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| 标准编号 | GB 4789.9-2025 (GB4789.9-2025) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验 | | 英文名称 | National food safety standard - Food microbiological examination - Examination of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | C53 | | 字数估计 | 16,191 | | 发布日期 | 2025-09-02 | | 发布机构 | National Health Commission; State Administration for Market Regulation | GB 4789.9-2025: 食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
食品微生物学检验
空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验
2025-09-02发布
2026-03-02实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局 发 布
前言
本标准代替GB 4789.9-2014《食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌检验》。
本标准与GB 4789.9-2014相比,主要变化如下:
---修改了标准的名称;
---修改了标准的范围;
---增加了实时荧光PCR鉴定方法和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定方法;
---修改了设备和材料、培养基和试剂、检验程序、操作步骤;
---修改了附录。
食品安全国家标准
食品微生物学检验
空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验
1 范围
验方法。
本标准适用于食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检验。
2 设备和材料
除微生物实验室常规灭菌、培养及分子检测设备外,其他设备和材料如下。
2.1 冰箱:2℃~8℃、-18℃~-20℃。
2.2 恒温培养箱:25℃±1℃、36℃±1℃、42℃±1℃。
2.3 拍击式均质器。
2.4 无菌带滤网均质袋。
2.5 电子天平:感量0.1g,感量0.01g,感量0.001g。
2.6 恒温水浴或金属浴装置:36℃~100℃。
2.7 振荡器。
2.8 无菌培养皿:直径60mm、90mm。
2.9 无菌亲水性滤膜:直径47mm,孔径0.45μm。
2.10 微需氧培养装置:提供微需氧条件(5%氧气、10%二氧化碳和85%氮气)。
2.11 显微镜:10×~1000×。
2.12 低温高速离心机:8000g~20000g,4℃。
2.13 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
2.14 实时荧光PCR仪。
2.15 实时荧光PCR反应管。
2.16 微量移液器及吸头:0.1μL~2.5μL、0.5μL~10μL、2μL~20μL、20μL~200μL、100μL~
1000μL。
2.17 无菌离心管:50mL、100mL或更大容量。
2.18 螺口管:10mL。
2.19 无菌接种环:1μL、10μL。
2.20 无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)。
2.21 微生物生化鉴定系统。
2.22 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOFMS)。
3 培养基和试剂
3.1 0.1%蛋白胨水:见附录A中A.1。
3.2 无菌生理盐水:见A.2。
3.3 弯曲菌增菌液:见A.3。
3.4 哥伦比亚血琼脂(Columbiabloodagar):见A.4。
3.5 卡玛丽血琼脂(Karmalibloodagar):见A.5。
3.6 氧化酶试剂:见A.6。
3.7 3%过氧化氢(H2O2)溶液:见A.7。
3.8 吲哚乙酸酯纸片:见A.8。
3.9 1mol/L硫代硫酸钠(Na2S2O3)溶液:见A.9。
3.10 马尿酸钠水解试剂:见A.10。
3.11 微生物生化鉴定试剂盒或微生物生化鉴定系统试剂。
3.12 实时荧光PCR检测试剂盒或检测试剂(2×实时荧光PCR缓冲溶液、dNTPs、TaqDNA聚合酶
和灭菌去离子水)。
3.13 空肠弯曲菌参比菌株[NPRC(S)01.13897]或其他等效菌株。
3.14 结肠弯曲菌参比菌株[NPRC(S)01.13898]或其他等效菌株。
3.16 海鸥弯曲菌(Campylobacterlari)参比菌株[NPRC(S)01.13900]或其他等效菌株。
4 检验程序
空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验程序见图1。
图1 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验程序
5 操作步骤
5.1 样品处理
5.1.1 一般样品
取25g(mL)样品[水果、蔬菜、水产品(贝类除外)取50g]加至装有100mL无菌0.1%蛋白胨水的
有滤网的均质袋中,用拍击式均质器均质1min~2min(或者充分揉搓、振荡5min~10min)后经滤网
过滤至离心管中,滤过液以12000g4℃离心15min后弃去上清(可多次离心富集),用1mL无菌生理
盐水重悬沉淀,取1......
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