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| 标准编号 | SN/T 1146-2002 (SN/T1146-2002) | | 中文名称 | 烟草环斑病毒检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Plant quarantine. Methods for inspection and identification of tobacco ringspot Nepovirus | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 字数估计 | 9,957 | | 发布日期 | 11/25/2002 | | 实施日期 | 5/1/2003 | | 标准依据 | State-Quality-Inspection-accreditation (2010) 290; Industry Standard Filing Notice 2010 No. 10 (Overall No. 130) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 |
SN/T 1146-2002
Plant quarantine.Methods for inspection and identification of tobacco ringspot Nepovirus
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1146-2002
植 物 检 疫
烟草环斑病毒检疫鉴定方法
2002-11-25发布
2003-05-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准附录A为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:陈枝楠、郑文华、邓琼、王东勇。
本标准系首次发布的检验检疫行业标准。
SN/T1146-2002
植 物 检 疫
烟草环斑病毒检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了进境植物检疫中对烟草环斑病毒的检疫鉴定方法。
本标准适用于进境植物种子、苗木、繁殖材料和植物产品中烟草环斑病毒的检疫鉴定。
2 原理
29nm,属线虫传多面体病毒属成员。可侵染54科、246种植物,其中主要的经济作物有:豆类、马铃薯、
甘薯、烟草、西瓜、黄瓜、甜瓜、胡萝卜、唐菖蒲、百合、鸢尾、李属、苹果、葡萄、甜樱桃等。该病毒主要分布
于北美、大洋洲、欧洲、非洲等国家,具有寄主广泛,危害症状明显、免疫原性强、容易制备高滴度、专业性
强的病毒抗血清等特点。通过血清学双抗体夹心法(DAS-ELISA)和鉴别寄主生物学鉴定方法或免疫
电镜检测,可以作为检疫工作中检疫鉴定该病毒的依据。
3 仪器
3.1 研钵
3.2 微量榨汁机
3.3 酶标仪
3.4 低速离心机(转速为4000r/min)
3.5 生物培养箱(具有光照,温度可调范围为0℃~50℃)
3.6 酶联板(48孔或96孔)
3.7 Eppendorf管(体积为1.5mL)
3.8 微量移液器(分为100μL、200μL、1000μL单头,100μL或200μL8孔道一支及相应吸头)
3.9 恒温水浴锅或恒温培养箱
3.10 分析电子天平
3.11 pH计
3.12 白瓷盘(40cm×50cm)及钝头镊子
3.13 隔离检疫温、网室
4 试剂
4.1 10×PBST缓冲液
将氯化钠(NaCl)80g、磷酸二氢钾(KH2PO4)2g、磷酸氢二钠(Na2HPO4)11.5g、氯化钾(KCl)
2g、吐温20(Tween-20)5mL溶解于1000mL蒸馏水中形成的液体。
4.2 样品提取缓冲液
将亚硫酸钠(Na2SO3)1.3g、聚乙烯基吡咯烷酮(MW24~4000,PVP)20g、叠氮......
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