路径: 主页 > SN/T > 第65页 > SN/T 1559.3-2005 | 标准编号 | SN/T 1559.3-2005 (SN/T1559.3-2005) | | 中文名称 | 非洲猪瘟病毒红血球吸附试验操作规程 | | 英文名称 | Protocol of haemadsorption test for African swine fever virus | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 6,615 | | 发布日期 | 2005-02-17 | | 实施日期 | 2005-07-01 | | 标准依据 | Industry standard filing Notice No. 4 of 2005 (No. 64 overall); National Quality recognize [2010] No. 98 Notice industry standard record No. 5, 2010 (No. 125 overall) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | | 范围 | 本标准规定了红血球吸附试验检测非洲猪瘟病毒的方法;本标准适用于检测组织或外周血中的非洲猪瘟病毒; | SN/T 1559.3-2005
Protocol of haemadsorption test for African swine fever virus
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１５５９．３-２００５
非洲猪瘟病毒红血球吸附试验操作规程
２００５-０２-１７发布
２００５-０７-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准参照了国际动物卫生组织（ＯＩＥ）公布的《诊断试验和疫苗标准手册》（２００４年版）中关于非
洲猪瘟诊断的红血球吸附试验方法。
本标准的附录Ａ为资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局负责起草。
本标准的主要起草人：游洪、许如苏、刘中勇、王彭军。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１５５９．３-２００５
非洲猪瘟病毒红血球吸附试验操作规程
１ 范围
本标准规定了红血球吸附试验检测非洲猪瘟病毒的方法。
本标准适用于检测组织或外周血中的非洲猪瘟病毒。
２ 仪器设备
２．１ 组织研磨器或捣碎器。
２．２ 离心机。
２．３ 二氧化碳培养箱。
２．４ 恒温培养箱或水浴箱。
２．５ 显微镜、倒置显微镜。
２．６ ｌｅｉｇｔｏｎ管（１６０ｍｍ×１６ｍｍ）。
３ 试验材料
３．１ ０．９％氯化钠：配制方法参见附录Ａ。
３．２ ０．０１ｍｏｌ／ＬｐＨ７．４ＰＢＳ（磷酸盐缓冲液）：配制方法参见附录Ａ。
３．３ 青霉素、链霉素、庆大霉素和制霉菌素。使用前宜用上述 ＰＢＳ分别配成１００００ＩＵ／ｍＬ、
１０ｍｇ／ｍＬ、５００ＩＵ／ｍＬ和５００ＩＵ／ｍＬ的溶液。
３．４ 肝素：使用前用０．９％氯化钠配成１０００ＩＵ／ｍＬ。
３．５ 细胞基础培养液（如 ＭＥＭ等）：配制方法参见附录Ａ。
３．６ １％猪红血球：配制方法参见附录Ａ。
３．７ 非洲猪瘟标准毒株。
３．８ 被检材料：包括肝素抗凝血和脾脏、扁桃体、肾脏、淋巴结等组织。被检材料应置于尽可能的低温，
但不冻结的容器内保存、运送。
４ 操作方法
４．１ 原代白细胞血球吸附试验
４．１．１ 制备组织悬液
用组织研磨器或捣碎器将被检组织磨碎，加入０．０１ｍｏｌ／ＬｐＨ７．４ＰＢＳ和抗菌素，配制成２０％的组
织悬液（每毫升组织悬液的抗菌素含量为：青霉素１０００ＩＵ，链霉素１ｍｇ，庆大霉素５０ＩＵ，制霉菌素
５０ＩＵ），备用。
４．１．２ 制备白细胞
采取健康猪血，用玻璃珠脱纤或用肝素抗凝（每毫升猪血含肝素１００ＩＵ），７００ｇ离心３０ｍｉｎ，吸出
血清或血浆备用。另外吸取白细胞，并用细胞基础培养液洗涤３次，备用。
４．１．３ 配制细胞培养液
将上述血清或血浆加入细胞基础培养液内配制成细胞培养液，血清或血浆的终浓度为１０％～
３０％，......
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