路径: 主页 > SN/T > 第65页 > SN/T 1207-2003 | 标准编号 | SN/T 1207-2003 (SN/T1207-2003) | | 中文名称 | 猪痢疾短螺旋体分离培养操作规程 | | 英文名称 | Protocol of isolation and culture of brachyspira hyodysenteriae for swine dysentery | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 7,761 | | 发布日期 | 2003-03-17 | | 实施日期 | 2003-09-01 | | 标准依据 | 国质检认(2011)291号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | SN/T 1207-2003
Protocol of isolation and culture of brachyspira hyodysenteriae for swine dysentery
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１２０７-２００３
猪痢疾短螺旋体分离培养操作规程
２００３-０３-１７发布
２００３-０９-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准是根据《中华人民共和国进出境动物检疫规程手册》（１９９７）中方法，并结合猪痢疾诊断方法
的研究基础及实践经验编写制定。
本标准的附录Ａ是规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国湖北出入境检验检疫局、华中农业大学。
本标准主要起草人：张四喜、陈焕春、金梅林、徐共和、刘建杰、徐家文、蔡立新、王光亭。
SN／T１２０７-２００３
猪痢疾短螺旋体分离培养操作规程
１ 范围
本标准规定了猪痢疾短螺旋体分离培养的方法。
本标准适用于实验室对猪痢疾的诊断。
２ 缩略语
下列缩略语适用于本标准。
２．１ ＳＤ：猪痢疾。
２．２ Ｂ．ｈ：猪痢疾短螺旋体。
２．３ Ｂ．ｉ：非致病性短螺旋体。
２．４ Ｂ．ｐ：结肠菌毛样短螺旋体。
３ 猪痢疾短螺旋体分离培养
３．１ 材料准备
厌氧罐、高纯度氢气、高纯度二氧化碳、真空泵、恒温箱、触媒、培养基、９ｃｍ的培养皿、抗生素、脱
纤牛血等。
３．２ 病料的采取和保存
采取新鲜粪便、肠内容物或病变粘膜，不要冰冻，迅速镜检或分离培养。粪便等拭子可置于含有
０．５ｍＬ磷酸缓冲盐水（０．０１ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ７．２）（见第Ａ．４章）的试管内，密封后０℃～４℃保存，３ｄ内必须
分离培养。两头结扎的结肠段，０℃～４℃可保存５ｄ～７ｄ。
３．３ 分离用培养基
猪痢疾短螺旋体（Ｂ．ｈ）选择分离培养基ＢＪ，其成分和配制方法见附录Ａ，培养基现用现配。
３．４ 操作方法
将病料作直接划线或用无菌缓冲液（０．０１ｍｏｌ／ＬＰＢＳ，ｐＨ７．２）１∶１０稀释后接种于ＢＪ培养基，置
厌氧培养器内４２℃培养，隔３ｄ～５ｄ检查，无菌生长判为阴性。如有Ｂ．ｈ生长可见到β溶血区，溶血区
呈条状或一端稍尖的椭圆形斑点，此与其他细菌在菌落周围形成圆形溶血区有明显不同。经镜检有
Ｂ．ｈ样微生物时（２个～４个螺旋、两端尖锐的蛇样菌），即可在无杂菌的溶血区挑取一小块琼脂，接种于
ＢＪ培养基３７℃培养分离纯培养。在厌氧培养器与抽气机之间，连接负压表、二氧化碳袋和氢气袋各一
只，先将容器内空气抽除，然后按负压表上的刻度放进２０％二氧化碳和８０％氢气。容器内应预先放入
适量冷钯触媒（１０５催化剂），用过的冷钯经１６０℃烤２ｈ后可反复使用。
Ｂ．ｈ在形态上与Ｂ．ｐ、Ｂ．ｉ相同，仅可根据......
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