[PDF] SN/T 1071-2014 - 自动发货. 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| SN/T 1071-2014 | 125 | SN/T 1071-2014 | 9秒内发货PDF | 出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检测方法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | SN/T 1071-2014 (SN/T1071-2014) |
| 中文名称 | 出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检测方法 |
| 英文名称 | Method for the determination of anaerobic sulfite-reducing clostridia in food for export |
| 行业 | 商检行业标准 (推荐) |
| 中标分类 | X10 |
| 国际标准分类 | 67.050 |
| 字数估计 | 12,166 |
| 旧标准 (被替代) | SN/T 1071-2002 |
| 标准依据 | 质检总局关于发布2014年第一批230项出入境检验检疫行业标准的通知 |
| 发布机构 | 海关总署 |
| 范围 | 本标准规定了出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检测方法。本标准适用于出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检测。 |
SN/T 1071-2014: 出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检测方法
SN/T 1071-2014 英文名称: Method for the determination of anaerobic sulfite-reducing clostridia in food for export
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
代替 SN/T 1071-2002
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准代替SN/T 1071-2002《进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌检验方法》。
本标准与SN/T 1071-2002相比，主要技术变化如下：
--将原标准名称《进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌检验方法》修改为《出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检测方法》;
--增加了规范性引用文件；---修改和规范了“设备和材料”;
--增加了“非冷冻而易腐蚀的样品”的采集、贮存和运输，及样品制备的方法；
--增加了平板计数法中的“分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内做空白对照”;
--增加了平板计数法中结果计算的举例；
--将平板计数法中的数值单位“/g(mL)”修改为“CFU/g(mL)”;
--将最近似值(MPN)法中的数值单位“/g(mL)”修改为“MPN/g(mL)”;
--附录A中增加了2%无菌琼脂的成分和制法。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准主要起草人：曹际娟、王金玲、张莹、徐君怡、李俊环。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
--SN/T 1071-2002。
1 范围
本标准规定了出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检测方法。本标准适用于出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检测。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3 设备和材料
3.1 冰箱：2℃～5℃。
3.2 恒温水浴箱：50℃±1℃。
3.3 恒温培养箱：36℃±1℃。
3.4 天平：感量0.1g。
3.5 均质器及均质杯或均质袋。
3.6 厌氧条件及相关设备：选择合适大小的厌氧罐、密封效果好的密封盒中，或其他保持厌氧条件的设备中放入厌氧袋，也可在厌氧恒温工作站中进行培养。
3.7 无菌吸管：1mL(具0.01刻度)、10mL(具0.1刻度)或微量移液器及吸头。
3.8 无菌培养皿：直径90 mm。
3.9 无菌试管：15 mm×150 mm。
3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
4 培养基和试剂
4.1氯化钠胰蛋白胨稀释液：见附录A中A.1。
4.2 亚硫酸铁琼脂：见A.2。
4.3 庖肉培养基：见A.3。
4.4 3%过氧化氢溶液：使用前配制。
4.5 缓冲甘油-氯化钠溶液：见A.4。
4.6 2%无菌琼脂：见A.5。
5 样品的贮存和运输
5.1 冷冻样品，如不能立即进行检验，应置于-18℃保存。
5.2非冷冻而易腐蚀的样品，无菌操作称取25 g(mL)样品加入25 mL无菌缓冲甘油-氯化钠溶液(液体食品应加双料),并尽快放入2℃～5℃冰箱保存。
5.3 运送样品时，应采取措施，防止样品中微生物数量和性质发生变化。
6 样品制备
将冷冻样品在45℃以下不超过15 min,或2℃～5℃不超过18h解冻后进行检验。以无菌操作称取25g样品，放入装有225mL氯化钠胰蛋白胨稀释液的灭菌均质杯或无菌均质袋内(如为5.2中样品，加入200mL氯化钠胰蛋白胨稀释液),于8000 r/min～10000 r/min均质1min～2 min或用拍击式均质器拍击1min,制成1:10样品匀液。如为液体样品，则无菌操作移样25 mL,加入装有225 mL氯化钠胰蛋白胨稀释液的灭菌玻璃瓶中(如为5.2中样品，加入200 mL氯化钠胰蛋白胨稀释液),充分
混匀后，制成1:10样品匀液。根据样品污染情况做进一步的系列10倍递增稀释。若检测厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌的芽孢，可对1:10样品匀液进行75℃ 20 min或煮沸保持10 min热处理，之后以流水迅速冷却至室温后再做进一步的系列10倍递增稀释。
7 检验步骤与计算
7.1 平板计数法
7.1.1 适用于检验未经加工处理的生鲜食品及厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌 >10 CFU/g(mL)的食品。
7.1.2 选适宜的三个连续稀释度，从每个稀释度分别吸取1mL稀释样液于无菌培养皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内做空白对照。
7.1.3及时将约15mL冷却至50℃的亚硫酸铁琼脂培养基(可放置于50℃±1℃恒温水浴箱保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。从制备最初稀释液结束到倾注培养基于最后一个平皿，所用的时间不应超过15 min。
7.1.4 待混合物凝固后，再倾注10mL2%无菌琼脂于已凝固的培养基上作为隔层。
7.1.5待该隔层凝固后，将制备好的平板于36 ℃±1℃厌氧培养24 h～48 h。若对培养温度有特殊要求(如46 ℃),可根据情况进行培养。
7.1.6 厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌在亚硫酸铁琼脂上呈黑色菌落。
7.1.7 从计数的平板(具20个～200个菌落)中任取10个典型菌落，分别取培养物按9.1和9.2进行证实试验。对阳性结果进行计数。
7.1.8 平板典型菌落数乘以证实为厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌菌落所占比例，再乘以样品稀释倍数即为样品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌的计数，报告为厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌CFU/g(mL)。例如：在10-1样液的两个平板中分别有85个和80个菌落，而确认在10个菌落中分别有8个和4个为厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌，那么每克或每毫升食品的厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌数为(85×8/10+80×4/10)/2×10=500。
7.2 最近似值(MPN)法
7.2.1 适用于检验含有受损伤的厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌的加工食品及厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌≤10 CFU/g(mL)的食品。
7.2.2 选适宜的三个连续稀释度，从每个稀释度中分别吸取1mL稀释样液，接种于3管装有庖肉培养基的试管中，36℃±1℃厌氧培养24h～72h,待出现生长特征(培养液混浊、产气、出现异味)后，进行分离培养(即：按照7.2.3进行培养)。反之，则按阴性结果计数。
7.2.3 吸取7.2.2出现生长特征性的增菌培养物1mL分别置于无菌培养皿中，将约15 mL46 ℃的亚硫酸铁琼脂(可放置于46 ℃±1℃恒温水浴箱保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀，待其凝固后，再倾注10mL同样的培养基作为隔层，于36 ℃±1℃厌氧培养24h～48h。若生成黑色菌落，则取各培养皿中的典型菌落按8.1和8.2加以证实：若无黑色菌落生成，则按阴性结果计数。
7.2.4 最近似值(MPN)的估算应计数每个稀释样液得到的阳性反应管数。根据反应阳性管数查阅MPN检索表(见附录B),得出样品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌最近似值，报告为厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌MPN/g(mL)。
8 证......
英文网页English: SN/T 1071-2014
相关标准: GB/T 5493|SN/T 5652.13|SN/T 5652.12|SN/T 1071.1|SN/T 1071-2014|SN/T 1071|