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| 标准编号 | SN/T 3433-2012 (SN/T3433-2012) | | 中文名称 | 橡胶白根病菌检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Rigidoporus lignosus (Klotzsch) Imaz. | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 字数估计 | 15,123 | | 标准依据 | 国质检认(2012)777号;行业标准备案公告2013年第4号(总第160号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了出入境植物检疫中橡胶白根病菌Rigidoporus lignosus(Klotzsch) Imaz.的检疫鉴定方法。本标准适用于橡胶属Hevea等植物种苗及其他繁殖材料上橡胶白根病菌的检疫鉴定。 |
SN/T 3433-2012
Detection and identification of Rigidoporus lignosus (Klotzsch) Imaz.
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
橡胶白根病菌检疫鉴定方法
2012-12-12发布
2013-07-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布
机构不承担识别这些专利的责任。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准负责起草单位:中华人民共和国海南出入境检验检疫局。
本标准参加起草单位:中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检
疫局。
本标准主要起草人:韩玉春、刘福秀、李伟东、徐卫、林明光、赵立荣、闻伟刚。
橡胶白根病菌检疫鉴定方法
1 范围
方法。
本标准适用于橡胶属Hevea等植物种苗及其他繁殖材料上橡胶白根病菌的检疫鉴定。
2 原理
科 Meripilaceae,硬孔菌属Rigidoporus真菌。
橡胶白根病菌属根部专性寄居菌,主要寄生橡胶属植物的根部,离开寄主组织在土壤中不能存活。
该病菌在侵染植物的过程中能产生粗细不一的根状菌索,天气潮湿时在病变根部长出子实体。该病菌
主要通过根系接触,借根状菌索蔓延而传播,也能借子实体产生的担孢子经过气传沉降到树桩切面或根
系伤口形成新的侵染源,再经过根系接触传播。该病菌的为害症状、形态特征、培养性状、致病性测定及
分子生物学信息是鉴定橡胶白根病菌的依据。详细资料参见附录A和附录B。
3 试剂与培养基
3.1 试剂
燕麦片、琼脂粉、蔗糖。
三烃甲基氨基甲烷盐酸盐、十六烷基三甲基溴化铵、聚乙烯吡咯烷酮、乙二胺四乙酸、蛋白酶 K、
冰醋酸、溴酚蓝、氯化钠、三氯甲烷、异戊醇、异丙醇、DNA相对分子质量 Marker、溴化乙锭、次氯酸钠。
10×PCR缓冲液、氯化镁、dNTP、TaqDNA聚合酶、PCR引物、琼脂糖。
3.2 培养基
病菌分离和纯化采用燕麦琼脂培养基(见附录C)。
燕麦琼脂平板:将灭菌燕麦琼脂培养基熔化后倒入灭菌的培养皿中,形成2mm~3mm厚的平板。
燕麦琼脂斜面:将2mL~4mL燕麦琼脂培养基装入试管中,灭菌后,立即将试......
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