路径: 主页 > SN/T > 第65页 > SN/T 1686-2005 | 标准编号 | SN/T 1686-2005 (SN/T1686-2005) | | 中文名称 | 新城疫病毒中强毒株检测方法 荧光RT-PCR法 | | 英文名称 | Newcastle disease virus virulent strain detection methods in fluorescence RT-PCR method | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 9,926 | | 发布日期 | 9/30/2005 | | 实施日期 | 2006-05-01 | | 标准依据 | Industry standard filing Notice 2005 No. 12 (No. 72 overall) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | SN/T 1686-2005
Newcastle disease virus virulent strain detection methods in fluorescence RT-PCR method
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１６８６-２００５
新城疫病毒中强毒株检测方法
荧光RT-PCR法
２００５-０９-３０发布
２００６-０５-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准的附录Ａ为规范性附录，附录Ｂ为资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：张鹤晓、刘环、高志强、张利峰、谷强、王甲正。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１６８６-２００５
新城疫病毒中强毒株检测方法
荧光RT-PCR法
１ 范围
本标准规定了新城疫病毒中强毒株ＴａｑＭａｎ实时荧光ＲＴ-ＰＣＲ检测方法。
本标准适用于禽类及其产品新城疫病毒中强毒株的检测。
２ 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有
的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T １９４３８．１-２００４ 禽流感病毒通用荧光ＲＴ-ＰＣＲ检测方法
３ 缩略语
下列缩略语适用于本标准。
３．１ 荧光ＲＴ-ＰＣＲ 荧光反转录-聚合酶链反应。
３．２ Cｔ值 每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环圈数。
３．３ ＲＮＡ 核糖核酸。
３．４ T犪狇酶 T犪狇ＤＮＡ聚合酶。
３．５ ＰＢＳ 磷酸盐缓冲生理盐水。
３．６ ＤＥＰＣ 焦碳酸乙二酯。
４ 原理
采用ＴａｑＭａｎ方法，在比对新城疫病毒Ｆ基因序列的基础上，设计针对Ｆ基因的特异性引物和特
异性的荧光双标记探针进行配对。探针５’端标记ＦＡＭ荧光素为报告荧光基团（用Ｒ表示），３’端标记
ＴＡＭＰＡ荧光素为淬灭荧光基团（用 Ｑ表示），它在近距离内能吸收５’端荧光基团发出的荧光信号。
ＰＣＲ反应进入退火阶段时，引物和探针同时与目的基因片段结合，此时探针上Ｒ基团发出的荧光信号
被Ｑ基团所吸收，仪器检测不到荧光信号；而反应进行到延伸阶段时，T犪狇酶的５’→３’的外切核酸酶功
能将探针降解。这样探针上的Ｒ基团游离出来，所发出的荧光不再为Ｑ所吸收而被检测仪所接收。随
着ＰＣＲ反应的循环进行，ＰＣＲ产物与荧光信号的增长呈现对应关系。
５ 检测实验室的设置与管理
中强毒株新城疫病毒荧光 ＲＴ-ＰＣＲ检测实验室的标准化设置与管理见......
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