标准搜索结果: 'GB 31613.5-2022'
| 标准编号 | GB 31613.5-2022 (GB31613.5-2022) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 鸡可食性组织中抗球虫药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 | | 英文名称 | (National food safety standards-Determination of anticoccidial drug residues in chicken edible tissues-liquid chromatography-tandem mass spectrometry) | | 行业 | 国家标准 | | 字数估计 | 11,139 | | 发布日期 | 2022-09-20 | | 实施日期 | 2023-02-01 | GB 31613.5-2022: 食品安全国家标准 鸡可食性组织中抗球虫药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
GB 31613.5-2022 英文名称: (National food safety standards-Determination of anticoccidial drug residues in chicken edible tissues-liquid chromatography-tandem mass spectrometry)
中华人民共和国国家卫生健康委员会
食品安全国家标准
鸡可食组织中抗球虫药物残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
中华人民共和国国家标准
发 布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中华人民共和国农业农村部
前 言
本文件按照 GB/T １１-２０２０«标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定
起草.
本文件系首次发布.
食品安全国家标准
鸡可食组织中抗球虫药物残留量的测定 液相色谱Ｇ串联质谱法
１ 范围
本文件规定了鸡可食组织中常山酮、氯苯胍、盐霉素、莫能菌素、甲基盐霉素、马度米星铵和拉沙洛西
７种抗球虫药物残留量检测的制样和液相色谱Ｇ串联质谱测定方法.
本文件适用于鸡肌肉、肝脏和皮脂(皮＋脂)中常山酮、氯苯胍、盐霉素、莫能菌素、甲基盐霉素、马度米
星铵和拉沙洛西７种抗球虫药物残留量的检测.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试样中残留的抗球虫药物经胰蛋白酶酶解,乙酸乙酯提取,固相萃取柱净化,液相色谱Ｇ串联质谱法检
测,基质匹配外标法定量.
５ 试剂与材料
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５１ 试剂
５１１ 甲醇(CH３OH):色谱纯.
５１２ 乙腈(CH３CN):色谱纯.
５１３ 乙酸(CH３COOH):色谱纯.
５１４ 甲酸(HCOOH):色谱纯.
５１５ 乙酸乙酯(CH３CH２OOCCH３):色谱纯.
５１６ 胰蛋白酶:来源于牛胰腺,≥１００００U/mg.
５１７ 碳酸钠(Na２CO３).
５２ 溶液配制
５２１ １０％碳酸钠溶液:取碳酸钠２０g,加水适量使溶解并稀释至２００mL,混匀.
５２２ １％乙酸溶液:取乙酸１mL,用水稀释至１００mL,混匀.
５２３ ２０％甲醇溶液:取甲醇２０mL,用水稀释至１００mL,混匀.
５２４ 洗脱液:取甲醇１００mL,加乙酸乙酯２００mL,混匀.
５２５ 复溶液:取甲醇５０mL,加水５０mL、甲酸０１mL,混匀.
５３ 标准品
常山酮、氯苯胍、盐霉素、莫能菌素、甲基盐霉素、马度米星铵、拉沙洛西含量≥９５％.具体见附录A.
５４ 标准溶液制备
５４１ 标准储备液(１mg/mL):取常山酮、氯苯胍、盐霉素、莫能菌素、甲基盐霉素、马度米星铵、拉沙洛
西标准品适量(相当于各有效成分１０mg),精密称定,分别加甲醇适量使溶解并稀释定容于１０mL容量
瓶,配制成浓度均为１mg/mL的标准储备液.-１８℃以下避光保存,有效期６个月.
５４２ 混合标准工作液(１０μg/mL):分别精密量取标准储备液各０１mL,于１０mL容量瓶中,用甲醇稀
释至刻度,配制成浓度为１０μg/mL的混合标准工作液.-１８℃以下避光保存,有效期６个月.
５４３ 混合标准工作液(１μg/mL):精密量取１０μg/mL的混合标准工作液１mL,于１０mL容量瓶中,
用甲醇稀释至刻度,配制成浓度为１μg/mL的混合标准工作液.-１８℃以下避光保存,有效期３个月.
５４４ 混合标准工作液(０１μg/mL):精密量取１μg/mL的混合标准工作液１mL,于１０mL容量瓶中,用
甲醇稀释至刻度,配制成浓度为０１μg/mL的混合标准工作液.-１８℃以下避光保存,有效期１个月.
５５ 材料
５５１ 三键键合C１８固相萃取柱:５００mg/６mL,或相当者.
５５２ 尼龙微孔滤膜:０２２μm.
６ 仪器和设备
６１ 液相色谱Ｇ串联质谱仪:配电喷雾离子源.
６２ 分析天平:感量００１g和０００００１g.
６３ 高速冷冻离心机:１００００r/min.
６４ 组织匀浆机.
６５ 涡旋混合器.
６６ 固相萃取装置.
６７ 氮吹仪.
６８ 水浴摇床.
６９ pH计.
７ 试样的制备与保存
７１ 试样的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,绞碎并均质.
a) 取均质后的供试样品,作为供试试样;
b) 取均质后的空白样品,作为空白试样;
c) 取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试样.
７２ 试样的保存
-１８℃以下保存.
８ 测定步骤
８１ 提取
称取试料１g(准确至±００１g),加胰蛋白酶２５mg、水５mL,涡旋１min,用１０％碳酸钠溶液调pH
至７５,４０℃水浴过夜酶解.取出放至室温,加１０％碳酸钠溶液１mL,涡旋１min.加乙酸乙酯９mL,涡
旋５min,于４℃、１００００r/min离心１０min,转移上清液,残渣重复提取１次.合并２次提取液,用乙酸乙
酯稀释至２００mL,混匀.取提取液２０mL于３５℃水浴氮气吹干,加乙腈１mL涡旋１min,加水
１０mL,混匀,备用.
８２ 净化
固相萃取柱依次用甲醇５mL、１％乙酸溶液５mL活化,取备用液全部过柱,控制流速为每２s~３s
GB ３１６１３５-２０２２
１滴.用１％乙酸溶液３mL和２０％甲醇溶液３mL淋洗,用洗脱液１０mL洗脱.收集洗脱液,３５℃水浴
氮气吹干,加复溶液１０mL涡旋１min,于-４℃、１００００r/min离心１０min,取上清液,过滤膜后供液相
色谱Ｇ串联质谱测定.
８３ 基质匹配标准曲线的制备
取６份空白样品经提取和净化后,加入适量的标准工作液,３５℃水浴氮气吹干,加复溶液１０mL涡
旋１min,配制成浓度为０５μg/L、１μg/L、５μg/L、１０μg/L、２５μg/L和５０μg/L的基质匹配标准溶液,
于-４℃、１００００r/min离心１０min,取上清液,过滤膜后供液相色谱Ｇ串联质谱测定.以测得特征离子峰
面积为纵坐标、对应的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线,求回归方程和相关系数.
８４ 测定
８４１ 液相色谱参考条件
色谱柱:C１８(５０mm×２１mm,１７μm),或相当者;
流动相:A为０１％甲酸水溶液,B为０１％甲酸甲醇溶液;
梯度洗脱:梯度洗脱程序见表１;
流速:０３mL/min;
柱温:３０℃;
进样量:１０μL.
８４２ 质谱参考条件
a) 离子源:电喷雾(ESI)离子源;
b) 扫描方式:正离子扫描;
c) 检测方式:多反应监测;
d) 电离电压:４０kV;
e) 离子源温度:１００℃;
f) 雾化温度:３５０℃;
g) 锥孔气流速:３０L/h;
h) 雾化气流速:６００L/h;
i) 待测药物的定性离子对、定量离子对、锥孔电压和碰撞能量的参考值见表２.
８４３ 测定法
８４３１ 定性测定
在同样测试条件下,试料溶液中抗球虫药物的保留时间与基质匹配标准工作液中抗球虫药物的保留
时间之比,偏差在±２５％以内,且检测到的相对离子丰度,应当与浓度相当的基质匹配标准溶液相对离子
丰度一致.其允许偏差应符合表３的要求.
８４３２ 定量测定
取试料溶液和基质匹配标准工作液,作单点或多点校准,按外标法定量.基质匹配标准工作液及试料
溶液中目标物的响应值均应在仪器检测的线性范围内.在上述色谱Ｇ质谱条件下,标准溶液特征离子质量
色谱图见附录B.
８５......
|