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| 标准编号 | SN/T 3448-2012 (SN/T3448-2012) | | 中文名称 | 桃树黄化植原体检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of peach yellows phytoplasma | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 字数估计 | 13,166 | | 标准依据 | 国质检认(2012)777号;行业标准备案公告2013年第4号(总第160号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了桃树黄化植原体的检疫和鉴定方法。本标准适用于进出境桃树苗木及接穗中桃树黄化植原体的检疫和鉴定。 |
SN/T 3448-2012
Detection and identification of peach yellows phytoplasma
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
桃树黄化植原体检疫鉴定方法
2012-12-12发布
2013-07-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国宁夏出入境检验检疫局、中华人民共
和国辽宁出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:牟海青、陈林、李萍、杨毅、赵文军、朱水芳、王有福。
桃树黄化植原体检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了桃树黄化植原体的检疫和鉴定方法。
本标准适用于进出境桃树苗木及接穗中桃树黄化植原体的检疫和鉴定。
2 原理
2.1 基本信息
ma),16SrⅠ植原体组。
2.2 方法原理
植原体的生物学特性和基因序列等分子生物学信息是该检疫鉴定方法的依据。
DAPI作为一种初步筛选植原体的方法;PCR技术灵敏度高、特异性好,RFLP技术目前是国际上
植原体鉴定分类的主要方法,在本标准中PCR技术与RFLP技术结合作为鉴定桃树黄化植原体的最终
方法。
3 器材和试剂
PCR仪、超净工作台、灭菌锅、制冰机、核酸蛋白分析仪、高速冷冻离心机,台式小型离心机、超低温
冰箱、冰箱、旋涡振荡器、微量进样器、电泳仪、凝胶成像系统、荧光显微镜、电子显微镜。
DAPI(4′,6-二脒基-2-苯基吲哚)、PCR缓冲液、MgCl2、dNTP、TaqDNA聚合酶、引物等。
4 检测鉴定方法
4.1 症状观察
仔细观察桃树种苗、叶片等,症状描述参见附录A的A.1。
4.2 DAPI染色
选取幼嫩组织(新叶叶梗,枝梢,茎杆及根部韧皮部组织),切片,用1μg/mLDAPI溶液(4′,6-二脒
基-2-苯基吲哚)染色,在460nm激发条件,荧光显微镜观察,在韧皮部筛管部位有明显的蓝色荧光信号
表明有植原体存在。因植株内植......
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