路径: 主页 > SN/T > 第65页 > SN/T 1172-2003 | 标准编号 | SN/T 1172-2003 (SN/T1172-2003) | | 中文名称 | 鸡白血病检测方法. 琼脂免疫扩散试验 | | 英文名称 | The chicken leukemia detection method. Agar immunodiffusion test | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 6,651 | | 发布日期 | 2003-03-17 | | 实施日期 | 2003-09-01 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | SN/T 1172-2003
The chicken leukemia detection method.Agar immunodiffusion test
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１１７２-２００３
鸡白血病检测方法 琼脂免疫扩散试验
２００３-０３-１７发布
２００３-０９-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准主要参考《中华人民共和国进出境动物检疫规程手册》（１９９７）第２．６．１２的内容而制定。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：叶奕优、黄运生、杨宝华。
本标准系首次发布的检验检疫行业标准。
SN／T１１７２-２００３
引 言
禽白血病肉瘤复合症是由禽白血病肉瘤病毒群引起的禽类（主要是鸡）多种具有传染性的良性和恶
性肿瘤，在自然条件下最常见的是淋巴细胞性白血病，其次为成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病、骨
髓细胞瘤、内皮瘤、纤维肉瘤和骨化石等。大多数肿瘤与造血系统有关，少数侵害其他组织。本病在自
然条件下只有鸡能感染。传染源为病鸡和带毒鸡，尤其是带毒鸡在本病传播中起着重要作用。有毒血
症的母鸡，本身没有症状而生下的蛋常带有病毒，孵出病雏带毒，它再与健康雏鸡接触时可以扩大传染
到整个鸡群。先天感染的雏鸡常有免疫耐受现象，它不产生抗肿瘤病毒抗体，长成母鸡后，长期带毒排
毒，成为重要的传染源。后天接触感染的雏鸡的带毒排毒现象与接触感染时雏鸡的日龄有很大关系，雏
鸡在２周龄以内感染这种病毒，发病率和死亡率很高，残存母鸡生下的蛋带有病毒的比例也很高。４至
８周龄鸡感染后，发病死亡数大大降低，１０周龄以上的鸡则可以不发病，其蛋不带毒。
此病世界各国均有存在，一些养鸡业发达国家，大多数鸡群都感染此病。我国农业部于１９９２年公
布的《进境动物一、二类传染病、寄生虫病名录》把该病列入二类传染病名录中。
该病的诊断方法主要是病原学检查，方法有补体结合（ＣＦ）试验、抵抗力诱发因子（ＲＩＦ）试验、表型
混合（ＰＭ）试验、琼脂扩散试验、ＥＬＩＳＡ与荧光抗体试验，其中以ＰＭ比较准确可靠，是目前世界上检查
淋巴细胞性白血病病毒比较常用的方法，主要用于ＳＰＦ鸡群的建立和监测，ＲＩＦ试验可用于鉴定病毒
亚群，琼脂扩散试验用于检测鸡体内禽白血病病毒群特异性抗原，操作简便，可作群体疫情监测。
SN／T１１７２-２００３
鸡白血病检测方法 琼脂免疫扩散试验
１ 范围
本标准规定了用已知鸽抗劳氏肉瘤病毒抗体，应用琼脂免疫扩散试验，检测鸡体内白血病病毒群特
异性抗原。
本标准适用于５日龄以上鸡的白血病的检疫、疫情监测以及流行病学的调查。
２ 试验原理
琼脂糖是一种含有硫酸基的多糖体，高温时能溶于水，冷却后凝固形成凝胶，琼脂糖凝胶呈多孔结
构，其孔径大小取决于琼脂糖的浓度。１％琼脂糖凝胶的孔径约８５ｎｍ，这一孔径范围能允许各种抗原
抗体分子在琼脂糖凝胶中自由扩散，并由近及远形成浓度梯度，当二者相遇时，在比例适当处发生结合
而形成沉淀，反应的沉淀物因其颗粒较大，故在凝胶中不再抗散，而形成沉淀带。根据有无沉淀带的形
成判断是否存在相应的抗原抗体免疫反应，从而判断样品中是否存在相应的抗原。
３ 器材与试验准备
３．１ 试剂
３．１．１ 标准阳性血清：鸽抗劳氏肉瘤病毒血清，由指定单位提供。
３．１．２ 标准抗原：禽白血病抗原，由指定单位提供。
３．１．３ 琼脂糖。
３．１．４ 硼酸缓冲液ｐＨ８．６
四硼酸钠 ８．８ｇ
硼酸 ４．６５ｇ
蒸馏水加至 １０００ｍＬ
３．１．５ １％硫柳汞溶液。
３．１．６ 生理盐水。
３．２ 器材
３．２．１ 天平。
３．２．２ 外径５ｍｍ、孔距３ｍｍ的７孔梅花样金属打孔器，外径５ｍｍ打孔器。
３．２．３ 玻璃棒（直径０．４ｃｍ、长１５ｃｍ）。
３．２．４ 直径９０ｍｍ平皿。
３．２．５ 直径１５ｍｍ长１１０ｍｍ试管。
３．２．６ 微量移液器（２０μＬ～２００μＬ）。
３．３ 琼脂平板的制备
３．３．１ 称取琼脂糖，用含０．０１％硫柳汞的ｐＨ８．６的硼酸缓冲液制成１％琼脂糖溶液，隔水煮沸溶化１）。
１）可用水浴锅或微波炉把琼脂糖隔水煮沸溶化。
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