路径: 主页 > GB/T > 第619页 > GB/T 28717-2012 | 标准编号 | GB/T 28717-2012 (GB/T28717-2012) | | 中文名称 | 饲料中丙二醛的测定 高效液相色谱法 | | 英文名称 | Determination of malonaldehyde in feed -- High performance liquid chromatography | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B46 | | 国际标准分类 | 65.120 | | 字数估计 | 7,766 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB/T 14699.1 | | 标准依据 | 国家标准公告2012年第24号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了饲料中丙二醛的高效液相色谱检测方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、饲料原料中丙二醛的测定。本标准方法的检测限为0.015 mg/kg, 定量限为0.05 mg/kg。 | GB/T 28717-2012: 饲料中丙二醛的测定 高效液相色谱法
GB/T 28717-2012 英文名称: Determination of malonaldehyde in feed -- High performance liquid chromatography
中华人民共和国国家标准
饲料中丙二醛的测定
高效液相色谱法
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归口。
本标准起草单位:上海市饲料质量监督检验站、上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究
所、广东恒兴集团有限公司、广东天科国际(集团)。
本标准主要起草人:赵志辉、杨海锋、林淼、韩薇、陆天华、滕冰、凤懋熙、黄南。
饲料中丙二醛的测定
高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了饲料中丙二醛的高效液相色谱检测方法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、饲料原料中丙二醛的测定。
本标准方法的检测限为0.015mg/kg,定量限为0.05mg/kg。
2 规范性引用文件
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GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 14699.1 饲料 采样
3 原理
试样中丙二醛经三氯乙酸提取后,与硫代巴比妥酸(TBA)作用生成粉红色复合物,离心取上清液,
用高效液相色谱法及荧光检测器检测,外标法计算丙二醛的含量。
4 试剂
除非另有规定,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T 6682中规定的一级水。
4.1 乙腈:色谱纯。
4.2 磷酸二氢钾溶液(50mmol/L):称取6.804g(精确至0.002g)磷酸二氢钾,用水溶解,并定容至
1000mL。
4.3 硫代巴比妥酸(TBA)溶液(0.02mol/L):称取0.288g(精确至0.002g)硫代巴比妥酸于烧杯中,
加入适量水加热至全溶澄清,冷却后定容至100mL。
4.4 三氯乙酸混合液:准确称取75.0g(精确至0.01g)三氯乙酸及1.0g(精确至0.01g)EDTA(乙
二胺四乙酸二钠),用水溶解,稀释至1000mL。
4.5 丙二醛标准储备液(100μg/mL):准确称取0.315g(精确至0.002g)1,1,3,3-四乙氧基丙烷
(E.Mesck97%),用水溶解后稀释至1000mL,置冰箱保存,有效期3个月。
4.6 丙二醛标准工作储备液(1μg/mL):准确移取丙二醛标准储备液(4.5)1.0mL,用三氯乙酸混合
液(4.4)稀释至100mL,置冰箱备用,有效期2周。
4.7 丙二醛标准系列:准确移取丙二醛标准工作储备液(4.6)1.0mL、2.0mL、4.0mL、8.0mL、
10.0mL于50mL容量瓶,以三氯乙酸混合液(4.4)稀释定容,该标准系列中丙二醛的相应浓度为
0.02μg/mL、0.04μg/mL、0.08μg/mL、0.16μg/mL、0.20μg/mL,现配现用。
5 仪器和设备
5.1 分析天平:感量0.0001g。
5.2 离心机:转速12000r/min。
5.3 振荡器。
5.4 恒温水浴箱。
5.5 样品筛:孔径0.9mm。
5.6 高效液相色谱仪:配有荧光检测器。
6 试样的制备
按GB/T 14699.1规定,取有代表性饲料样品至少500g,四分法缩减至少100g,磨碎,过0.9mm
孔径样品筛,混匀装入密闭容器中,避光低温保存备用。
7 分析步骤
7.1 提取
称取约2g试样(饲用油脂称取约1g,精确至0.001g),置入250mL三角瓶中,准确加入50mL
三氯乙酸混合液(4.4),180r/min振摇30min,取约20mL提取液于50mL离心管中,5000r/min离
心5min。
7.2 衍生化
准确移取上述试样溶液(7.1)上清液、丙二醛标准系列溶液(4.7)各5mL分别置于25.0mL比色
管内,加入5.0mLTBA溶液(4.3),混匀,置于90℃水浴中保温20min,取出,用冰水浴迅速冷却,移
入离心试管内,12000r/min离心5min,取上清液上机测定,丙二醛标准系列和试样同步衍生化。
7.3 测定
7.3.1 液相色谱参考条件
7.3.1.1 色谱柱:C18柱,长250mm,内径4.6mm,粒径5μm,或性能相当者。
7.3.1.2 柱温:35℃。
7.3.1.3 流动相:乙腈(4.1)+磷酸二氢钾溶液(4.2)=18+82(V+V),用前过0.45μm滤膜。
7.3.1.4 流速:1.0mL/min。
7.3.1.5 进样体积:10μL。
7.3.1.6 激发波长:525nm。
7.3.1.7 发射波长:560nm。
7.3.1.8 色谱图:参见图A.1。
7.3.2 液相色谱测定
分别取适量的标准工作液(7.2)和试样溶液(7.2),按7.3.1列出的条件进行液相色谱分析测定。
按照保留时间进行定性,以标准工作液做单点或多点校准,并用色谱峰面积积分值定量。待测样液中丙
二醛的响应值应在标准曲线范围内,超......
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