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[PDF] GB/T 22917-2008 - 英文版

标准号码	内文	价格美元	第2步(购买)	交付天数	标准名称	状态
GB/T 22917-2008	英文版	279	GB/T 22917-2008	[PDF]天数 >=3	猪水泡病病毒荧光RT-PCR检测方法	有效

基本信息
标准编号	GB/T 22917-2008 (GB/T22917-2008)
中文名称	猪水泡病病毒荧光RT-PCR检测方法
英文名称	Protocol of fluorogenic RT-PCR for swine vesicular disease virus
行业	国家标准 (推荐)
中标分类	B41
国际标准分类	11.220
字数估计	12,114
发布日期	2008-12-31
实施日期	2009-05-01
标准依据	国家标准批准发布公告2008年第25号(总第138号)
发布机构	中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会
范围	本标准规定了猪水泡病病毒荧光RT-PCR检测的操作方法。本标准适用于动物及其产品中猪水泡病病毒的检测。

GB/T 22917-2008 Protocol of fluorogenic RT-PCR for swine vesicular disease virus ICS １１．２２０ B４１中华人民共和国国家标准 GB/T ２２９１７-２００８猪水泡病病毒荧光RT-PCR检测方法２００８-１２-３１发布２００９-０５-０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布前言本标准参考了世界动物卫生组织（ＯＩＥ）《陆生动物诊断试验和疫苗手册（哺乳动物、禽鸟与蜜蜂）》（第５版）。本标准的附录Ａ为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检疫局。本标准主要起草人：花群义、卢体康、吕建强、阮周曦、杨云庆、周晓黎、杨素、董俊、陈书琨。 GB/T ２２９１７-２００８猪水泡病病毒荧光RT-PCR检测方法１　范围本标准规定了猪水泡病病毒荧光ＲＴ-ＰＣＲ检测的操作方法。本标准适用于动物及其产品中猪水泡病病毒的检测。２　缩略语下列缩略语适用于本标准。２．１　荧光RT-PCR 荧光反转录-聚合酶链反应。每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。２．３　RNA 核糖核酸。２．４　DEPC 焦碳酸磷酯。２．５　PBS 磷酸盐缓冲盐水，配方见附录Ａ。２．６　T犪狇酶 T犪狇ＤＮＡ聚合酶。２．７　S犞D犞猪水泡病病毒。３　原理根据猪水泡病病毒的基因特定序列，合成一对特异性引物和一条特异性的荧光双标记探针。引物和探针通过严格的设计和筛选，涵盖已报道的所有猪水泡病病毒的毒株。荧光探针的５′端标记ＦＡＭ荧光素，３′端标记ＴＡＭＲＡ荧光素，它在近距离内能吸收５′端报告荧光基团发出的荧光信号。扩增时，由于T犪狇酶的５′→３′的外切活性，在延伸到荧光探针时，将其切断，两基团分离，淬灭作用消失，荧光信号产生。因此，可以通过检测荧光信号对核酸模板进行检测。４　材料与试剂４．１　仪器与器材４．１．１　荧光ＲＴ-ＰＣＲ检测仪。４．１．２　高速台式冷冻离心机（离心速度１２０００ｒ／ｍｉｎ以上）。４．１．３　台式离心机或手掌式离心机（离心速度３０００ｒ／ｍｉｎ）。４．１．４　混匀器。４．１．５　冰箱（２℃～８℃和-２０℃两种）。４．１．６　微量可调移液器（５μＬ，１０μＬ，１００μＬ，１０００μＬ）及配套带滤芯吸头。４．１．７　１．５ｍＬ、０．５ｍＬ硅化Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管：将Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管和......

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