路径: 主页 > SN/T > 第65页 > SN/T 1467-2004 | 标准编号 | SN/T 1467-2004 (SN/T1467-2004) | | 中文名称 | 小鹅瘟病毒分离和琼脂免疫扩散试验方法 | | 英文名称 | Method of virus isolation and ager-gelimmunodiffusion test for gosling plague | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 8,896 | | 发布日期 | 2004-11-17 | | 实施日期 | 2005-04-01 | | 标准依据 | 2005 Bulletin No. 3 industry standard | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | SN/T 1467-2004
Method of virus isolation and ager-gelimmunodiffusion test for gosling plague
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１４６７-２００４
小鹅瘟病毒分离和琼脂免疫扩散
试验方法
２００４-１１-１７发布
２００５-０４-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准的附录Ａ为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：李超美、罗朝科、朱雪良、刘学辉、王成龙。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１４６７-２００４
小鹅瘟病毒分离和琼脂免疫扩散
试验方法
１ 范围
本标准规定了小鹅瘟病毒分离和琼脂免疫扩散试验方法。
本标准适用于病毒分离鉴定和小鹅瘟病毒抗体的检测。
２ 病毒分离
２．１ 材料准备
２．１．１ 仪器设备
超净工作台、普通离心机、小型孵化箱或培养箱、灭菌剪刀、镊子、三角烧瓶、玻璃研磨器、离心机、吸
管（１ｍＬ、２ｍＬ、５ｍＬ、１０ｍＬ）。
２．１．２ 试剂
２．１．２．１ 蒸馏水。
２．１．２．２ ＰＢＳ液（见第Ａ．１章）。
２．１．２．３ 青霉素、链霉素（见第Ａ．２章）、三氯甲烷（分析液）。
２．１．２．４ ＳＰＦ鹅胚或番鸭胚。
２．２ 病料及处理
２．２．１ 取病料
取可疑小鹅瘟病雏鹅或死亡雏鹅，无菌操作取肝、胰、脾、肾、脑等内脏器官病料放置灭菌的玻璃瓶
冻结保存（-２０℃）作为病毒分离。
２．２．２ 初步处理
先将病料组织剪碎、研磨，用灭菌ＰＢＳ液作１∶５～１∶１０稀释，经３０００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ，取上清
液加入青霉素和链霉素，使之各含１０００ＩＵ／ｍＬ，置３７℃温箱中３０ｍｉｎ，经细菌检验为阴性者作为病毒
分离材料。
２．３ 胚胎接种
２．３．１ 鹅胚接种
将上述病毒分离材料通过尿囊腔分别接种６枚１２日龄易感鹅胚，每胚０．２ｍＬ，置３７℃～３８℃孵化
箱内继续孵化，每天照胚２次～４次，观察９ｄ，一般经５ｄ～７ｄ大部分胚胎死亡。弃去４８ｈ以内死亡的
胚胎，收集４８ｈ以后死亡的鹅胚，放置４℃～８℃冰箱内冷却收缩血管。无菌操作吸取尿囊液保存和作
无菌检验，并观察胚胎病变。无菌的尿囊液冻结保存（-７０℃）作传代及检验用。
２．３．２ 番鸭胚接种
将上述病毒分离材料接种６枚１２日龄易感番鸭胚，每胚尿囊腔接种０．２ｍＬ，置３７℃～３８℃孵化箱
内继续孵化，每天照胚２次～４次，观察９ｄ，一般经５ｄ～９ｄ大部分胚胎死亡。弃去４８ｈ死亡的胚胎，
收集４８ｈ以后死亡的番鸭胚，放置４℃～８℃冰箱内冷却收缩血管。无菌操作吸取尿囊液保存和作无菌
检验，并观察胚胎病变。无菌的尿囊液冻结保存（-７０℃）作传代及检验用。
２．３．３ 胚胎病变
由本病毒致死的鹅胚和番鸭胚具有相......
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