路径: 主页 > GB > 第29页 > GB 31658.15-2021 | 标准编号 | GB 31658.15-2021 (GB31658.15-2021) | | 中文名称 | | | 英文名称 | National food safety standard - Determination of xylazine and metabolite(2, 6-dimethylaniline)in animal derived food by Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometric method | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X04 | | 字数估计 | 8,822 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31658.15-2021: 食品安全国家标准 动物性食品中赛拉嗪及代谢物 2,6-二甲基苯胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
食品安全国家标准
动物性食品中赛拉嗪及代谢物2,6-二甲基
苯胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
中华人民共和国国家标准
中华人民共和国国家卫生健康委员会发布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中华人民共和国农业农村部
前言
本文件按照GB/T １.１-２０２０«标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定起草.
本文件系首次发布.
１ 范围
本文件规定了动物性食品中赛拉嗪及代谢物２,６-二甲基苯胺残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法.
本文件适用于猪、牛和羊肌肉、脂肪、肝脏和肾脏组织中赛拉嗪及２,６-二甲基苯胺残留量的检测.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试料中残留的赛拉嗪和２,６-二甲基苯胺,用乙腈或者氨水乙腈提取,乙腈饱和的正己烷萃取,净化,
液相色谱-串联质谱正离子模式测定,外标法定量.
５ 试剂和材料
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５.１ 试剂
５.１.１ 甲醇(CH３OH):色谱纯.
５.１.２ 乙腈(CH３CN):色谱纯.
５.１.３ 正己烷(C６H１４).
５.１.４ 氨水(NH３.H２O).
５.１.５ 甲酸(HCOOH).
５.１.６ 无水硫酸钠(Na２SO４).
５.２ 溶液配制
５.２.１ ５％氨水乙腈:取氨水５０mL,用乙腈稀释至１０００mL.
５.２.２ ２０％乙腈水溶液:取乙腈２０mL,用水稀释至１００mL.
５.２.３ ０.１％甲酸溶液:取甲酸１mL,用水稀释至１０００mL.
５.２.４ 乙腈饱和正己烷:取正己烷３０mL,加入乙腈５mL,涡旋混匀,振荡１０min,用分液漏斗分离,取上层液体.
５.３ 标准品
５.３.２ ２,６-二甲基苯胺[２,６-dimethylaniline,(CH３)２C６H３NH２,CAS号:８７-６２-７],含量≥９９.０％见附录A.
５.４ 标准溶液制备
５.４.１ 标准储备液:取盐酸赛拉嗪、２,６-二甲基苯胺标准品各１０mg,精密称定,分别加乙腈适量使溶解并稀释定容至１０mL容量瓶,摇匀,配制成浓度均为１mg/mL的赛拉嗪、２,６-二甲基苯胺标准储备液.-１８℃以下保存,有效期３个月.
５.４.２ 标准工作液:精密量取赛拉嗪、２,６-二甲基苯胺标准储备液各适量,分别于１０mL容量瓶中,用乙腈稀释至刻度,摇匀,分别配制成赛拉嗪浓度为０.４μg/mL、２,６-二甲基苯胺浓度为１μg/mL的标准工作液.２℃~８℃保存,现配现用.
５.５ 材料
滤膜:０.２２μm,水相.
６ 仪器和设备
６.１ 液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子源(ESI).
６.２ 分析天平:感量０.００００１g和０.０１g.
６.３ 均质机.
６.４ 涡旋混合器.
６.５ 振荡器.
６.６ 冷冻离心机.
６.７ 氮吹仪.
６.８ 超声仪.
７ 试料的制备与保存
７.１ 试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,并使均质.
a) 取均质的供试样品,作为供试试料;
b) 取均质的空白样品,作为空白试料;
c) 取均质的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试料.
７.２ 试料的保存
-２０℃以下保存.
８ 测定步骤
８.１ 提取
取试料５g(准确至±０.０２g),加无水硫酸钠２g、乙腈１０mL,涡旋混匀,振荡１０min,４ ℃、１００００r/min离心１０min(脂肪试料加５％氨水乙腈１０mL,于４℃、８０００r/min离心１min),取上清液,重复提取１次,合并２次上清液.４０℃氮气吹至近干,加乙腈１.０mL使溶解,涡旋混匀,备用.
８.２ 净化
取备用液,加乙腈饱和的正己烷０.５mL,涡旋混匀,４℃、１００００r/min离心５min,取下层溶液
２００μL,于５mL离心管中,加水８００μL,涡旋混匀,于４℃、１００００r/min离心５min,取溶液,过滤,供液相色谱-串联质谱测定.
８.３ 标准曲线的制备
精密量取赛拉嗪、２,６-二甲基苯胺的标准工作液适量,用２０％乙腈水溶液稀释,配制成赛拉嗪浓度为０ng/mL、０.２ng/mL、１ng/mL、５ng/mL、１０ng/mL、５０ng/mL、１００ng/mL,２,６-二甲基苯胺浓度为０ng/mL、５ng/mL、１０ng/mL、２０ng/mL、５０ng/mL、１００ng/mL的系列混合标准溶液,供液相色谱-串
联质谱测定,以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标、对应的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线,求回归方程和相关系数.
８.４ 测定
８.４.１ 色谱条件
a) 色谱柱:C１８(１００mm×２.１mm,３μm),或相当者;
b) 流动相:A为０.１％甲酸水溶液,B为乙腈;
c) 流速:０.３mL/min;
d) 进样量:５μL;
e) 柱温:３０℃;
f) 流动相梯度洗脱条件见表１.
８.５ 测定法
８.５.１ 定性测定
通过试样色谱图的保留时间与相应标准品的保留时间、各色谱峰的特征离子与相应浓度标准溶液各
色谱峰的特征离子相对照定性,试样与标准品保留时间的相对偏差不大于±２.５％;试样特征离子的相对丰度与浓度相当混合标准溶液的相对丰度一致,相对离子丰度偏差不超过表３的规定,则可判断试样中存在相应的被测物.
８.５.２ 定量测定
取试料溶液和标准溶液,按外标法以色谱峰面积定量,标准溶液及试料溶液中的赛拉嗪和２,６-二甲
基苯胺响应值均应在仪器检测的线性范围内.在上述色谱-质谱条件下,赛拉嗪和２.６-二甲基苯胺标准溶
液特征离子质量色谱图见附录B.
８.６ 空白试验
取空白试料,除不加标准溶液外,采用相同的测定步骤进行平行操作.
９ 结果计算和表述
试料中待测物的残留量按标准曲线或公式(１)计算.
１０ 检测方法的灵敏度、准确度和精密度
１０.１ 灵敏度
本方法赛拉嗪检测限为０.０６μg/kg......
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