路径: 主页 > SN/T > 第65页 > SN/T 1171.1-2003 | 标准编号 | SN/T 1171.1-2003 (SN/T1171.1-2003) | | 中文名称 | 山羊关节炎-脑炎抗体检测方法 酶联免疫吸附试验 | | 英文名称 | Detection of antibodies against caprine arthritis-encephalitis virus. Protocol of enzyme-linked immunosorbent assay | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 7,785 | | 发布日期 | 2003-03-17 | | 实施日期 | 2003-09-01 | | 采用标准 | OIE/chapter2.4.4, NEQ | | 标准依据 | 国质检认[2011]90号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | SN/T 1171.1-2003
Detection of antibodies against caprine arthritis-encephalitis virus.Protocol of enzyme-linked immunosorbent assay
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１１７１．１-２００３
山羊关节炎-脑炎抗体检测方法
酶联免疫吸附试验
２００３-０３-１７发布
２００３-０９-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准根据ＯＩＥ／ｃｈａｐｔｅｒ２．４．４《诊断试验和疫苗标准手册》起草。
本标准的附录Ａ、附录Ｂ均为资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、国家质量监督检验检疫总局标准法规研
究中心。
本标准主要起草人：杨宝华、崔路、曾宪生、张艳。
本标准是首次发布的检验检疫行业标准。
SN／T１１７１．１-２００３
山羊关节炎-脑炎抗体检测方法
酶联免疫吸附试验
１ 范围
本标准规定了应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）批量检测山羊血清中抗山羊关节炎-脑炎病毒抗体
的方法。
本标准适用于山羊关节炎-脑炎的流行病学调查、诊断、检疫和疫情监测。
２ 试验原理
酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）的基本原理是将酶分子与抗体或抗体共价结合，此种结合不改变抗体
的免疫反应活性和酶的生化活性，酶标记抗体可与吸附于固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合，随
后加入的底物可在酶分子的作用下呈现颜色反应，因而可借颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色
反应的深浅与样品中相应抗体或抗原的量呈正比，通过酶标仪可检测颜色反应的光密度值。本标准的
反应原理就是将ＣＡＥ病毒抗原包被在９６孔聚乙烯微量板上，接着加入按一定比例稀释的待检血清，待
反应一定时间后，加入酶标记的抗山羊免疫球蛋白抗体，反应完成后，加入底物显色并检测反应结果。
３ 试验准备
３．１ 仪器
二氧化碳培养箱、酶标仪、倒置显微镜、超速离心机、高速离心机、细胞培养瓶、多孔道微量加样器、
９６孔聚乙烯微量板等。
３．２ 试剂
３．２．１ TNE缓冲液
０．０１ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌ，ｐＨ７．４，０．０１ｍｏｌ／Ｌ氯化钠，０．００１ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ。
３．２．２ 洗涤液
含０．０５％Ｔｗｅｅｎ-２０的双蒸水。
氯化钠８．００ｇ，氯化钾０．２０ｇ，磷酸氢二钠１．１５ｇ，磷酸二氢钾０．２０ｇ，水溶至１０００ｍＬ。
３．２．４ 高盐稀释液
含０．０５％Ｔｗｅｅｎ-２０、１０％小牛血清的０．５ｍｏｌ／Ｌ氯化钠溶液。
３．３ 标准抗原与血清制剂
ＣＡＥ种毒、标准抗原、阳性血清、阴性血清由指定单位提供。抗山羊ＩｇＧ过氧化物酶结合物按市售
说明书使用。
４ 试验程序
４．１ ELISA操作程序
４．１．１ 于９６孔聚乙烯微量板中加入用......
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