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| 标准编号 | QB/T 2738-2012 (QB/T2738-2012) | | 中文名称 | 日化产品抗菌抑菌效果的评价方法 | | 英文名称 | Test methods for evaluating daily chemical products in antibacterial and bacteriostatic efficacy | | 行业 | 轻工行业标准 (推荐) | | 中标分类 | Y40 | | 国际标准分类 | 71.040.99 | | 字数估计 | 25,255 | | 旧标准 (被替代) | QB/T 2738-2005 | | 引用标准 | GB 15979-2002; GB 15981-1995; QB/T 2739-2005 | | 标准依据 | 工业和信息化部公告2012年第20号;行业标准备案公告2012年第7号(总第151号) | | 发布机构 | 工业和信息化部 | | 范围 | 本标准规定了具有特殊卫生功能的日化产品抗菌、抑菌效果的检测方法及评价标准。本标准适用于常见洗涤用品、人体皮肤清洁用品的抗菌、抑菌性能测试, 其它日化产品也可根据用途选择采用。 |
QB/T 2738-2012: 日化产品抗菌抑菌效果的评价方法
QB/T 2738-2012 英文名称: Test methods for evaluating daily chemical products in antibacterial and bacteriostatic efficacy
中华人民共和国轻工行业标准
QB/T 2738-2012代替 QB/T 2738-2005
日化产品抗菌抑菌效果的评价方法
中华人民共和国工业和信息化部发布
1 范围
本标准规定了具有特殊卫生功能的日化产品抗菌、抑菌效果的检测方法及评价标准。
本标准适用于常见洗涤用品、人体皮肤清洁用品的抗菌、抑菌性能测试,其他日化产品也可根据用途选择采用。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
4检验抗菌、抑菌日化产品效果的实验室及无菌操作的基本要求
4.1 微生物实验室应采取封闭式布局,建筑应便于清洁、消毒。为避免污染应在相对正压洁净条件下进行。因特殊需要用致病菌作指示菌时,则应在生物安全柜(负压)内进行。
4.2 试验开始前,应以湿式方法清洁台面和打扫室内地面,然后以紫外线或其他方法对实验室内空气进行消毒。
4.3 实验人员应穿戴工作服、口罩、帽子;进行无菌检验时,需经风淋后进入实验室。然后,正确穿戴好无菌隔离衣、帽和口罩。
4.4每吸取一次不同样液应更换无菌吸管,接种环(针)需在火焰上烧灼灭菌后,方可再次使用。
4.5除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。
4.6要求无菌的试剂,如蒸馏水、磷酸盐缓冲液、培养基、牛血清白蛋白、标准硬水、中和剂等,均需灭菌或过滤除菌。
4.7无菌器材和试剂,使用前须检查容器或包装是否完整,有破损者不得使用。
4.8 正在使用的无菌器材和试剂不得长时间暴露于空气中。
4.9 移液或接种时,应将试管口和琼脂平板靠近火焰,防止污染。
4.10所有用过的污染器材,应立即放入盛有消毒液的容器中,以防止对周围环境和清洁物品造成污染。
4.11 若不慎发生微生物培养物摔碎或其他试验微生物泄漏事故时,不论是否具有致病性,均应立即对污染及可能波及的区域进行消毒处理。
4.12全部试验结束后,应按常规对室内空气和环境表面进行消毒处理。
5样品采集
为使样品具有良好的代表性,应于同一批号三个运输包装中至少随机抽取12件最小销售包装样品,其中4件留样,4件做抑菌或杀菌性能测试,4件做稳定性测试。抽样的最小包装不应有破裂,检验前不得启开。
6日化产品抗菌、抑菌效果评价原则
6.1 杀菌试验测定方法
标准中杀菌试验测定方法用于考核产品的抗菌作用。
6.2 抑菌试验测定方法
标准中抑菌试验测定方法用于考核产品的抑菌作用。
6.3检验用指示微生物
依据产品执行标准或说明书适用范围进行表1中试验菌(由国家级或省级菌种保藏管理中心提供)的选择检测,也可根据产品的使用要求增加其他菌种作为检验菌种。
6.5作用时间
按产品明示的标准要求进行。(未明示的参照QB/T2850-2007《抗菌抑菌型洗涤剂》)
6.6结果报告
测试结果报告是试验情况和结果的书面表达,结果报告至少应包括:
a)试验菌种;
b)作用浓度;
c)作用时间
d)效果评价结果
e)对测定结果有影响的其他因素。
7日化产品抗菌、抑菌效果检验方法
7.1日化产品抗菌、抑菌效果检验方法分类日化产品抗菌、抑菌效果检验方法分类见表2。
7.2抗菌型日化产品的杀菌效果检验方法(悬液定量法)
7.2.1 设备
a)锥形烧瓶;
b)平皿(直径9cm);
c)量筒;
d)精密pH试纸;
e)无菌试管;
f)无菌刻度吸管(1.0mL、5.0mL、10.0mL);
g)恒温培养箱;
h)冰箱;
i)菌落计数器:
j)酒精灯;
k)电动混合器;
1)恒温干燥箱;
m)恒温水浴锅
n)湿热灭菌锅.o)电子天平;p)生物安全柜等微生物试验必备仪器。
7.2.2 试剂
a)营养琼脂培养基
称取蛋白胨10.0g、牛肉膏5.0g、氯化钠5.0g,加蒸馏水1000mL溶解,调pH至7.2~7.4,然后加入琼
脂15.0g加热溶解,分装,于121℃压力蒸汽灭菌20min后备用。
b)沙堡琼脂培养基
称取葡萄糖40.0g、蛋白胨10.0g、琼脂20.0g、加蒸馏水1000mL,将上述成分混合后,加热至完全
溶解,调pH至5.6±0.2,于115℃压力蒸汽灭菌30min后备用。
c)0.03mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)
称取无水磷酸氢二钠2.83g、磷酸二氢钾1.36g,加蒸馏水1000mL,待完全溶解后,调pH至7.2~7.4,经121℃压力蒸汽灭菌20min后备用。
d)标准硬水(硬度342mg/L)
称取氯化钙(CaCl₂)0.034g、氯化镁(MgCl₂·6H₂O)0.139g,加蒸馏水1000mL,经121℃压力蒸汽灭菌20min后备用,
e)中和剂
几种常见中和剂:
1)硫代硫酸钠5.0g、蒸馏水1000mL。
2)磷酸二氢钾1.36g、磷酸氢二钠2.83g、卵磷脂10.0g、甘氨酸10.0g、吐温(80)30.0g、蒸馏水1000mL。
3)磷酸二氢钾1.36g、磷酸氢二钠2.83g、卵磷脂3.0g、吐温(80)20.0g、蒸馏水1000mL。
4)吐温(80)20.0g、硫代硫酸钠10.0g、PBS 1000mL。
注:1)用于氯型杀菌剂;2)、3)用于非氧化型杀菌剂;4)用于氧型杀菌剂。
f)菌液制备
(1)细菌繁殖体悬液的制备
1)取冻干菌种管,在无菌操作下打开,以毛细吸管加入适量营养肉汤,轻柔吹吸数次,使菌种融
化分散。取含5.0mL~10.0mL营养肉汤培养基试管,滴入少许菌种悬液,置37℃培养18h~24h。用接
种环取第1代培养的菌悬液,划线接种于营养琼脂培养基平板上,于37℃培养18h~24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落,接种于营养琼脂斜面,于37℃培养18h~24h,即为第3代培养物。
2)取菌种第3代~14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(18h~24h),用5.0mL吸管吸取3.0mL~
5.0mL稀释液加入斜面试管内,反复吹吸,洗下菌苔。随后,用5.0mL吸管将洗液移至另一无菌试管中,用电动混合器混合(振荡)20s,或在手掌上振敲80次,以使细菌悬浮均匀。
3)初步制成的菌悬液,先用细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度,然后以稀释液稀释至所需使用的浓度。
4)细菌繁殖体悬液应保存在4℃冰箱内备用。应当天使用不得过夜。
5)怀疑有污染时,应以菌落形态、革兰染色与生化试验等法进行鉴定。
(2)白假丝酵母菌(白色念株菌)悬液制备
1)取冻干菌种管,以无菌操作打开,用毛细吸管吸加适量沙堡液体培养基于管中,轻柔吹吸数次,使菌种融化分散。取含5.0mL~10.0mL沙堡液体培养基试管,滴入少许菌种悬液,置37℃培养18h~
24h。用接种环取第1代培养的菌悬液,划线接种于沙堡琼脂培养基平板上,于37℃培养18h~24h。挑
取上述第2代培养物中典型菌落,接种于沙堡琼脂斜面,于37℃培养18h~24h,即为第3代培养物。将其密封后在4℃保存,时间不得超过6周。
2)试验时,取第3代斜面培养物在沙堡琼脂斜面上连续传代,方法与第3代相同。取第5代或6代的沙堡琼脂培养基斜面新鲜培养物(18h~24h),用5.0mL吸管吸取3.0mL~5.0mL PBS稀释液加入斜面试管内,反复吹吸,洗下菌苔。随后,用5.0mL吸管将洗液移至另一无菌试管中,用电动混合器混合20s,或在手掌上振敲80次,以使白色念珠菌悬浮均匀。
3)菌悬液保存在4℃冰箱内备用,当天使用不得过夜。
4)怀疑有污染时,应以菌落形态、革兰染色与生化试验等法进行鉴定。菌落形态可直接用显微镜观察。菌体形态可在涂片后直接用高倍显微镜观察,也可用墨水阴地法染色(将菌与黑墨水在玻片上混匀,推成薄膜)后观察。......
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