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[PDF] GB 7300.501-2021 - 自动发货, 英文版

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GB 7300.501-2021 英文版 200 GB 7300.501-2021 3分钟内自动发货[PDF],有增值税发票。 饲料添加剂 第5部分:微生物 酿酒酵母 有效

基本信息
标准编号 GB 7300.501-2021 (GB7300.501-2021)
中文名称 饲料添加剂 第5部分:微生物 酿酒酵母
英文名称 Feed additives -- Part 5: Live microorganisms -- Saccharomyces cerevisiae
行业 国家标准
中标分类 B46
国际标准分类 65.120
字数估计 11,118
发布日期 2021-10-11
实施日期 2022-11-01
旧标准 (被替代) GB/T 22547-2008
归口单位 中华人民共和国农业农村部
标准依据 国家标准公告2021年第12号
提出机构 中华人民共和国农业农村部
发布机构 国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会

GB 7300.501-2021: 饲料添加剂 第5部分:微生物 酿酒酵母
GB 7300.501-2021 英文名称: Feed additives -- Part 5: Live microorganisms -- Saccharomyces cerevisiae
ICS 65.120
CCSB46
中华人民共和国国家标准
1 范围
本文件规定了饲料添加剂酿酒酵母产品的技术要求、取样、试验方法、检验规则、标签、包装、运输和贮存。
本文件适用于以酿酒酵母为菌种,经液态发酵、脱水干燥而制得的饲料添加剂酿酒酵母。
5 取样
5.1 采样原则
样品的采集应遵循随机性、代表性的原则,采样过程应遵循无菌操作程序,防止一切可能的外来污染。
5.2 采样方法
5.2.1 应在同一批次产品中采集样品,每件样品的采样量应满足微生物指标检验的要求,一般不少于500g。
5.2.2 独立包装小于、等于500g的产品,取完整包装。
5.2.3 独立包装大于500g的产品,应用无菌采样器从同一包装的不同部位分别采取适量样品,放入同
一个无菌采样容器内作为一件样品。
5.3 采集样品的贮存和运输
5.3.1 应尽快将样品送往实验室检验。
5.3.2 应在运输过程中保持样品完整。
5.3.3 应在接近原有贮存温度条件下贮存样品,或采取必要措施防止样品中微生物数量的变化。
6 试验方法除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂,水符合GB/T 6682中三级水的要求。
6.1 感官检验取适量试样置于干净白色纸片上,在自然光下观察其形态、色泽、有无杂质,嗅其气味。
6.2 菌种鉴别按附录A执行,以平板法为仲裁法。
6.3 酵母活细胞数按附录B执行。
6.4 水分按GB/T 6435执行。
6.5 总砷按GB/T 13079执行。
6.6 铅按GB/T 13080石墨炉原子吸收光谱法执行。
6.7 汞按GB/T 13081执行。
6.8 镉按GB/T 13082执行。
6.9 沙门氏菌按GB/T 13091执行。
7 检验规则
7.1 组批
以相同材料、相同的生产工艺,经连续生产或同一班次生产的同一规格的产品为一批,但每批产品不应超过50t。
7.2 出厂检验
外观与性状、酵母活细胞数、水分为出厂检验项目。
7.3 型式检验型式检验项目为本文件第4章规定的所有项目。在正常生产情况下,每年至少进行一次型式检验。
有下列情况之一时,亦应进行型式检验:
a) 产品定型投产时;
b) 生产工艺、配方或主要原料来源有较大改变,可能影响产品质量时;
c) 停产3个月以上,重新恢复生产时;
d) 出厂检验结果与上次型式检验结果有较大差异时;
e) 饲料行政管理部门提出检验要求时。
7.4 判定规则
7.4.1 所验项目全部合格,判定为该批次产品合格。
7.4.2 检验结果中有任何指标不符合本文件规定时,可自同批产品中重新加倍取样进行复检。复检结
果即使有一项指标不符合本文件规定,则判定该批产品不合格。沙门氏菌指标不得复检。
7.4.3 各项目指标的极限数值判定按GB/T 8170中全数值比较法执行。
8 标签、包装、运输和贮存
8.1 标签标签应符合GB 10648的规定。
8.2 包装包装材料应清洁卫生、并能防污染、防潮湿、防泄漏。
8.3 运输运输工具应清洁卫生、能防暴晒、防雨淋,不应与有毒有害的物品混装混运。
8.4 贮存室温贮存,仓库应通风、干燥、能防暴晒、防雨淋,有防虫、防鼠设施,不应与有毒有害的物质混贮。
附 录 A
(规范性)
酿酒酵母菌种鉴别方法
A.1 形态鉴别
A.1.1 培养基
A.1.1.1 麦芽汁液体培养基:麦芽汁加水稀释至10°Bx~15°Bx(巴林糖度计),115℃高压蒸汽灭菌15min。
A.1.1.2 麦芽汁琼脂培养基:麦芽汁加水稀释至10°Bx~15°Bx(巴林糖度计),加2%琼脂粉,115℃高压蒸汽灭菌15min。
A.1.1.3 产孢子培养基:葡萄糖0.1%,氯化钾0.18%,酵母汁0.25%,醋酸钠0.82%,琼脂2%,用蒸馏
水配制,装管,115℃高压蒸汽灭菌15min,搁置斜面。
A.1.1.4 马铃薯葡萄糖琼脂培养基:去皮马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20g,自来水1L。将马铃薯
洗净,去皮,切成小块,立即放入水中,以免被氧化。煮沸30min,经纱布过滤,滤液加水至1L,加入葡
萄糖和琼脂,溶解后分装三角瓶或试管,115℃高压蒸汽灭菌20min。
A.1.2 在麦芽汁液体培养基中的生长
28℃静置培养3天后,菌体在液体培养基中紧密沉淀于底部,培养液清亮,不形成菌膜。取少量菌
体于400倍显微镜下观察,细胞呈卵圆形或圆形,单个或成双,偶尔成簇状,细胞芽殖。细胞长与宽之比
为1~2,细胞大小分为大、中、小三型,大型细胞大小为(4.5μm~10μm)×(7.0μm~21μm),中型细胞
大小为(3.5μm~8μm)×(5.0μm~17.5μm),小型细胞大小为(2.5μm~7μm)×(4.5μm~11μm)。
A.1.3 在麦芽汁琼脂培养基上的生长
28℃培养3天后,菌落大而湿润,微隆起或平坦,乳白色,表面光滑无褶皱,边缘整齐。
A.1.4 在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上的生长
28℃培养3天后,在马铃薯琼脂培养基上生长,无假菌丝或是有比较发达但不典型的假菌丝。
A.1.5 在产孢子培养基上的生长
28℃培养3天后,能产生子囊孢子,每囊有1个~4个圆形光面的子囊孢子。
A.2 生理生化特性
在麦芽汁琼脂斜面上,于28℃±1℃,24h~48h培养,进行表A.1中的试验,以验证酿酒酵母生
理生化特性。
A.3 分子生物学鉴定
采用核酸序列分析法对菌株rRNA基因中26SrDNAD1/D2区和转录间区ITS序列保守性进行
分析。扩增菌株26SrDNAD1/D2区和ITS序列,与GenBank等国际核酸序列数据库中Saccharomy-
B.1 第一法 平板法(仲裁法)
按GB 4789.15-2016 第一法进行检测。检测时,GB 4789.15-2016中5.1.1所“加入225mL无
菌稀释液”的温度为37℃~40℃。
B.2 第二法 染色法
B.2.1 原理
活酵母能将进入细胞的次甲基蓝染色液立即还原脱色,不被染色,而死酵母被染成蓝色,通过显微
镜观察即可计算活细胞数。
B.2.2 试剂或材料
B.2.2.1 无菌生理盐水:0.85%的氯化钠溶液。
B.2.2.2 次甲基蓝染色液:将0.025g次甲基蓝,0.042g氯化钾,0.048g六水氯化钙,0.02g碳酸氢钠,
1.0g葡萄糖,加无菌生理盐水溶解,并定容至100mL,密封,室温保存。
B.2.3 仪器设备
B.2.3.1 显微镜:放大倍数400以上。
B.2.3.2 血球计数板。
B.2.3.3 血球计数板专用盖玻片。
B.2.3.4 分析天平:精度0.1mg。
B.2.3.5 恒温水浴:控温精度±0.5℃。
B.2.4 试验步骤
B.2.4.1 称取0.1g样品,精确至0.0002g,准确加入37℃~40℃无菌生理盐水20mL,振荡使充分分
散,置32℃恒温水浴中活化1h。
B.2.4.2 将活化液振荡均匀,取酵母活化液0.1mL至一试管中,加入次甲基蓝染色液0.9mL,摇匀,室
温下静置染色10min。
B.2.4.3 将盖玻片置于血球计数板计数室上,使之紧紧盖在血球计数板上。取0.02mL染色后的菌液
(B.2.4.2)到血球计数板和盖玻片结合处,让菌液自动吸入计数室。菌液中不应有气泡,静置1min后,
用显微镜观察计数。
注1:计数板通常有两种规格:一种是1个大格中有16个中格,1个中格又分25个小格,即16×25规格,用这种规
格计数板,取左上、左下、右上、右下四个中格(即100个小格)进行计数。另一种是1个大格分为25个中格,
一个中格分为16个小格,即25×16规格,用这种计数板,则除了左上、左下、右上、右下四个中格外,还需加
中央的一个中格(即80个小格)进行计数。......
   
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