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| 标准编号 | SN/T 1905-2007 (SN/T1905-2007) | | 中文名称 | 牛病毒性腹泻/粘膜病反转录聚合酶链反应操作规程 | | 英文名称 | Bovine viral diarrhea / mucosal disease reverse transcription polymerase chain reaction operating procedures | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 10,117 | | 发布日期 | 2007-05-23 | | 实施日期 | 2007-12-01 | | 引用标准 | GB/T 6682 | | 标准依据 | 质检总局关于发布2015年第三批103项出入境检验检疫行业标准的通知;认办科函[2015]247号;行业标准备案公告2016年第3号(总第195号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了牛病毒性腹泻/粘膜病病毒反转录聚合酶链式反应检测方法。本标准适用于牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的检测。 |
SN/T 1905-2007
Bovine viral diarrhea/mucosal disease reverse transcription polymerase chain reaction operating procedures
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1905-2007
牛病毒性腹泻/粘膜病反转录聚合酶链
反应操作规程
2007-05-23发布
2007-12-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准的附录A为规范性附录,附录B为资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、深圳市匹基生物工程股份有限公司。
本标准主要起草人:王伟利、王振国、刘金华、孟日增、肖成蕊、石建平、牟峻、逄奎春、杨伟、赖少梅。
本标准系首次发布的检验检疫行业标准。
SN/T1905-2007
牛病毒性腹泻/粘膜病反转录聚合酶链
反应操作规程
1 范围
本标准规定了牛病毒性腹泻/粘膜病病毒反转录聚合酶链式反应检测方法。
本标准适用于牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
根据牛病毒性腹泻/粘膜病病毒基因组5’端非编码区最保守的核苷酸序列,设计合成一对特异性
引物,利用反转录聚合酶链式反应技术分别采用一步法和两步法从各种样品中扩增牛病毒性腹泻/粘膜
病病毒的特异性片段,该片段既可用于病毒性腹泻/粘膜病病毒基因分型又可以区别于其他瘟病毒属
成员。
4 设备和试剂
4.1 主要仪器和设备
4.1.1 PCR扩增仪。
4.1.2 低温高速离心机、微量高速离心机。
4.1.3 电泳仪、电泳槽。
4.1.4 凝胶成像分析系统。
4.1.5 冰箱。
4.1.6 超净工作台。
4.1.7 组织匀浆器。
4.1.8 二氧化碳培养箱。
4.2 试剂和耗材
4.2.1 水:所用水应符合GB/T 6682中三级水(三蒸水)的规格。用于PCR(尤其核酸提取)的水要用
DEPC处理以除掉RNA酶,配制方法见第A.1章。
4.2.2 营养液:配制方法见第A.2章。
4.2.3 维持液:配制方法见第A.3章。
4.2.4 细胞分散液:配制方法见第A.4章。
4.2.5 化学试剂:所有的化学试剂均为分析纯。Catrimox-14(Cat-14)、硫氰酸胍、酚、三氯甲烷、柠檬
酸钠、正丁醇、乙酸钠、乙醇、异丙醇(-20℃预冷)。
4.2.6 其他试剂:RT-PCRBeads(反转录酶)或 AMV反转录酶(5U/μL)、T犪狇DN......
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