路径: 主页 > SN/T > 第65页 > SN/T 1173-2003 | 标准编号 | SN/T 1173-2003 (SN/T1173-2003) | | 中文名称 | 鸡病毒性关节炎抗体检测方法. 酶联免疫吸附试验 | | 英文名称 | Protocol of detection antibodies against avian viral arthritis virus. Enzyme-linked immunosobert assay (ELISA) | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 6,627 | | 发布日期 | 2003-03-17 | | 实施日期 | 2003-09-01 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | SN/T 1173-2003
Protocol of detection antibodies against avian viral arthritis virus.Enzyme-linked immunosobert assay (ELISA)
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１１７３-２００３
鸡病毒性关节炎抗体检测方法
酶联免疫吸附试验
２００３-０３-１７发布
２００３-０９-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准的附录Ａ为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：钟安清、杨建中、卢体康。
本标准系首次发布的检验检疫行业标准。
SN／T１１７３-２００３
鸡病毒性关节炎抗体检测方法
酶联免疫吸附试验
１ 范围
本标准规定了应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测鸡血清中抗鸡病毒性关节炎抗体的方法。
本标准适用于抗鸡病毒性关节炎的流行病学调查、诊断、检疫和疫情监测。
２ 操作方法
２．１ 原理
本标准采用ＥＬＩＳＡ间接法。该方法利用抗原抗体反应具有特异性，将特异性的鸡病毒性关节炎
ＥＬＩＳＡ抗原吸附到固相载体的表面后，待测物中若含有相应的抗鸡病毒性关节炎病毒的抗体，则可与
所包被的抗原相结合，并能继续和相应的羊抗鸡的酶标抗体结合形成复合物。在遇到相应的底物时，复
合物中的酶能催化底物反应。其显色的深浅与相应的抗体量成正比。可借助颜色反应的深浅来定性。
在建立标准曲线的情况下还可以定量（本标准仅作定性用）。
２．２ 试剂和材料
２．２．１ 试剂
配方见附录Ａ。
ａ） 包被液：０．１ｍｏｌ／Ｌ碳酸盐缓冲液（ｐＨ９．６）。
ｂ） 洗涤液：含０．５ｍｏｌ／Ｌ氯化钠及０．１％Ｔｗｅｅｎ-２０的０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ，ｐＨ７．２～
７．４）。
ｃ） 封闭液：含５％犊牛血清及０．１％Ｔｗｅｅｎ-２０的ＴＮＥ溶液。
ｄ） 底物溶液：含０．０４％邻苯二胺（ＯＰＤ）、０．０５％双氧水的柠檬酸-磷酸盐缓冲液（ｐＨ５．０）。
ｅ） 终止液：２ｍｏｌ／Ｌ硫酸溶液。
ｆ） 鸡病毒性关节炎ＥＬＩＳＡ抗原、羊抗鸡ＩｇＧ酶标抗体、阳性参考血清和阴性参考血清：均由权威
机构或国家认可的生产商提供。
２．２．２ 设备
聚苯乙烯微量反应板（４０孔或９６孔）、酶标检测仪、微量移液器、塑料滴头、５０μＬ或１００μＬ微量注
射器。
２．３ 操作方法
２．３．１ 包被
将鸡病毒性关节炎ＥＬＩＳＡ抗原用包被液稀释到工作浓度，每孔加１００μＬ，置３７℃水浴１ｈ后再置
４℃过夜后备用。
２．３．２ 洗涤
甩干包被液，每孔加封闭液２００μＬ，置３７℃水浴９０ｍｉｎ，甩干后用洗涤液洗涤三次，甩干。
２．３．３ 吸附
将待检血清用......
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