配制成浓度为1mg/mL 的标准储备溶液。称取其余8种标准物质(除颜料橙5、分散黄3、颜料红53、苏丹红Ⅳ、碱性紫10外)各 10mg(精确至0.1mg),分别用甲醇溶解后定容至10mL,配制成各目标物浓度为1mg/mL的标准储 备溶液。鉴于碱性紫10实为溶剂红49的盐酸盐,在同一色谱条件下与溶剂红49的出峰时间相同,方 法无法分辨是碱性紫10或溶剂红49,因此配制标准储备液时可根据标准物质情况任选一种配制。 4.11 标准溶液的配制:准确移取颜料橙5、分散黄3的标准储备液各1mL,其余标准储备液各200μL 于同一10mL容量瓶中,用甲醇-四氢呋喃(1+1)定容至刻度,配制成20μg/mL的混合标准溶液,再用 甲醇-四氢呋喃(1+1)逐级稀释配制5μg/mL、2μg/mL、1μg/mL、0.5μg/mL、0.2μg/mL的系列混合 标准溶液,用于标准曲线的绘制。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪-二极管阵列检测器。 5.2 高效液相色谱串联四级杆质谱仪,配置ESI离子源(确证时使用)。 5.3 分析天平:感量0.1mg;0.01mg。 5.4 漩涡混合器。 5.5 超声波清洗器。 5.6 离心机:转速不小于5000r/min,离心试管容量10mL。 5.7 移液枪或移液器。 6 试样制备 称取待测化妆品样品约0.2g(精确至1mg)于离心管中,加入四氢呋喃6mL,涡旋并超声10min, 使样品分散并提取目标物(若遇唇膏样品无法分散的情况,可用80℃水浴适当加热1min~2min即可 分散),继续向离心管中加入甲醇-醋酸铵水溶液(4.9)约4mL,使提取溶液定容至10mL,涡旋混匀后 超声10min,然后于5000r/min离心10min。取澄清提取液,经0.45μm微孔滤膜过滤后待测。 7 测定步骤 7.1 液相色谱分析参考条件 色谱柱:poroshel120EC-C18(2.7μm,3.0mm×100mm)或相当者。 流动相:流动相A10mmol/L醋酸铵溶液;流动相B乙腈。 柱温:35℃;流速:0.5mL/min。 进样量:2μL;检测波长:416nm、514nm、590nm。 梯度洗脱条件:见表1。 表1 液相色谱分析梯度洗脱条件 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 0 75 25 3 62 38 6 53 47 9 20 80 11 2 98 14 2 98 15 75 25 18 75 25 7.2 质谱确证参考条件 7.2.1 液相色谱条件 色谱柱:poroshel120EC-C18(2.7μm,3.0mm×100mm)或相当者。 流速:0.5μL/min。 进样量:2μL。 流动相:流动相A水相溶液(负模式为10mmol/L醋酸铵溶液;正模式为0.033%甲酸溶液);流动 相B有机相溶液(负模式为乙腈-甲醇(6∶4);正模式为乙腈)。 梯度洗脱条件:见表2。 表2 液相色谱分离条件 ESI- ESI+ 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 0 60 40 0 60 40 3 50 50 5 50 50 6 15 85 6 15 85 8 0 100 9.5 15 85 11 0 100 9.6 13 97 12 60 40 10.5 13 97 15 60 40 11 60 40 - - - 14 60 40 7.2.2 质谱参考条件 离子源:电喷雾电离源(ESI源)。 检测方式:多反应监测(MRM)。 雾化气:氮气,172.37kPa(25psi)。 干燥气:氮气,流速:14L/min,温度:250℃。 碰撞气:氮气。 碰撞电压:380V。 毛细管电压:4000V。 其他质谱参数见表3。 表3 13种目标物的质谱分析参考参数 序号 目标物名称 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碰撞能量 扫描模式 1 酸性黄36 352.1 80.0 155.8 ESI- 2 酸性紫49 710.2 540.1 169.8 ESI- 3 颜料红53 375.0 346.8 204.0 ESI- 4 溶剂红49 443.2 399.1 355.0 ESI+ 表3(续) 序号 目标物名称 母离子 (m/z) 子离子 (m/z) 碰撞能量 扫描模式 5 碱性紫1 358.3 342.1 326.1 ESI+ 6 分散黄3 268.2 91.7 133.9 ESI- 7 碱性紫3 372.3 356.1 340.2 ESI+ 7' 碱性紫3杂质 344.2 328.1 237.0 ESI+ 8 颜料橙5 337.0 109.0 166.9 ESI- 9 苏丹Ⅰ 249.1 232.0 156.0 ESI+ 10 苏丹红Ⅱ 277.2 121.1 260.1 ESI+ 11 溶剂蓝35 351.2 294.1 251.0 ESI+ 12 苏丹红Ⅳ 379.1 361.0 259.8 ESI- 13 碱性紫10 443.2 399.1 355.0 ESI+ 7.3 定性分析 将在相同的液相色谱条件下获得的样品溶液的液相色谱分离谱图与标准物质的液相色谱分离谱图 进行比较,若样品谱图中存在保留时间与某标准物质的保留时间一致的色谱峰,并且其扣除背景后的紫 外吸收图谱与该标准物质的紫外吸收图谱一致,则可初步认定样品中存在该物质。经液相色谱法确定 为阳性的样品,应经质谱分析进一步确证。13种禁用着色剂的标准物质液相色谱分离谱图和质谱确证 总离子流质谱图参见图C.1、图C.2和图C.3。 注:酸性黄36和酸性紫49的色谱峰保留时间基本一致,色谱峰分别出现在416nm和590nm波长条件下的紫外 分离图谱中,在这两个波长条件下二者之间无干扰,若两种物质同时存在时,在定性分析时其紫外吸收图谱中 会同时出现二者的特征吸收(最大吸收分别在420nm和592nm附近)。 7.4 定量测定 移取系列标准溶液(4.11),按照色谱条件(7.1)进行高效液相色谱分析,以系列标准溶液质量浓度 为横坐标,峰面积为纵坐标,制作标准曲线。酸性黄36和分散黄3(2种)根据416nm下的紫外吸收进 行定量计算,颜料红53、溶剂红49、颜料橙5、苏丹Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ、碱性紫10(7种)根据514nm 下的紫外吸收进行定量计算,酸性紫49、碱性紫1、碱性紫3、溶剂蓝35(5种)根据590nm下的紫外吸 收进行定量计算。 注:鉴于碱性紫10实为溶剂红49的盐酸盐,在本方法中与溶剂红49的出峰时间相同,方法无法分辨是碱性紫10 或溶剂红49。除非已知,否则为统一测试结果,建议选择溶剂红49作为标准物质,测试结果则报告以溶剂红49 计的含量。 样品溶液中目标物的含量,用标准曲线外标法确定。化妆品样品中目标物的含量X 按式(1)进行 计算。 X= c×V m ×10 -3 (1) 式中: X ---化妆品样品中目标物的含量,单位为毫克每克(mg/g); c ---从标准曲线中计算出的样品溶液中目标物的质量浓度,单位为微克每毫升(μg/mL); V ---按稀释倍数折算的被测样液总体积,单位为毫升(mL); m ---称取样品的质量,单位为克(g)。 计算结果保留三位有效数字。 若待测溶液中目标物的质量浓度超过校准曲线线性范围的上限,应对待测液进行适当稀释后重新 测定。 8 平行试验 按照所建立的方法操作,对同一样品独立进行测定,获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过 算数平均值的10%。 9 回收率和精密度 在10μg/g~500μg/g添加水平范围内的平均提取回收率为90%~110%,相对标准偏差均小 于10%。 附 录 A (资料性附录) 13种禁用着色剂的检出限和定量限 表A.1给出了13种禁用着色剂的检出限和定量限。 表A.1 13种禁用着色剂的检出限和定量限 序号 化合物名称 检出限 μg/g 定量限 μg/g 序号 化合物名称 检出限 μg/g 定量限 μg/g 1 酸性黄36 3 10 8 颜料橙5 2 6 2 酸性紫49 3 10 9 颜料橙5 2 6 3 颜料红53 2 6 10 苏丹Ⅱ 1 3 4 溶剂红49 1 3 11 溶剂蓝35 1 3 5 碱性紫1 2 6 12 苏丹红Ⅳ 1 3 6 分散黄3 3 10 13 碱性紫10 1 3 7 碱性紫3 2 6 附 录 B (资料性附录) 标准物质名称(英文名称)、CI号、CAS号、分子式、分子结构式、相对分子质量、纯度 表B.1给出了标准物质名称(英文名称)、CI号、CAS号、分子式、分子结构式、相对分子质量、纯度 等信息。 表B.1 标准物质名称(英文名称)、CI号、CAS号、分子式、分子结构式、相对分子质量、纯度 序号 标准物质 名称(英 文名称) 着色剂 索引号 (CI号) CAS号 分子式 结构式 相对分子 质量 纯度 酸性黄36 (Acid Yelow36) CI13065 587-98-4 C18H14N3O3SNa 375.38 酸性紫49 (Acid Violet49) 颜料红53 (Pigment Red53) 溶剂红49 (Solvent Red49) 碱性紫1 (Basic Violet1) ≥98% 表B.1(续) 序号 标准物质 名称(英 文名称) 着色剂 索引号 (CI号) CAS号 分子式 结构式 相对分子 质量 纯度 分散黄3 (Disperse Yelow3) 碱性紫3 (Basic Violet3) CI42555 548-62-9 C25H30ClN3 407.98 颜料橙5 (Pigment Orange5) 苏丹Ⅰ (SudanI) CI12055 842-07-9 C16H12N2O 248.28 苏丹红Ⅱ (SudanⅡ) CI121403118-97-6 C18H16N2O 276.33 溶剂蓝35 (Solvent Blue35) 苏丹红Ⅳ (Solvent Red24) CI26105 85-83-6 C24H20N4O 380.44 碱性紫10 (Rhod- ......