路径: 主页 > NY/T > 第39页 > NY/T 674-2003 | 标准编号 | NY/T 674-2003 (NY/T674-2003) | | 中文名称 | 转基因植物及其产品检测DNA提取和纯化 | | 英文名称 | Detection of genetically modified plant organisms and derived products. DNA extraction and purification | | 行业 | 农业行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B20 | | 国际标准分类 | 65.020.99 | | 字数估计 | 4,461 | | 发布日期 | 2003-04-01 | | 实施日期 | 2003-05-15 | | 引用标准 | NY/T 672; NY/T 673 | | 范围 | 本标准规定了转基因植物及其产品中DNA提取和纯化的方法和技术要求。本标准适用于转基因植物及其产品中DNA的提取和纯化。 | NY/T 674-2003
Detection of genetically modified plant organisms and derived products.DNA extraction and purification
ICS ６５．０２０．９９
B２０
中华人民共和国农业行业标准
NY／T６７４-２００３
转基因植物及其产品检测
DNA提取和纯化
２００３-０４-０１发布
２００３-０５-１５实施
中华人民共和国农业部 发 布
前言
本标准由农业部科技教育司提出。
本标准起草单位：中国农业科学院生物技术所、中国农业科学院植物保护研究所、上海市农业科学
院、农业部科技发展中心、中国农业大学。
本标准主要起草人：贾士荣、金芜军、张大兵、彭于发、黄昆仑、李宁、汪其怀、罗云波。
本标准首次发布。
NY／T６７４-２００３
转基因植物及其产品检测
DNA提取和纯化
１ 范围
本标准规定了转基因植物及其产品中ＤＮＡ提取和纯化的方法和技术要求。
本标准适用于转基因植物及其产品中ＤＮＡ的提取和纯化。
２ 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有
的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
ＮＹ/T ６７２ 转基因植物及其产品检测 通用要求
ＮＹ/T ６７３ 转基因植物及其产品检测 抽样
３ 原理
通过物理和化学方法使ＤＮＡ从样品的不同组分中分离出来。利用不同的纯化方法，弃除样品中
的蛋白质、脂肪、多糖及其他次生代谢物，及ＤＮＡ提取过程中加入的三氯甲烷、异戊醇、异丙醇、乙醇和
乙酸钠等，获得纯化的ＤＮＡ。
４ 试剂与溶液
除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂；配制好的溶液经高温灭菌后使用。
４．１ 溴代十六烷基三甲胺（ｃｅｔｙｌｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ，ＣＴＡＢ）。
４．２ 三羟甲基氨基甲烷［ｔｒｉｓ（ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏｍｅｔｈａｎｅ，Ｔｒｉｓ］。
４．３ 二水乙二胺四乙酸二钠（ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃａｃｉｄ，ｄｉｓｏｄｉｕｍｓａｌｔ，ｄｉｈｙｄｒａｔｅ，ＥＤＴＡ-Ｎａ·
２Ｈ２Ｏ）。
４．４ Ｅ-巯基乙醇（Ｅ-ｍｅｒｃａｐｔｏｅｔｈａｎｏｌ）。
４．５ 三氯甲烷（ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ）。
４．６ 异戊醇（ｉｓｏａｍｙｌａｌｃｏｈｏｌ）。
４．７ 异丙醇（ｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｌｃｏｈｏｌ）。
４．８ 三氯甲烷＋异戊醇＝２４＋１（体积比）。
４．９ ７６％乙醇溶液：取７６０ｍＬ无水乙醇，加水定容至１Ｌ。
４．１０ ７０％乙醇溶液：取７００ｍＬ无水乙醇，加水定容至１Ｌ。
４．１１ ＣＴＡＢ提取缓冲液Ⅰ：配制每升ＣＴＡＢ提取缓冲液Ⅰ，应在８００ｍＬ去离子水中加入４６．７５ｇ氯
化钠，摇动容器使溶质完全溶解，然后加入５０ｍＬ１ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ（ｐＨ８．０）［在８００ｍＬ去离子水中溶
解１２１．１ｇ三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ），冷却至室温后用浓盐酸调节溶液的ｐＨ值至８．０（约需４２ｍＬ浓
盐酸），加水定容至１Ｌ，分装后高压灭菌］，２０ｍＬ０．５ｍｏｌ／ＬＥ......
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