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| 标准编号 | WS/T 489-2016 (WS/T489-2016) | | 中文名称 | 尿路感染临床微生物实验室诊断 | | 英文名称 | Laboratory diagnosis of urinary tract infections | | 行业 | 卫生行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C50 | | 国际标准分类 | 11.020 | | 字数估计 | 12,159 | | 发布日期 | 2016-07-07 | | 实施日期 | 2016-12-15 | | 标准依据 | 国卫通(2016)9号;行业标准备案公告2016年第11号(总第203号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | | 范围 | 本标准规定了尿液标本临床微生物检验的技术要求。本标准适用于开展尿液标本细菌培养、鉴定和药物敏感性试验的徽生物实验室。 |
WS/T 489-2016: 尿路感染临床微生物实验室诊断
WS/T 489-2016 英文名称: Laboratory diagnosis of urinary tract infections
ICS 11.020C50
中华人民共和国卫生行业标准
WS/T489-2016
尿路感染临床微生物实验室诊断
1 范围
本标准规定了尿液标本临床微生物检验的技术要求。
本标准适用于开展尿液标本细菌培养、鉴定和药物敏感性试验的微生物实验室。
5 标本运送
尿液标本应尽快送到实验室,若不能及时送达,应4℃冷藏或添加防腐剂(含0.5mL的硼酸-甘油
或硼酸-甲酸钠),但均不能超过24h。加入防腐剂的尿液标本,至少采集3mL尿液量,以避免高浓度
的防腐剂对致病微生物产生抑制或稀释作用。
6 标本接收
收集尿液容器为广口的无菌防漏容器,收到尿液标本后应立即接种。冷藏的标本不能用于淋病奈瑟菌培养。
7 标本拒收
7.1 不合格标本处理
收到不合格标本,应与临床医师联系,注明拒收的原因并退回,可要求重新留取标本,并做记录。若
不合格不能重新留取尿液而需培养时,应在报告中注明,并强调此培养结果仅供参考。
7.2 标本拒收的情况
标本拒收的情况包括:
a) 标本标识与申请单不符,标识错误或没有标识;
b) 未提供采集时间及采集方法;
c) 标本采集时间超过2h而未4℃冷藏或添加防腐剂;
d) 标本4℃冷藏或添加防腐剂但已超过24h;
e) 连续收集24h的尿液标本;
f) 导尿管尖端培养;
g) 标本取自导尿患者尿袋;
h) 标本送检时容器有渗漏;
i) 除耻骨上膀胱穿刺法外,采用其他方法采集标本申请做厌氧菌培养。
8 实验室检查
8.1 尿常规(与尿路感染相关指标)
8.1.1 白细胞酯酶
正常值为阴性,尿路感染时为阳性。
8.1.2 亚硝酸盐
正常值为阴性。阳性常见于大肠埃希菌等革兰阴性杆菌引起的尿路感染,阳性反应程度与尿液中
细菌的数量成正比。
8.1.3 尿蛋白
正常定性为阴性,定量<100mg/24h。尿路感染可有蛋白尿。
8.2 尿沉渣检查(与尿路感染相关指标)
8.2.1 人工检查
炎症,其数量常与严重程度密切相关。
8.2.2 仪器检查
尿液分析仪主要有2大类:影像式尿液有形成分分析仪,流式细胞术和电阻抗检测相结合的全自动
尿有形成分分析仪。白细胞计数大于仪器正常参考区间,同时伴有上皮细胞增多提示尿路感染。但应
人工检查排除干扰因素。
8.3 革兰染色镜检
观察有无细菌、多形核白细胞和扁平上皮细胞。女性尿液标本中如果存在许多扁平上皮细胞,提示
标本很可能受到阴道分泌物污染,应重新送检。该方法适用于筛查有较高的菌落计数患者、大部分无症
状患者以及患有肾盂肾炎的患者。为了提高在104CFU/mL水平的敏感度,推荐细胞离心涂片后再革
兰染色镜检。当革兰染色阳性时,与菌尿症相关,并且可以根据细菌形态和染色特性,帮助临床经验治疗选择抗菌药物。
8.4 尿培养
8.4.1 培养类型选择:如何接种培养尿液标本,取决于标本的采集方法、患者的症状和临床指征。尿液
标本接种要求实验室收集必要的信息,包括尿液采集方法、患者的类型(例如:泌尿科或老年病科)、临床
症状、尿液常规镜检分析结果以及既往培养结果,以选择相应的培养类型,见表1。
8.5 接种方法
8.5.1 轻摇混匀尿液,将定量接种环垂直浸入尿液标本表面下3mm~5mm,将标本吸至环中。
8.5.2 在血琼脂平板上划十字,再进行密集均匀涂布。
8.5.3 除接种至血平板进行定量外,还需分区划线接种至麦康凯或中国蓝琼脂平板进行菌株筛查。
8.6 病原菌同源性检测
病原菌同源性检测可协助诊断多次尿道感染的患者为复发性感染还是再发性感染(如患有反复尿
道感染的女性),也可用于检测不同患者感染同一细菌克隆的情况(如可疑医院感染或社区内暴发流
行)。常用的基因分型方法包括脉冲场凝胶电泳、核酸分型、多位点酶电泳、普通PCR或多重PCR分型方法。
9 抗菌药物敏感试验
9.1 抗菌药物敏感试验
对菌落计数结果有意义的临床分离菌株,鉴定到种水平并进行标准抗菌药物敏感试验,可采用微量
肉汤稀释法、纸片扩散法、Etest法或自动化药敏分析仪等。
9.2 直接抗菌药物敏感试验
直接抗菌药物敏感试验仅适用于细菌计数≥105CFU/mL的纯培养菌,其目的是缩短报告时间,减
少患者医疗花费。但需注意,该方法缺乏标准化程序,不建议作为常规药敏试验方法;不能用于混合细
菌生长的标本;不适用于细菌计数<105CFU/mL的标本;由微生物实验室自行解释药敏试验结果。
10 结果解释
10.1 总述
采用1μL接种量,计数结果为平板菌落数×103CFU/mL;采用10μL接种量,计数结果为平板菌落数×102CFU/mL。建议临床医师结合尿常规结果分析尿培养结果的临床意义。
10.2 一般解释
清洁中段尿定量培养后,单种细菌菌落数>105CFU/mL可能为感染;<104CFU/mL可能为污
染,104CFU/mL~105CFU/mL需要根据患者的临床表现进行评估,大部分肾盂肾炎和膀胱炎可以根据这
些参数正确地予以判断。对于复杂性尿道感染可多次送检。连续3次清洁中段晨尿培养>105CFU/mL
高度怀疑尿路感染。
10.3 不同类型尿培养的解释
不同感染类型的清洁中段尿定量培养结果相应的解释,分别见表2和表3;侵入性采集标本培养结
果解释见表4。
10.4 特殊细菌感染的解释
10.4.1 采用特殊培养基并延长培养时间后分离出大量的尿道或阴道的正常菌群时,包括棒杆菌属、阴
道加德纳菌、流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌等,可能与尿道感染相关。
严重免疫缺陷、泌尿道侵入性操作或长期住院的老年患者,并与肾盂肾炎有关,且在无抗菌药物治疗情况下可自动消失。
10.4.5 很少引起尿路感染的细菌:厌氧菌、放线杆菌属、乳杆菌属、α-溶血链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌
(年轻女性尿标本分离腐生葡萄球菌除外)、棒杆菌属和一些不常见革兰阴性杆菌。
11 报告结果
11.1 阴性结果
培养48h无菌生长,应报告“接种1μL尿液,培养48h无菌生长(<103CFU/mL,......
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