标准搜索结果: 'GB/T 11446.10-2013'
| 标准编号 | GB/T 11446.10-2013 (GB/T11446.10-2013) | | 中文名称 | 电子级水中细菌总数的滤膜培养测试方法 | | 英文名称 | Test method for total bacterial count in electronic grade water by membrane filters | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | L90 | | 国际标准分类 | 30.030 | | 字数估计 | 6,642 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 11446.10-1997 | | 引用标准 | GB 11446.1-2013; GB 11446.3-2013 | | 起草单位 | 信息产业部专用材料质量监督检验中心 | | 归口单位 | 中国电子技术标准化研究院 | | 标准依据 | 国家标准公告2013年第27号 | | 提出机构 | 中华人民共和国工业和信息化部 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | GB/T 11446的本部分规定了电子级水中细菌总数(活菌)的滤膜培养测试方法。本部分适用于EW-I～EW- IV级电子级水中细菌总数的测定。 | GB/T 11446.10-2013
Test method for total bacterial count in electronic grade water by membrane filters
ICS 31-030
L90
中华人民共和国国家标准
代替 GB/T 11446.10-1997
电子级水中细菌总数的
滤膜培养测试方法
2013-12-31发布
2014-08-15实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
GB/T 11446预计结构如下:
---GB/T 11446.1 电子级水;
---GB/T 11446.2 (待定);
---GB/T 11446.3 电子级水测试方法通则;
---GB/T 11446.4 电子级水电阻率的测试方法;
---GB/T 11446.5 电子级水中痕量金属的原子吸收分光光度测试方法;
---GB/T 11446.6 电子级水中二氧化硅的分光光度测试方法;
---GB/T 11446.7 电子级水中痕量阴离子的离子色谱测试方法;
---GB/T 11446.8 电子级水中总有机碳的测试方法;
---GB/T 11446.9 电子级水中微粒的仪器测试方法;
---GB/T 11446.10 电子级水中细菌总数的滤膜培养测试方法。
本部分为GB/T 11446的第10部分。
本部分按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本部分代替GB/T 11446.10-1997《电子级水中细菌总数的滤膜培养测试方法》。
本部分与GB/T 11446.10-1997相比,主要有下列变化:
---“3术语和定义”中去掉了“无菌操作”定义,增加了 “细菌总数”和“培养基”定义(见第3章);
---增加了“5干扰因素”(见第5章);
---删除了“10注意事项”(见1997年版的第10章)。
本部分由中华人民共和国工业和信息化部提出。
本部分由中国电子技术标准化研究院归口。
本部分起草单位:信息产业部专用材料质量监督检验中心、中国科学院半导体研究所、中国电子技
术标准化研究院、中国电子科技集团公司第四十六研究所。
本部分主要起草人:王奕、褚连青、何秀坤、段曙光、提刘旺、刘筠。
本部分所代替标准的历次版本发布情况为:
---GB/T 11446.10-1989、GB/T 11446.10-1997。
电子级水中细菌总数的
滤膜培养测试方法
1 范围
GB/T 11446的本部分规定了电子级水中细菌总数(活菌)的滤膜培养测试方法。
本部分适用于EW-Ⅰ~EW-Ⅳ级电子级水中细菌总数的测定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 11446.1-2013 电子级水
GB/T 11446.3-2013 电子级水测试方法通则
3 术语和定义
GB/T 11446.3-2013界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
3.1
菌落 bacteriumcolony
将单个菌体或孢子在固体培养基上培养一定时间后,使其生长繁殖形成肉眼可见的微生物团,即为
菌落。
3.2
将一定量水样经超滤膜过滤,再用适当的培养基将留在超滤膜表面的细菌培养以形成菌落,然后计
数以测量水中活细菌的数量。
3.3
细菌总数 totalbacterialcount
单位体积样品中存在的有生存能力的微生物总数,不包括厌氧有机体。
3.4
培养基 medium
是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质,一般都含有碳水化合物、含氮物
质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。
4 方法原理
水中的细菌经过0.45μm微孔膜过滤截留于滤膜上,将滤膜贴在衬底(吸透了TGY培养基的滤
纸)上,在适宜的条件下进行培养,细菌繁殖成肉眼可见的菌落。细菌体内存在的脱氢酶,与2,3,5-三
苯基氯化四氮唑(简称T.T.C)在胞内反应使菌体呈红色,反差增大,借此观测及计数。
5 干扰因素
5.1 外来微生物的污染影响分析结果,细菌分析时应特别注意。
5.2 将载菌膜置于培养基上时,中间如有间隙或气泡影响分析结果的现象应严格避免。
6 试剂
6.1 空白用水:GB/T 11446.1-2013规定的EW-Ⅰ级电子级水于高压灭菌器内在1.4×105Pa压力
下,灭菌15min。
6.2 TGY培养基:1L空白用水中加入10.0g胰蛋白胨(B.R)、6.0g牛肉膏(B.R)和2.0g葡萄糖
(A.R),加热溶解,冷却至室温,以1mol/L氢氧化钠调节pH至7.4~7.6,再加15.0g琼脂,加热溶解并
趁热过滤(以四层纱布、一层脱脂棉为介质),装于300mL三角瓶中,灭菌后备用。
注:在制备培养基的加热过程中,需补充所损失的水分。
6.3 1mol/L氢氧化钠溶液:20g氢氧化钠(A.R)溶于500mL空白用水并储于聚乙烯瓶中。
6.4 T.T.C溶液1.0g/L灭菌备用。
7 测量仪器和设备
7.1 无菌室(或无菌工作台):备有功率大于或等于2W/m2的紫外灯,置于工作台上距离工作台面1.5m处。
7.2 电热恒温培养箱:(20℃~60℃)±1℃。
7.3 高压蒸汽灭菌器。
7.4 恒温箱:0℃~300℃。
7.5 体视显微镜。
7.6 微孔有机滤膜:ϕ50mm,孔径0.45μm格栅膜。
7.7 过滤器:ϕ50mm杯式不锈钢过滤器。
7.8 各种玻璃器皿:广口瓶、三角瓶、培养皿、量筒等。
7.9 酒精灯、平头镊子、纱布、棉花、定性滤纸等。
7.10 抽滤系统:如图1所示。
说明:
1---滤杯;
2---滤膜;
3---载膜网;
4---抽滤瓶;
5---缓冲瓶;
6---真空泵。
图1 抽滤系统示意图
8 操作步骤
8.1 检测前的准备
8.1.1 开启无菌室或无菌工作台1h~2h后,使之进入稳定工作状态。
8.1.2 器皿的灭菌:将培养皿、取样瓶等玻璃器皿,先用电子级水EW-Ⅰ级水洗净、烘干,用纸包严后置
于铝制专用容器中放入恒温箱(160℃~165℃)内,干热灭菌2h。
8.1.3 有机滤膜的灭菌:于电子级水中煮沸15min,弃去沸水后,再加新的水煮沸,反复进行3次即可。
或在紫外灯下照1h~2h灭菌。
注:灭菌时注意安全。
8.2 水样测定
取2.0mLT.T.C溶液滴于100mL温度为46℃±1℃的培养基中,在培养皿中混匀(约3mm~
4mm厚),冷却备用。取摇匀后的适量水样:EW-Ⅰ~EW-Ⅲ级水取20mL~100mL,EW-Ⅳ级水取
1mL,经过过滤装置过滤,用50mL空白用水冲洗,抽干。用镊子将滤膜置于备好的培养基上,膜面朝
上,盖好皿盖;待凝固后,将平皿翻转置于培养箱中,于37℃±1℃下恒温培养48h后取出,在体视显
微镜下观察菌落并计数。按同样步骤进行空白试验。每个样品平行进行3次测定,取......
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