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| 标准编号 | SN/T 1350-2004 (SN/T1350-2004) | | 中文名称 | 牛锥虫病补体结合试验方法 | | 英文名称 | Protocol of compliment fixation test for trypanosomiasis | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 8,876 | | 发布日期 | 2004-06-01 | | 实施日期 | 2004-12-01 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 |
SN/T 1350-2004
Protocol of compliment fixation test for trypanosomiasis
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1350-2004
牛 锥 虫 病 补 体 结 合 试 验 方 法
2004-06-01发布
2004-12-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准的附录A为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国山东出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:孟广校、徐彪、朱咏梅、生成选。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN/T1350-2004
牛 锥 虫 病 补 体 结 合 试 验 方 法
1 范围
本标准规定了牛锥虫病补体结合试验方法。
本标准适用于牛锥虫病的抗体检测。
2 试验材料
2.1 器材
96孔“U”型微量板、10μL~100μL可调移液器、培养箱、水浴锅、15mL尖底离心管、离心机、
12mm×75mm试管。
2.2 试剂
2.2.1 溶血素:从生物制药厂购买,效价不低于1∶1500。
2.2.2 补体:选择成年雄性豚鼠3只~4只,绝食6h~8h后,从心脏采血,分离新鲜血清保存于普通
冰箱中备用。也可以购买冻干补体。
2.2.3 锥虫病抗原、阳性血清和阴性血清:从生物制品厂购买。
2.2.4 绵羊红细胞悬液的制备:见第A.1章。
2.2.5 巴比妥缓冲液(简称VBS):见第A.2章。
2.2.6 溶血标准比色孔的制备:见第A.3章。
2.3 血清的处理
被检血清、标准阳性血清和标准阴性血清,使用前均需56℃灭活30min。
3 预备试验
3.1 溶血素效价的测定
3.1.1 配制1:20的补体。
3.1.2 溶血素稀释:将溶血素用VBS做1∶500,1∶1000,1∶1500,1∶2000,1∶2500,1∶3000,
1∶3500,1∶4000,1∶4500,1∶5000稀释。
3.1.3 溶血素效价测定:取96孔“U”型微量板,按表1中各成分的量加入各孔中。
表1 溶血素效价测定表 单位为微升
成分
管 号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 溶血素补体红细胞
溶血素
稀释度
500× 1000× 1500× 2000× 2500× 3000× 3500× 4000× 4500× 5000× 1∶100 - -
溶血素 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 - -
VBS 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 75 75 100
补体
1∶20
25 25 25 2......
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