[PDF] SN/T 1697-2006 - 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| SN/T 1697-2006 | 239 | SN/T 1697-2006 | <=2 | 猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒抗体阻断ELISA鉴别试验操作规程 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | SN/T 1697-2006 (SN/T1697-2006) |
| 中文名称 | 猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒抗体阻断ELISA鉴别试验操作规程 |
| 英文名称 | Protocol of blocking ELISA for differentiating antibodies of swine transmissible gastroenteritis virus and porcine respiratory coronavirus |
| 行业 | 商检行业标准 (推荐) |
| 中标分类 | B41 |
| 国际标准分类 | 11.220 |
| 字数估计 | 6,650 |
| 发布日期 | 1/26/2006 |
| 实施日期 | 2006-08-16 |
| 引用标准 | GB/T 6682 |
| 标准依据 | 行标公告2006年第4期(总第76期);国质检认(2010)290号;行业标准备案公告2010年第10号(总第130号) |
| 发布机构 | 海关总署 |
| 范围 | 本标准规定了猪传染性胃肠炎（TGE）病毒抗体阻断ELISA鉴别试验的操作技术要求。本标准适用于猪传染性胃肠炎病毒、猪呼吸道冠状病毒鉴别。 |
SN/T 1697-2006
Protocol of blocking ELISA for differentiating antibodies of swine transmissible gastroenteritis virus and porcine respiratory coronavirus
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１６９７-２００６
猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒
抗体阻断ELISA鉴别试验操作规程
２００６-０１-２６发布
２００６-０８-１６实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准的附录Ａ、附录Ｂ、附录Ｃ均为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：罗长保、陈茹、刘琳琳。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１６９７-２００６
猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒
抗体阻断ELISA鉴别试验操作规程
１ 范围
本标准规定了猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）病毒和猪呼吸道冠状（ＰＲＣ）病毒抗体阻断ＥＬＩＳＡ鉴别试验
的操作技术要求。
本标准适用于猪传染性胃肠炎病毒、猪呼吸道冠状病毒鉴别。
２ 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有
的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和实验方法
３ 材料
３．１ 病毒及细胞
ＳＴ细胞生长在９６孔细胞培养板，形成单层后用ＴＧＥ病毒Ｍｉｌｅｒ６株感染。２４ｈ后待细胞病变率
不大于１０％时固定细胞。
３．２ 固定细胞
细胞板用ＰＢＳ（ｐＨ７．４）洗涤１次～２次后，用８０％丙酮（预冷-２０℃）固定１５ｍｉｎ，倒掉丙酮，在通
风橱中干燥１０ｍｉｎ，然后保存在-２０℃备用。
３．３ 抗体
生物素标记抗ＴＧＥ病毒，Ａ位点单抗，抗ＴＧＥ病毒Ｄ位点单抗。
４ 操作方法
４．１ 从-２０℃取出板置室温，用ＰＢＳＴ（见附录Ａ）室温下（２５℃左右）阻断非特异性位点２ｈ后，甩掉
ＰＢＳＴ并在纸巾上拍干，加１５０μＬＰＢＳＴ到所有病毒感染孔中。
４．２ 再加入５０μＬ阳性血清到Ａ１和Ａ２、阴性血清Ｂ１和Ｂ２（即双孔），其他被检血清安排见附录Ｂ。
４．３ 稀释好样品的细胞板置于４℃过夜。
４．４ 甩出稀释样品液，不要冲洗。
４．５ 向各孔加入１００μＬ工作浓度生物素标记的ＴＧＥＡ位点单抗。
４．６ 用于鉴别目的时，每个样品在两块板中稀释，每块板应分开操作，使用不同的单克隆抗体，分开计
算，并含有各自的阴、阳性血清。
４．７ 室温２ｈ或４℃过夜。
４．８ 用ＰＢＳＴ洗三次。
４．９ 每孔加入１００μＬ工作浓度辣根过氧化物酶标记的亲和素，室温中培养３０ｍｉｎ～４０ｍｉｎ。
４．１０ Ｐ......