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[PDF] GB 29989-2013 - 自动发货, 英文版

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GB 29989-2013 英文版 70 GB 29989-2013 3分钟内自动发货[PDF] 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定 有效
基本信息
标准编号 GB 29989-2013 (GB29989-2013)
中文名称 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
英文名称 Determination of L-carnitine in infant foods and dairy products
行业 国家标准
中标分类 C53
国际标准分类 67.020
字数估计 7,753
标准依据 国家卫计委公告2013年第7号
发布机构 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
范围 本标准规定了婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定。

GB 29989-2013: 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定 GB 29989-2013 英文名称: Determination of L-carnitine in infant foods and dairy products 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定 1 范围 本标准规定了婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定方法。 本标准适用于婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定。 2 原理 试样经过水提取,用高氯酸沉淀蛋白质后过滤。滤液经碱皂化后使溶液中结合态的左旋肉碱游离 出来。左旋肉碱与乙酰辅酶 A在乙酰肉碱转移酶的催化下反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶 A。游离的 辅酶 A和 2-硝基苯甲酸反应生成黄色物质,其颜色深浅与游离的辅酶 A含量成正比。因游离的辅酶 A 与左旋肉碱是等摩尔反应关系,可间接求出试样中左旋肉碱含量。 3 试剂和材料 注:除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682规定的三级水。 3.1 试剂 3.1.1 高氯酸(HClO4)。 3.1.2 氢氧化钠(NaOH) 。 3.1.3 氢氧化钾(KOH) 。 3.1.4 2-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)。 3.1.5 N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(C8H18N2O4S)。 3.1.6 乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na2·2H2O)。 3.1.7 乙酰辅酶 A(AcetylCoA):在 2℃~8℃保存。 3.1.8 乙酰肉碱转移酶(CAT):在 2℃~8℃保存。 3.2 试剂配制 3.2.1 高氯酸溶液(13%):13 mL高氯酸稀释至 100 mL。 3.2.2 氢氧化钠溶液(10 mol/L):称取 40 g氢氧化钠用水溶解,冷却后稀释至 100 mL。 3.2.3 氢氧化钾溶液(4.0 mol/L):称取 22.4 g氢氧化钾用水溶解,冷却后稀释至 100 mL。 3.2.4 显色储备液:分别称取 50 mg 2-硝基苯甲酸、5.96 g N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、185 mg 乙二胺四乙酸二钠溶于 30 mL去离子水中,用 10 mol/L NaOH溶液调 pH至 7.4~7.6,然后用水定容 至 50 mL。此液置于 4℃冰箱中可保存 3个月。 3.2.5 显色工作液:吸取 5.0 mL显色储备液用水定容至 25 mL。 3.2.6 乙酰辅酶 A(AcetylCoA)溶液:称取 20.0 mg乙酰辅酶 A溶于 2.0 mL水中。临用时配制。 3.2.7 乙酰肉碱转移酶(CAT)溶液:吸取 100 µL乙酰肉碱转移酶悬浮液,经 1500 r/min离心 10 min, 弃去上层清液,沉淀用 2 mL水溶解。临用时配制。 3.3 标准品 左旋肉碱标准品(C7H15NO3):纯度≥98%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 左旋肉碱标准储备液(80 µg/mL):准确称取 20 mg(精确 0.0001g)于 102℃±2℃烘箱中烘 2 h的左旋肉碱,用水定容至 250 mL容量瓶中。此液置于 4℃冰箱中可保存 1个月。 3.4.2 左旋肉碱标准工作液:分别吸取左旋肉碱标准储备液 0.5 mL、1 mL、2 mL、3 mL、5 mL于 25 mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀。此溶液仅限于当天使用。 4 仪器和设备 4.1 分析天平:感量 0.1 mg。 4.2 pH计:精度 0.01。 4.3 离心机:转速≥1500 r/min。 4.4 恒温水浴锅:温度可控制在 40℃±2℃。 4.5 分光光度计。 5 分析步骤 5.1 试样处理 准确称取 5 g(精确 0.0001g)混合均匀的试样于烧杯中,用 30 mL40℃温水溶解,转入 100 mL 容量瓶中。加入 10 mL13%高氯酸溶液,混合均匀后静止 20 min。用蒸馏水定容至刻度,混匀,用定 量滤纸过滤。 取滤液 20 mL,用 4 mol/L氢氧化钾溶液调 pH为 12.5~13.0后,置于 40˚C水浴 60 min。冷却后 用 13%高氯酸调 pH为 7.0~7.5。将样液转入 50 mL容量瓶中,用蒸馏水定容。混匀后置于 4℃冰箱中 过夜。将试样处理液从冰箱中取出放置至室温,取上清液用 0.45 µm滤膜过滤后备用。 5.2 标准曲线的绘制 吸取左旋肉碱标准工作液 2.0 mL于 1 cm比色皿中,加入 0.8 mL显色工作液和 100 µL乙酰辅酶 A溶液,盖上比......

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