路径: 主页 > SN/T > 第60页 > SN/T 1151.5-2003 | 标准编号 | SN/T 1151.5-2003 (SN/T1151.5-2003) | | 中文名称 | 对虾杆状病毒(BP)检测方法 | | 英文名称 | The shrimp baculovirus (BP) detection method | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B51 | | 国际标准分类 | 67.120.30 | | 字数估计 | 7,789 | | 发布日期 | 2003-05-28 | | 实施日期 | 2003-12-01 | | 引用标准 | GB/T 6682-1992; GB/T 18088-2000; SN/T 1151.3-2002 | | 采用标准 | OIE 水生动物健康手册 2000, MOD | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | | 范围 | 本标准规定了用直接显微镜镜检和用聚合酶链式反应(PCR)技术检测对虾杆状病毒的方法。本标准适用于对虾杆状病毒的鉴定及本病的流行病学调查、诊断、检疫和监测。 | SN/T 1151.5-2003
The shrimp baculovirus (BP) detection method
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１１５１．５-２００３
对虾杆状病毒（BP）检测方法
２００３-０５-２８发布
２００３-１２-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准是采用ＯＩＥ的《水生动物健康手册》２０００年版的检疫规程。
本标准的附录Ａ是规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：江育林、陈莉莉、潘坤永、史秀杰。
SN／T１１５１．５-２００３
对虾杆状病毒（BP）检测方法
１ 范围
本标准规定了用直接显微镜镜检和用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术检测对虾杆状病毒的方法。
本标准适用于对虾杆状病毒的鉴定及本病的流行病学调查、诊断、检疫和监测。
２ 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有
的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T ６６８２-１９９２ 分析实验室用水规格和试验方法（eqv ISO ３６９６：１９８７）
GB/T １８０８８-２０００ 出入境动物检疫采样
ＳＮ/T １１５１．３-２００２ 斑节对虾杆状病毒（ＭＢＶ）诊断方法
３ 试剂和材料
３．１ 阳性病毒ＤＮＡ：由ＯＩＥ参考实验室提供或由国家质量监督检验检疫总局指定的实验室提供。
３．２ 水：应符合GB/T ６６８２-１９９２中一级水的规格。
３．３ Ｔａｑ酶：-２０℃保存，不要反复冻融或温度剧烈变化。
３．４ ｄＮＴＰ：含ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＡＴＰ、ｄＴＴＰ各１０ｍｍｏｌ／Ｌ。
３．５ 引物：有二对引物可选用。使用时浓度为４０μｍｏｌ／Ｌ。其序列如下：
ＢＰ１Ｆ：５’-ＧＡＴ-ＣＴＧ-ＣＡＡ-ＧＡＧ-ＧＡＣ-ＡＡＡ-ＣＣ-３’
ＢＰ１Ｒ：５’-ＡＴＣ-ＧＣＴ-ＡＡＧ-ＣＴＣ-ＴＧＧ-ＣＡＴ-ＣＣ-３’扩增目的基因中的５６０ｂｐ片段。
ＢＰ２Ｆ：５’-ＴＧＴ-ＴＣＴ-ＣＡＧ-ＣＣＡ-ＡＴＡ-ＣＡＴ-ＣＧ-３’
ＢＰ２Ｒ：５’-ＡＴＣ-ＣＴＧ-ＴＴＴ-ＣＣＡ-ＡＧＣ-ＴＣＴ-ＧＣ-３’扩增目的基因中的５８０ｂｐ片段。
３．６ 异丙醇：分析纯，使用前预冷到-２０℃。
３．７ 矿物油：要求无ＤＮＡ酶和ＲＮＡ酶。
３．８ ＤＮＡ分子量标准（Ｍａｒｋｅｒ）。
３．９ 样品缓冲液：按使用说明书中规定的比例与样品混合。
４ 器材和设备
４．１ ＰＣＲ扩增仪。
４．２ 电泳仪。
４．３ 微量移液器及吸头。
４．４ 紫外观察灯。
４．５......
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