路径: 主页 > SN/T > 第65页 > SN/T 1559.1-2005 | 标准编号 | SN/T 1559.1-2005 (SN/T1559.1-2005) | | 中文名称 | 非洲猪瘟直接免疫荧光试验操作规程 | | 英文名称 | Protocol of haemadsorption test for African swine fever virus | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 6,611 | | 发布日期 | 2005-02-17 | | 实施日期 | 2005-07-01 | | 标准依据 | Industry standard filing Notice No. 4 of 2005 (No. 64 overall); National Quality recognize [2010] 98; industry standard filing Notice No. 5 of 2010 (No. 125 overall) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | | 范围 | 本标准规定了直接免疫荧光试验检测非洲猪瘟病毒的方法;本标准适用于非洲猪瘟病毒的检测; | SN/T 1559.1-2005
Protocol of haemadsorption test for African swine fever virus
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１５５９．１-２００５
非洲猪瘟直接免疫荧光试验操作规程
２００５-０２-１７发布
２００５-０７-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准参照了国际动物卫生组织（ＯＩＥ）公布的《诊断试验和疫苗标准手册》（２００４年版）关于非洲
猪瘟诊断中的免疫荧光抗体试验方法。
本标准的附录Ａ为资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：刘中勇、许如苏、游洪、周军。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１５５９．１-２００５
非洲猪瘟直接免疫荧光试验操作规程
１ 范围
本标准规定了直接免疫荧光试验检测非洲猪瘟病毒的方法。
本标准适用于非洲猪瘟病毒的检测。
２ 仪器设备
２．１ 冷冻切片机。
２．２ 恒温培养箱。
２．３ 荧光显微镜。
２．４ 冰箱。
２．５ ｌｅｉｇｔｏｎ管（１６０ｍｍ×１６ｍｍ）。
３ 试验材料
３．１ 非洲猪瘟标准毒株。
３．２ 非洲猪瘟荧光抗体：使用前用稀释液稀释至工作浓度。
３．３ 蒸馏水（ｐＨ７．４），配制方法参见附录Ａ。
３．４ ０．０１ｍｏｌ／ＬｐＨ７．４ＰＢＳ（磷酸盐缓冲液），配制方法参见附录Ａ。
３．５ 缓冲甘油：使用中性无自发荧光的甘油（分析纯）配制，配制方法参见附录Ａ。
３．６ 丙酮：使用前置冰箱预冷。
３．７ 待检组织：无菌采取可疑病猪的脾脏、扁桃体、肾脏、淋巴结，置于尽可能的低温、但不能冻结的容
器内运送、保存。
４ 操作方法
４．１ 待检组织制备
４．１．１ 组织切片、印片或涂片
将待检组织制成厚度为４μｍ～７μｍ的冰冻切片，也可制成印片或涂片。
４．１．２ 白细胞培养物涂片
４．１．２．１ 配制组织悬液
用组织研磨器或捣碎器将被检组织磨碎，加入０．０１ｍｏｌ／ＬｐＨ７．４ＰＢＳ和抗菌素，配制成２０％的
组织悬液（每毫升组织悬液的抗菌素含量为：青霉素１０００ＩＵ，链霉素１ｍｇ，庆大霉素５０ＩＵ，制霉菌素
５０ＩＵ），备用。
４．１．２．２ 制备白细胞
采取健康猪血，用玻璃珠脱纤或用肝素抗凝（每毫升猪血含肝素１００ＩＵ），７００ｇ离心３０ｍｉｎ，吸出
血清或血浆备用。另外吸取白细胞，并用细胞基础......
|