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| 标准编号 | HJ 710.7-2014 (HJ710.7-2014) | | 中文名称 | 生物多样性观测技术导则 内陆水域鱼类 | | 英文名称 | Technical guidelines for biodiversity monitoring. i nland water fish | | 行业 | 环保行业标准 | | 中标分类 | Z04 | | 字数估计 | 26,251 | | 发布日期 | 10/31/2014 | | 实施日期 | 1/1/2015 | | 引用标准 | GB/T 7714; HJ 623; HJ 628; SL 58; SL 219 | | 标准依据 | 环境保护部公告2014年第74号 | | 发布机构 | 生态环境部 | | 范围 | 本标准规定了内陆水域鱼类多样性观测的主要内容、技术要求和方法。本标准适用于中华人民共和国范围内所有内陆水域鱼类多样性的观测。 |
HJ 710.7-2014: 生物多样性观测技术导则 内陆水域鱼类
HJ 710.7-2014 英文名称: Technical guidelines for biodiversity monitoring.i nland water fish
中华人民共和国国家环境保护标准
生物多样性观测技术导则 内陆水域鱼类
1 适用范围
本标准规定了内陆水域鱼类多样性观测的主要内容、技术要求和方法。
本标准适用于中华人民共和国范围内所有内陆水域鱼类多样性的观测。
5 观测方法
5.1 观测准备
5.1.1 确定观测目标
观测目标可为掌握观测区域鱼类物种多样性、群落和种群结构、早期资源补充、地理分
布,或为分析人类活动和环境变化对鱼类物种资源的影响,或为鱼类物种资源保护措施的制定,以及评价鱼类保护措施和政策的有效性提供基础数据。
5.1.2 明确观测对象
根据观测目标,一般应从具有不同生态需求和生活史的类群中选择观测对象。在考虑物
种多样性观测的同时,还应重点考虑以下类群的观测:
a)受威胁物种、保护物种和特有种;
b)具有重要社会、经济价值的物种;
c)对维持生态系统结构和过程具有重要作用的物种;
d)对环境或气候变化反应敏感的指标性物种。
5.1.3 制定观测计划
收集观测区域自然和社会经济状况的资料,了解观测对象的生态学及种群特征,必要时
可开展一次预调查,为制定观测计划作好准备。观测计划应包括:观测内容、要素和指标,
4观测时间和频次,样本量和取样方法,观测方法,数据分析和报告,质量控制和安全管理等。
5.1.4 人员培训
做好观测方法、野外操作规范等方面的培训工作,确保观测者能够熟练掌握各种仪器的
使用以及鱼类标本的采集和鉴别方法。同时,做好安全培训,加强安全意识,强调野外采样中应注意的事项,杜绝危险事件发生。
5.1.5 仪器设备和计量控制
准备好鱼类资源观测所需的仪器和设备(参见附录 A)。检查并调试相关仪器设备,确
保设备完好,对长期放置的仪器进行精度校正。
5.2 观测断面或样点设置
5.2.1 湖泊、水库等开阔水域
根据水体底质、水生植物组成、水深、水流、湖库形状、水质等因素划分成若干小区,
使同一小区内变异程度尽可能小。在每个小区内,设置若干有代表性的样点。样点的数量可
根据小区湖体面积、形态和生境特征、工作条件、观测目的、经费情况等因素确定。一般情
况下,湖体水面大于 2 km2时样点不少于 3个。对于通江湖泊,应确保主要入湖支流、主湖
区以及通江水道必须设置采样点。主要入湖支流的样点数不得少于 2个。对于通江水道,样
点不少于 2个,在离通江口和入湖口的一定距离处分别设置样点。
5.2.2 河流或河流型水库
根据河流形态、河床底质、水位、水流、水质等因素,将河流划分成若干断面,使同一
断面上的变异程度尽可能小。在同一断面上每隔一定的距离设置一个样点。
5.3 鱼类早期资源调查
5.3.1 产漂流性卵鱼类早期资源调查该方法适用于河流或湖泊的入湖、出湖通道的流动水体。
5.3.1.1 定点定量采集。按照 HJ 628的规定执行。采样点选择在河岸相对平直,水流平顺、
流速为 0.3~1.0 m/s、流态稳定的位置,距离河岸 20~100 m。采样点设置在靠近主流的一
侧。将弶网(网目 0.50~0.80 mm)或者圆锥网(网目 0.50~0.80 mm)固定在船舶或者近
岸的支点,每日采集 2次,采集时间为 6:00~7:00和 18:00~19:00,每次采集约 1 h。采集
时间可根据实际情况进行适当调整。采样过程如下:
a)将采集网具悬挂于卷扬机的钢索上;
b)启动卷扬机,释放钢索,将采集网放入水中;
c)网口到达预定水层时开始计时并记录;
d)观察钢索计数器和倾角仪的度数;
e)将流速仪安装于网口中央,测定网口流速;
f)一次采集持续到预定时间时,开启卷扬机,拉起采集网具,同时记录采集网的起吊时间;
g)分拣鱼卵、仔鱼、稚鱼等;
h)采样期间,测定流速、透明度、水温、pH值、溶解氧等环境因子。
5.3.1.3 定性采集。按照 HJ 628的规定执行。在鱼卵、仔鱼“发江”时用弶网进行定性采
集。获得的鱼卵、仔鱼主要用于培养观察。定性采集通常昼夜连续进行,持续 24 h,下网时
间间隔 2~4 h,每次采集 15~30 min,如遇上雨后杂质较多时,可根据实际情况,适当缩短
采样时间。采集完毕后,将鱼卵、仔鱼与杂质等一并带回,在实验室内进行分拣,拣出形态
完好、行为正常的鱼卵、仔鱼进行培养和观察,直至能够准确地鉴定出种类。
5.3.1.4 断面采集。使用圆锥网,在定量采集点所处的断面上进行,采集点为左岸近岸、左
岸至江中距离的 1/2处、江中、江中至右岸 1/2处、右岸近岸,共 5个点,从左岸侧的江岸
至对岸 5个点分别编号为 A、B、C、D、E。在水深大于 3 m的样点,每个采集点采集表、
中、底 3个样,分别编号为 1、2、3,相应的采集深度分别为该点水深的 0.2、0.5、0.8倍(图
1);在水深大于 1 m,小于 3 m的样点,进行表层和底层采样;在水深小于 1 m的样点,只
5进行表层采集。每次采集的时间定为 10 min,采集记录表参见附录 B。
5.3.1.5 样本处理。将采到的鱼卵、仔鱼、稚鱼以及所有悬浮物和碎屑等一起过滤。如果发
现鱼卵,计数后逐个培养,培养过程中进行种类鉴定,并做好相关记录(记录表参见附录 C)。
如果发现仔鱼,则放入 7 %的福尔马林溶液中固定,15 min后拣出,逐尾计数,放入 5 %的
福尔马林中保存。如果发现稚鱼,放入 10%的福尔马林溶液中固定保存。各次采集的仔鱼、
稚鱼样本放入标签后分别存放,供实验室内进行种类鉴定。分别记录每个样本内各种类鱼卵、
仔鱼、稚鱼的数量及其每一尾的发育期(鉴定结果记录参见附录 D)。对于种类鉴定有疑问
的样本,用乙醇保存,进行分子鉴定。
5.3.2 产沉黏性卵鱼类早期资源调查
5.3.2.1 主动采集
在水流较缓的水域,利用抄网等网具,在鱼类产卵场及仔鱼、稚鱼的栖息地进行采集。
对以水草为产卵基质的种类,可将水草取出,挑取黏附在水草上的黏性卵;对以浅水砾石为
产卵基质的种类,可直接在砾石上进行采样。近岸浅水生境仔鱼、稚鱼的采集可用抄网(网
目 0.50~1.00 mm)采集。按照 HJ 628的规定执行。
5.3.2.2 被动采集
可以通过设置底层网、人工鱼巢采集鱼卵,并按照 HJ 628的规定执行。人工鱼巢指在
合适的地点放置适合鱼类产卵习性的基质,吸引鱼类在其上产卵。对于鲤、鲫等产卵于水生
植物的鱼类,用水草或棕榈丝扎成束放置在静水或水流较缓的区域,以吸引鱼类产卵;对于
在底质筑巢的鱼类,放置有裂缝的瓦罐,可吸引鱼类产卵。对随水流向下游漂流的沉黏性鱼
卵,可采用底层网进行采集。底层网具如同倒置的弶网,网口为“D”形,配置锥形网,以
铁锚将网具固定于水底,网口上缘系一个浮筒。在网口悬挂电子流速计,记录起止读数计算
流速和网口过水量。放置底层网前,应确定流速计是否正常工作。放网时要确定网具是否已
抵达江底,同时记录放网时间和经纬度。收网时,要记录收网时间。根据观测要求确定采样时间,一般维持数小时。
5.3.2.3 其他
静水或缓流的清澈水域可采用调查人员直接入水进行收集、观察及计数。
5.4 鱼类物种多样性调查
5.4.1 渔获物统计
统计所观测水体的小区内各类渔具、渔法所捕捞的渔获物中的所有种类。样品采集按照HJ 628的规定执行。
5.4.2 走访并调查
渔民、码头、水产市场、餐馆等有当地鱼类交易或消费的地方,或者开展休闲垂钓的地
方,购买鱼类标本,进行补充采样。样品采集按照 HJ 628的规定执行。
65.4.3 自行采集
在湖泊浅水区、河流沿岸带、高山溪流、洞穴水体等区域进行自行采集,以抄网、撒网、
地笼、饵钓等采样方法,收集鱼类样本。样品采集按照 HJ 628的规定执行。
5.5 渔获物调查
5.5.1 调查方法
5.5.1.1 渔获物的取样数量
渔获物的取样数量需能反映渔获物的现实状况。当渔船数量较多时,可根据各种渔具的
渔船数量按比例进行取样;当渔船数量较少时,应对所有渔船的渔获物进行统计分析。常年
有渔船作业的水体,可按月进行渔获物统计,当渔船数量多,所采用渔具不一致时,需对渔
获物进行抽样统计。如果一次起水的渔获物较多,对于过秤前后分装在箩筐内的渔获物,可
采用拈阉法或者借助于随机数表进行取样;当渔获物被分为若干单元(如不同的渔具或分批
起网的渔获物),而这些单元的鱼类组成或个体大小有明显区别时,应当以单元为层次进行分层随机抽样。
5.5.1.2 环境数据记录
每次进行鱼类采集时都应填写环境数据记录表(附录 E),将采集到的每一尾鱼样本当
场进行种类鉴定,并逐尾进行各项生物学指标的测量和记录(记录表参见附录 F和 G)。每
个种类都拍照并留存图像资料,并注明采样信息。对于不能当场识别、识别尚存疑问或者以
前没有采集到的种类,应在采集记录上做好备注,并取鳍条、肌肉等组织材料用乙醇固定以
备进行分子鉴定,整体标本用福尔马林溶液固定并作标记。
5.5.1.3 鱼类食性材料收集
样品采集按照 HJ 628的规定执行。同一种鱼的食性需取自种群内不同大小的个体;采
集的样品鱼,经长度测量,称重等程序之后,即可剖开腹部,取出完整的胃和/或肠;将取
出的胃和肠管轻轻拉直,测量长度,并目测其食物饱和度。肉食性鱼类的肠管较短,可按整
个肠管或前后肠来检定食物饱和度;草食性或杂食性鱼类的肠管较长,通常要按照前、中、
后肠来进行鉴定。将胃和肠管的两端用线扎紧,系上编号标签,再用纱布包好放入标本瓶,
然后加入 5 %甲醛溶液。体长 20 cm以下的小鱼,可采用整体固定,固定之前,在鱼体腹下
剪一小口,系上标签,并用纱布裹紧。
5.5.2 样品处理方法
根据不同的目的和样品的大小,采用不同的处理方法。
5.5.2.1 整体浸泡法
5.5.2.1.1 福尔马林整体浸泡
将鱼类体表冲洗干净,进行编号、登记和记录,并系好布标签,个体较大者在腹腔中注
入适量 10 %福尔马林以固定内脏器官。然后将背鳍、胸鳍、臀鳍和尾鳍适当展开,在 10 %
福尔马林溶液中浸泡片刻,待各鳍形态固定后,放入盛有 8~10 %福尔马林的标本瓶中进行
固定,将固定后的标本放入 5 %福尔马林液中浸泡保存。
5.5.2.1.2 乙醇整体浸泡
将鱼类体表冲洗干净,进行编号、登记和记录,并系好布标签,直接放入装有 95 %乙
醇溶液中浸泡,一天后更换 75%乙醇即可长期保存。对个体大的鱼需向腹部注射乙醇,隔天
更换乙醇一次,若隔天乙醇颜色变黄仍需更换,直到不变黄为止。
5.5.2.2 取分子材料后保存
通常剪取适量右侧背部肌肉或右侧偶鳍保存组织材料。取材过程中应注意个体之间避免
互相污染,每取一个样品后应对器材进行消毒。对剪取的组织和鱼体应进行编号,确保一一
对应,取过组织材料的鱼体可以放入 10 %福尔马林溶液中保存。剪取的组织材料一般放入
7装有 95 %以上纯度乙醇的密封容器内保存。
5.6 声呐水声学调查
5.6.1 实施要求
由于本方法对设备要求较高,可根据观测能力条件选择实施。
5.6.2 观测方法
分为走航式和固定式两种
5.6.2.1 走航式
走航式运用回声探测仪观测鱼类数量与分布。将声呐探测设备的数字换能器(探头)固
定在船体的一侧,确保探头发射声波面垂直向下,探头放于水面以下一定深度,避免船体波
动致使探头露出水面,同时也减少水面反射的影响。利用导航定位仪确定探测船的坐标位置,
并记录航行路线。在河流中,根据探测江段长度、深度、宽度和观测要求选择探测方式。探
测方式可采用平行式走航探测,比如“Z”和“弓”字形路线,也可采用直线式走航探测(记
录表参见附录 H)。在湖泊、水库等开阔水域,先划分成若干小区,在每个小区的角和中心
点上设置站位。航线走向的设置以尽量垂直于鱼类密度梯度线为设计原则,力求每条走航路
线均可覆盖各种密度类型的鱼类分布区,以保证所采集数据的代表性和资源评估结果的准确性。
5.6.2.2 固定式
用于观测鱼类通过某一断面的数量和活动规律。根据观测要求和水域形状,选择断面,
探头完全放于水下一定的深度,确保探头发射声波面与水面平行。利用换能器进行连续(一
般 1秒一次)脉冲探测和声学数据采集。
5.6.3 声学数据的预处理
在某些特殊情况下,如风浪天气、船舶颠簸以及遇到特殊水底时,船底气泡和水底信号
等“噪声”均可能影响探测结果,因此需要对观测数据进行预处理予以校正。
5.7 标记重捕法
5.7.1 标记重捕法步骤
包括以下主要步骤:确定放流种类、选择标记方法、选择放流对象、存活和脱标实验、
标记和放流、回捕和检测。每一步骤都应做好记录(记录表参见附录 I)。标记重捕法一般适用于封闭的小型湖泊。
5.7.2 标记方法
选择合适的标记方法,一般采用挂牌标记、线码标记、荧光标记、切鳍标记等方法。
5.7.3 选择放流对象
最好选用个体较大、健壮的野生鱼类,并在池塘或者人工圈养的水体内暂养。
5.7.4 存活和脱标实验
选择一定数量成功标记的个体进行暂养。3日后,逐尾检测标记的存留状况,及鱼类的
存活和生活状况。根据不同标记部位的留存率和不同标记方法对鱼类生活行为的影响程度,
选择标记留存率较大且对鱼类生活影响较小的标记部位。
5.7.5 标记和放流
根据 5.7.4确定的标记方法,对鱼类进行标记。标记当日停止投喂饵料,次日恢复饵料
的投喂。运输前 2至 3天,将生长良好的鱼类筛选好分塘暂养,如果缺少池塘条件应将鱼类
集中于网箱中暂养,同时反复清洗网箱,增加鱼类在网箱中的活动量,刺激鱼体分泌粘液并
将粪便排出;运输前应停止投喂 1至 2天。
85.7.6 标记鱼的回捕
标记鱼的回捕分四类:(1)发布消息,有偿回收;(2)渔获物调查;(3)在放流水域周
边乡镇的集市上进行访问调查;(4)自主采样。
5.7.7 样品的处理方法
已死亡的样本用 10%甲醛溶液保存以备检测,而活体则暂养于池塘,经检测后标记放流。
5.8 遗传多样性分析
5.8.1 样本处理
选择较新鲜的鱼类标本,剪取鳍条、肌肉等组织样本,每份样本分别浸泡于 95 %以上
纯度乙醇中单独保存。其中微卫星多态性分析要求每个地理群体至少需要 30尾样本,线粒
体或者核基因序列分析至少需要 5尾样本。
5.8.2 DNA 提取
用高盐法或专业 DNA提取试剂盒提取样本基因组 DNA。
5.8.3 遗传结构的获得
选用线粒体基因序列分析、核基因序列分析、微卫星多态性分析等方法,选用相关的引
物,进行 PCR(聚合酶链式反应)扩增。PCR 产物经琼脂糖凝胶......
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