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GB/T 23504-2009

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GB/T 23504-2009 英文版 90 GB/T 23504-2009 3分钟内自动发货[PDF],有增值税发票。 食品中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法 GB/T 23504-2009 作废

基本信息
标准编号 GB/T 23504-2009 (GB/T23504-2009)
中文名称 食品中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法
英文名称 Determination of zearalenone in food. High performance liquid chromatographic method with immunoaffinity column clean-up
行业 国家标准 (推荐)
中标分类 X04
国际标准分类 67.050
字数估计 6,673
发布日期 2009-04-08
实施日期 2009-05-01
引用标准 GB/T 6682
起草单位 青岛市产品质量监督检验所、中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中检维康技术有限公司、青岛啤酒股份有限公司
归口单位 全国食品工业标准化技术委员会食品通用检测技术分技术委员会(SAC/TC 64/SC 8)
标准依据 国家标准批准发布公告2009年第3号(总第143号);国家卫生和计划生育委员会公告2016年第17号
提出机构 全国食品工业标准化技术委员会(SAC/TC 64)
发布机构 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会
范围 本标准规定了食品中玉米赤霉烯酮含量的免疫亲和层析净化高效液相色谱测定方法。本标准适用于粮食和粮食制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品中玉米赤霉烯酮含量的测定。本标准的方法检出限:粮食和粮食制品的检出限为20μg/kg, 酒类的检出限为20μg/kg, 酱油、醋、酱及酱制品的检出限为50μg/kg。

GB/T 23504-2009: 食品中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法
GB/T 23504-2009 英文名称: Determination of zearalenone in food -- High performance liquid chromatographic method with immunoaffinity column clean-up
中华人民共和国国家标准
GB/T 23504-2009
食品中玉米赤霉烯酮的测定
免疫亲和层析净化高效液相色谱法
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前 言
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由全国食品工业标准化技术委员会(SAC/TC64)提出。
本标准由全国食品工业标准化技术委员会食品通用检测技术分技术委员会(SAC/TC64/SC8)
归口。
本标准起草单位:青岛市产品质量监督检验所、中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中检维康
技术有限公司、青岛啤酒股份有限公司。
本标准主要起草人:张辉珍、董建军、吕宁、李宏伟、李惠颖、翟士星、王雄。
GB/T 23504-2009
食品中玉米赤霉烯酮的测定
免疫亲和层析净化高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了食品中玉米赤霉烯酮含量的免疫亲和层析净化高效液相色谱测定方法。
本标准适用于粮食和粮食制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品中玉米赤霉烯酮含量的测定。
本标准的方法检出限:粮食和粮食制品的检出限为20μg/kg,酒类的检出限为20μg/kg,酱油、醋、
酱及酱制品的检出限为50μg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-2008,ISO 3696:1987,MOD)
3 方法提要
用提取液提取试样中的玉米赤霉烯酮,经免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱荧光检测器测定,外
标法定量。
4 试剂和材料
除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1 甲醇:色谱纯。
4.2 乙腈:色谱纯。
4.3 提取液:乙腈+水(9+1)。
4.4 PBS清洗缓冲液:称取8.0g氯化钠、1.2g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2g氯化钾,用
990mL水将上述试剂溶解,然后用浓盐酸调节pH至7.0,再用水定容至1L。
4.5 玉米赤霉烯酮标准品:纯度≥98%。
4.6 玉米赤霉烯酮标准储备液:准确称取一定量的玉米赤霉烯酮标准品,用甲醇+乙腈(1+1)溶解,配
成0.1mg/mL的标准储备液,在-20℃保存,可使用3个月。
4.7 玉米赤霉烯酮标准工作液:根据使用需要,准确吸取一定量的玉米赤霉烯酮储备液,用流动相稀
释,分别配成相当于10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL的标准工作液,4℃保
存,可使用7d。
4.8 玉米赤霉烯酮免疫亲和柱。
4.9 玻璃纤维滤纸:直径11cm,孔径1.5μm,无荧光特性。
5 仪器和设备
5.1 天平:感量0.001g。
5.2 高效液相色谱仪:配有荧光检测器。
5.3 均质器:转速大于10000r/min。
5.4 高速万能粉碎机:转速10000r/min。
5.5 玻璃注射器:10mL。
5.6 试验筛:1mm孔径。
5.7 空气压力泵。
6 分析步骤
6.1 试样制备与提取
6.1.1 粮食和粮食制品:将样品研磨,硬质的粮食等用高速万能粉碎机磨细并通过试验筛(5.6),不要
磨成粉末。称取50g(精确到0.01g)磨碎的试样于100mL容量瓶中,加入5g氯化钠,用提取液(4.3)
定容至刻度,混匀,转移至均质杯中,高速搅拌提取2min。定量滤纸过滤,移取10.0mL滤液于50mL
容量瓶中,加水定容至刻度,混匀,用玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,收集滤液A于干净的容器中。
6.1.2 酒类:取脱气酒类试样(含二氧化碳的酒类使用前先置于4℃冰箱冷藏30min,过滤或超声脱
气)或其他不含二氧化碳的酒类试样20g(精确到0.01g)于50mL容量瓶中,用乙腈定容至刻度,摇
匀。移取10.0mL滤液于50mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀,用玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,
收集滤液B于干净的容器中。
6.1.3 酱油、醋、酱及酱制品:称取25g(精确到0.01g)混匀的试样,用乙腈定容至100.0mL,超声提
取2min,定量滤纸过滤,移取10.0mL滤液于50mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀,用玻璃纤维滤
纸过滤至滤液澄清,收集滤液C于干净的容器中。
6.2 净化
将免疫亲和柱连接于玻璃注射器(5.5)下,准确移取6.1中的滤液A或B或C10.0mL,注入玻璃
注射器中。将空气压力泵与玻璃注射器相连接,调节压力,使溶液以约1滴/s的流速通过免疫亲和柱,
直至空气进入亲和柱中。依次用10mLPBS清洗缓冲液(4.4)和10mL水淋洗免疫亲和柱,流速约为
1滴/s~2滴/s,直至空气进入亲和柱中,弃去全部流出液,抽干小柱。
6.3 洗脱
准确加入1.0mL甲醇洗脱,流速约为1滴/s,收集全部洗脱液于干净的玻璃试管中,用甲醇定容
至1mL,HPLC测定。
6.4 高效液相色谱参考条件
a) 色谱柱:C18柱,5μm,150mm×4.6mm或相当者;
b) 流动相:乙腈+水+甲醇(46+46+8);
c) 流速:1.0mL/min;
d) 柱温:35℃;
e) 进样量:20μL~100μL;
f) 检测波长:激发波长274nm,发射波长440nm。
6.5 定量测定
以玉米赤霉烯酮标准工作溶液浓度为横坐标,以峰面积积分值为纵坐标,绘制标准工作曲线,用标
准工作曲线对试样进行定量,标准工作溶液和试样溶液中玉米赤霉烯酮的响应值均应在仪器检测线性
范围内。在上述色谱条件下,玉米赤霉烯酮标准品色谱图参见图A.1。
6.6 空白试验
除不加试样外,空白试验应与测定平行进行,并采用相同的分析步骤。 ......
   
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