[PDF] SN/T 5171-2019 - 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| SN/T 5171-2019 | 280 | SN/T 5171-2019 | 9秒内发货PDF | 出口植物源性食品中去甲乌药碱的测定 液相色谱-质谱/质谱法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | SN/T 5171-2019 (SN/T5171-2019) |
| 中文名称 | 出口植物源性食品中去甲乌药碱的测定 液相色谱-质谱/质谱法 |
| 英文名称 | Determination of higenamine in plant-origin foodstuffs for export -- LC-MS / MS method |
| 行业 | 商检行业标准 (推荐) |
| 中标分类 | C53 |
| 国际标准分类 | 67.050 |
| 字数估计 | 8,821 |
| 发布日期 | 2019 |
| 实施日期 | 2020-05-01 |
| 发布机构 | 海关总署 |
SN/T 5171-2019
(Determination of norcoline in plant-derived food for export.Liquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry)
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
出口植物源性食品中去甲乌药碱的测定 液相色谱 - 质谱/质谱法
Determination of higenamine in plant-origin foodstuffs for export-
LC-MS/MS method
2019-10-25 发布
2020-05-01 实施
中 华 人 民 共 和 国 海 关 总 署 发 布
ICS 67.050
C 53
前言
本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。
本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国武汉海关、湖北省体育科学研究所、湖北省食品质量安全监
督检验研究院、中华人民共和国南京海关。
本标准主要起草人：王晗、赵晓亚、汤一铸、王鹏、张莉、高玲、叶诚、罗静、王振华。
出口植物源性食品中去甲乌药碱的测定
液相色谱 - 质谱/质谱法
1 范围
本标准规定了出口植物源食品中去甲乌药碱残留量的液相色谱 - 质谱/质谱的测定方法。
本标准适用于白菜、火龙果、橙子、花生、辣椒、川芎中去甲乌药碱残留量的测定，其他食品
也可参照使用。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 方法提要
试样加入 0.5% 甲酸乙醇溶液提取，提取液经分散固相萃取法净化，液相色谱 - 质谱/质谱
仪测定，内标法定量。
4 试剂和材料
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。
4.1 甲酸（HCOOH，CAS 号：64-18-6）。
4.2 乙醇（C2H5OH，CAS 号：64-17-5）：色谱纯。
4.3 甲醇（CH3OH，CAS 号：67-56-1）：色谱纯。
4.4 乙酸铵（CH3COONH4，CAS 号：631-61-8）。
4.5 无水硫酸镁（MgSO4，CAS 号：7487-88-9）。
4.6 去甲乌药碱标准物质（C16H17NO3，CAS 号：5843-65-2）：纯度大于等于 99%。
4.7 非诺特罗标准物质（C17H21NO4，CAS 号：13392-18-2）：纯度大于等于 99%。
4.8 0.5% 甲酸乙醇溶液：移取 1.0 mL 甲酸（4.1），用乙醇（4.2）定容至 200 mL，混匀。
4.9 0.1% 甲酸甲醇溶液：移取 1.0 mL 甲酸（4.1），用甲醇（4.3）定容至 1 000 mL，混匀。
4.10 0.1% 甲酸 -0.5 mmol/L 乙酸铵水溶液：称取 0.038 5 g 乙酸铵（4.4），用水溶解，向其中加入 1.0 mL
甲酸（4.1），定容至 1 000 mL，混匀。
4.11 去甲乌药碱标准储备液：称取适量去甲乌药碱标准物质（4.6）（精确至 0.000 1 g），用甲醇（4.3）
溶解，配制成浓度为 1.0 mg/mL 的标准储备液，于 -18 ℃以下避光保存。
4.12 非诺特罗标准储备液：称取适量非诺特罗标准物质（4.7）（精确至 0.000 1 g），用甲醇（4.3）
溶解，配制成浓度为 1.0 mg/mL 的标准储备液，于 -18 ℃以下避光保存。
4.13 去甲乌药碱标准中间液：准确移取 1.0 mL 去甲乌药碱标准储备液（4.11）于 100 mL 容量瓶中，
用甲醇（4.3）定容至刻度，配制成浓度为 10 μg/mL 的标准中间液，于 -18 ℃冰箱内储存。
4.14 非诺特罗内标中间液：准确移取 1.0 mL 非诺特罗标准储备液（4.12）于 100 mL 容量瓶中，用甲
醇（4.3）定容至刻度，配制成浓度为 10 μg/mL 的内标中间溶液，于 -18 ℃冰箱内储存。
4.15 标准工作溶液：准确移取适量去甲乌药碱标准中间液（4.13）和非诺特罗内标中间液（4.14），
用初始流动相稀释成去甲乌药碱浓度分别为 3.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、30 ng/mL、50 ng/mL 的
系列标准溶液，并保证各标准溶液中非诺特罗内标浓度为 10 ng/mL。
4.16 乙二胺 -N- 丙基硅烷化硅胶（PSA）： 40 μm~60 μm。
4.17 十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：40 μm~60 μm。
4.18 石墨化碳黑（GCB）：40 μm~60 μm。
4.19 微孔滤膜：有机系，0.22 μm。
5 仪器和设备
5.1 液相色谱 - 质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
5.2 组织捣碎机。
5.3 振荡器。
5.4 涡旋混合器。
5.5 电子分析天平：感量为 0.000 1 g 和 0.01 g。
5.6 离心机：转速不低于 8 000 r/min。
5.7 氮气吹干仪。
6 试样制备与保存
蔬菜、水果及药用植物的取样部位按照 GB 2763 的规定执行，取样品 500 g，用组织捣碎机均质，
充分混匀，均分为 2 份，密封并标明标记，于 -18 ℃条件下保存。
坚果样品去壳取全果 500 g，用组织捣碎机均质，充分混匀，均分为 2 份，密封并标明标记，于
0 ℃~4 ℃条件下保存。
调味料样品去柄、去根取全果或整棵 500 g，用组织捣碎机均质，充分混匀，均分为 2 份，密封
并标明标记，于 0 ℃~4 ℃条件下保存。
7 测定步骤
7.1 提取
称取约 2 g 试样（精确至 0.01 g）置于 50 mL 离心管中，加入 20 μL 非诺特罗内标中间液（4.14），
加入 20 mL 0.5% 甲酸乙醇溶液（4.8），涡旋混匀，振荡提取 30 min，以 8 000 r/min 的转速离心 5
min，待净化。
7.2 净化
取 2 mL 7.1 中的待净化上清液于 10 mL 净化管中，加入 50 mg PSA（4.16）、50 mg C18（4.17）、7.5 mg
GCB（4.18）和 150 mg 无水硫酸镁（4.5），涡旋混合，以 8 000 r/min 的转速离心 5 min，取上清液过
微孔滤膜（4.19），供液相色谱 - 质谱/质谱仪测定。
7.3 测定
7.3.1 液相色谱条件
7.3.1.1 色谱柱：C18 色谱柱，100 mm×3.0 mm（内径），粒径 3.5 μm 或性能相当者。
7.3.1.2 柱温：30℃。
7.3.1.3 流动相：A 为 0.1% 甲酸 - 0.5 mmol/L 乙酸铵水溶液（4.10），B 为 0.1% 甲酸甲醇溶液（4.9），
梯度洗脱，洗脱程序见表 1。
表 1 液相色谱的梯度洗脱程序
时间/min 流动相 A/% 流动相 B/%
0.00 95 5
2.00 95 5
3.00 45 55
5.00 45 55
6.00 5 95
8.00 5 95
8.10 95 5
10.00 95 5
7.3.1.4 流速：0.4 mL/min。
7.3.1.5 进样量：5 μL。
7.3.2 质谱条件
7.3.2.1 离子源：电喷雾离子源（ESI）。
7.3.2.2 扫描方式：正离子扫描。
7.3.2.3 检测方式：多反应监测模式（MRM）。
7.3.2.4 监测离子对、定量离子对见表 2。
表 2 去甲乌药碱的监测离子对、定量离子对和非诺特罗的定量离子对
被测物 监测离子对（m/z） 定量离子对（m/z）
去甲乌药碱
272.0/107.0
272.0/255.0
272.0/107.0
非诺特罗 - 304.2/135.3
7.3.2.5 雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气及其他适合气体，使用前应调节各气体流
量以使质谱灵敏度达到检测要求，喷雾电压、去簇电压、碰撞气能量等参数值应优化至最佳灵敏度，
其他参考质谱参数参见附录 A。
7.3.3 液相色谱 - 质谱/质谱测定
7.3.3.1 定性测定
按照液相色谱 - 质谱/质谱条件测定试样和标准工作液，试样中目标化合物的保留时间与标准工
作液中对应化合物的保留时间偏差在 ±2.5% 之内；定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作液
的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表 3 的规定，且每个离子的信噪比均≥ 3，则可判断试样中存
在相应的被测物。
表 3 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度/% >50 20~50（含） 10~20（含） ≤ 10
允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50
7.3.3.2 定量测定
将标准工作液和试样溶液依次注入液相色谱 - 质谱/质谱仪中，测得定量离子峰面积。标准工作
液和待测液中，去甲乌药碱和非诺特罗的响应值均应在仪器检测的定量线性范围内。在上述仪器条件
下，去甲乌药碱的提取离子色谱图参见附录 B。
7.4 空白试验
除不加试样外，均按上述测定条件和步骤进行。
8 结果计算和表述
采用标准工作曲线定量，试样中去甲乌药碱的含量由液相色谱 - 质谱/质谱仪的数据处理软件或
按式（1）计算，计算结果应扣除空白值。
（1）
式中：
X--试样中被测组分含量，单位为微克每千克（μg/kg）；
c --从基质标准工作曲线得到的样液中被测组分溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
V--提取液体积，单位为毫升（mL）；
m--试样质量，单位为克（g）；
f --稀释因子。
注：结果保留 3 位有效数字。
9 检出限、定量限和回收率
9.1 检出限和定量限
白菜、火龙果、橙子、花生、辣椒、川芎中去甲乌药碱的检出限为 10.0 μg/kg，定量限为 30.0 μg/kg。
9.2 回收率
白菜、火龙果、橙子、花生、辣椒、川芎中去甲乌药碱的添加水平和回收率数据参见附录 C。
附 录 A
（资料性附录）
a 质谱参考参数 1）
A.1 电喷雾电压（IS）：4 500 V。
A.2 离子源温度（TEM）：320 ℃。
A.3 气帘气压力（CUR，kPa）：241 （氮气）。
A.4 雾化气压力（GS1，kPa）：413 （氮气）。
A.5 辅助气压力（GS2，kPa）：344 （氮气）。
A.6 碰撞气能量（CE）、去簇电压（DP）见表 A.1。
1） 非商业性声明：本标准中所列参数是在 AB SCIEX 6500 质谱仪完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提
供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号仪器。
表 A.1 去甲乌药碱和非诺特罗主要参考质谱参数
名称 母离子（m/z） 子离子（m/z） 扫描模式 去簇电压（DP）/V 碰撞气能量（CE）/eV
去甲乌药碱 272.0
107.0*
ESI+
40 30
255.0 40 20
非诺特罗 304.2 135.3 ESI+ 40 30
注：* 表示定量离子对。
附 录 B
（资料性附录）
标准物质的提取离子色谱图
图 B.1 去甲乌药碱的提取离子色谱图（3.0 ng/mL）
图 B.2 非诺特罗的提取离子色谱图（10.0 ng/mL）
a） b）
附录 C
（资料性附录）
添加水平及回收率数据
表 C.1 去甲乌药碱在典型基质中的添加水平及其回收率
化合物 样品基质 添加浓度/（μg/kg） 回收率/% 相对标准偏差/%
去甲乌药碱
白菜
30.......