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| 标准编号 | SN/T 1166.1-2002 (SN/T1166.1-2002) | | 中文名称 | 水泡性口炎补体结合试验操作规程 | | 英文名称 | Protocol of complement fixation test for vesicular stomatitis | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 8,814 | | 发布日期 | 11/25/2002 | | 实施日期 | 5/1/2003 | | 标准依据 | 国质检认(2010)582号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 |
SN/T 1166.1-2002
Protocol of complement fixation test for vesicular stomatitis
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1166.1-2002
水泡性口炎补体结合试验操作规程
2002-11-25发布
2003-05-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
水泡性口炎(VesicularStomatitis,VS)补体结合试验在参考国际兽疫局(OIE)《哺乳动物、禽和蜜
蜂A和B类疾病诊断试验和疫苗标准手册》和实践经验的基础上制定。
本标准的附录A为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国云南出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:花群义、周晓黎、徐自忠。
本标准系首次发布的检验检疫行业标准。
SN/T1166.1-2002
水泡性口炎补体结合试验操作规程
1 范围
本标准规定了水泡性口炎补体结合试验方法。
本标准适用于动物水泡性口炎病毒抗原检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过在标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方 研
究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法(eqv ISO 3696:1987)
3 缩略语
下列缩略语适用于本标准。
3.1 CF:补体结合试验。
3.2 CH50:50%补体溶血单位。
3.3 VSV:水泡性口炎病毒。
3.4 VSV-NJ:水泡性口炎病毒新泽西型;VSV-IND水泡性口炎病毒印地安那型。
3.5 VBD:巴比妥缓冲液。
3.6 PBS:磷酸盐缓冲液。
4 原理
补体结合试验包括两个系统,第一系统为反应系统,即已知抗原(或抗体),被检血清(或抗原)和
补体。第二系统为指示系统(亦称溶血系统),即溶血素加绵羊红细胞,溶血素即抗绵羊红细胞抗体。补
体常用豚鼠血清,它对红细胞具有较强的裂解能力。补体只能与抗原-抗体复合物结合并被激活产生
溶血作用。因此,如果试验系统中的抗原和抗体是对应的,形成了免疫复合物,定量的补体就被结合,
这时加入指示系统,由于缺乏游离补体,就不产生溶血,即为阳性反应。反之试验系统中缺乏抗原或特
异性抗体,不能形成免疫复合物补体就游离于反应液中,被指示系统,即溶血素加绵羊红细胞免疫复合
物激活,发生溶血,即阴性反应。
5 试剂和材料
5.1 溶血素:由指定单位提供。也可用50%的绵羊红细胞连续免疫家兔而获得兔抗绵羊红细胞血清,
即溶血素。
5.2 补体:由指定单位提供。也可采集健康的公豚鼠血清,2只~3只豚鼠血清混合,分装成每小管
1mL,置于-25℃以下低温冻结保存使用。
5.3 2.8%绵羊红细胞悬液的制备:可直接购买保存于阿氏液中的绵羊红细胞。也可自行采血,保存于
阿氏液中。用前用冷VBD离心洗涤三次至上清液......
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