路径: 主页 > GB/T > 第83页 > GB/T 39999-2021 | 标准编号 | GB/T 39999-2021 (GB/T39999-2021) | | 中文名称 | | | 英文名称 | Determination of 15 kinds of prohibited quinolone-type antibiotics in cosmetics including enrofloxacin - Liquid chromatography-tandem mass spectrometry | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | Y42 | | 字数估计 | 14,192 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 39999-2021: 化妆品中恩诺沙星等15种禁用喹诺酮类抗生素的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 39999-2021 英文名称: Determination of 15 kinds of prohibited quinolone-type antibiotics in cosmetics including enrofloxacin -- Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
1 范围
本标准规定了化妆品中15种禁用喹诺酮类抗生素的液相色谱-串联质谱测定方法的原理、试剂或
材料、仪器设备、试验步骤、结果计年、回收率和精密度、允许差等内容。
本标准适用于水剂类、乳液类和非蜡基膏霜类化妆品中依诺沙星、麻保沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、氟罗沙星、培氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、奥比沙星、沙拉沙星、司帕沙星、双氟沙星和莫西沙星的测定。
本标准不适用于粉类化妆品中喹诺酮类抗生素的测定。
本标准15种喹诺酮类抗生素的方法检出限均为0.15mg/kg,定量限均为0.50mg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试样中的15种喹诺酮类抗生素采用酸化乙腈提取,离心后合并提取液并浓缩,正己烷净化,用液相
色谱-串联质谱仪测定,外标法定量。
4 试剂或材料
除另有说明外,所用试剂均为分析纯。
4.1 水,GB/T 6682,一级。
4.2 乙腈:色谱纯。
4.3 甲酸:色谱纯。
4.4 正己烷:色谱纯。
4.5 0.1%甲酸乙腈溶液:准确量取1.0mL甲酸(4.3)至1000mL容量瓶中,用乙腈(4.2)稀释至刻度。
4.6 0.1%甲酸溶液:准确量取1.0mL甲酸(4.3)至1000mL容量瓶中,用水稀释至刻度。
4.7 定容液:准确量取10mL乙腈(4.2)和90mL0.1%甲酸溶液(4.6),混匀。
4.8 乙腈饱和的正己烷溶液:量取20mL乙腈(4.2),加入到50mL正己烷(4.4)中,混匀,静置,上层清
液备用。
4.9 标准物质:纯度均不小于98%,15种喹诺酮类抗生素标准物质的中文名称、英文名称、CAS号、分
子式、相对分子质量及化学结构式参见附录A中表A.1。
4.10 混合标准工作溶液:分别准确称取适量标准物质(4.9)(精确至0.1mg),用乙腈(4.2)配制成质量
浓度为1000μg/mL的单标标准贮备液(于4℃避光保存,可保存3个月)。准确移取各单标标准贮备
液0.25mL于50mL容量瓶中,用乙腈(4.2)定容,制得混合标准中间工作溶液(各为5μg/mL,现配现
用)。取相应的空白样品,按照6.1进行处理,得到基质溶液。准确移取适量混合标准中间工作溶液,用
基质溶液逐级稀释成质量浓度为5.0μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L的系列混
合标准工作溶液(现配现用)。
4.11 滤膜:孔径为0.22μm的聚四氟乙烯滤膜。
5 仪器设备
5.1 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪:配有电喷雾离子源。
5.2 分析天平:感量0.001g和0.0001g。
5.3 涡旋振荡器。
5.4 超声波清洗仪:工作频率不低于40kHz。
5.5 离心机:最高转速不低于4000r/min。
5.6 氮吹仪。
6 试验步骤
6.1 试样处理
称取试样1.0g(精确至0.001g),置于15mL具塞塑料离心管中,加入8mL0.1%甲酸乙腈溶液
(4.5),涡旋振荡1min,超声提取20min,4000r/min离心2min,取上清液。残渣用8mL0.1%甲酸
乙腈溶液(4.5)重复提取一次,合并上清液,用0.1%甲酸乙腈溶液(4.5)定容至25mL。准确移取
1.0mL上述提取液,于50℃水浴中氮吹至近干,用定容液(4.7)定容至2.0mL,加入2mL乙腈饱和的
正己烷溶液(4.8),涡旋振荡1min,4000r/min离心2min,下层清液经滤膜过滤后供液相色谱-三重四
极杆质谱联用仪测定。
6.2 测定
6.2.1 液相色谱参考工作条件
液相色谱参考工作条件如下:
a) 色谱柱:C18柱,1.9μm,100mm×2.1mm(内径)或C18柱,5.0μm,150mm×4.6mm(内径);
b) 流动相:A:0.1%甲酸乙腈溶液(4.5)和B:0.1%甲酸溶液(4.6),进行梯度洗脱,梯度洗脱程序
见表1;
c) 流速:0.3mL/min;
d) 柱温:30℃;
e) 进样量:5μL。
8.0 60 40
8.1 90 10
10.0 90 10
6.2.2 质谱参考工作条件
质谱参考工作条件如下:
a) 离子源:电喷雾离子源(ESI);
b) 扫描方式:正离子扫描;
c) 喷雾电压:5500V;
d) 离子源温度:400℃;
e) 雾化气压力:0.345MPa;
f) 辅助气压力:0.414MPa;
g) 气帘气压力:0.138MPa;
h) 检测方式:多反应监测(MRM);
i) 15种喹诺酮类抗生素母离子、子离子、保留时间及其他质谱参数见表2。
6.2.3 标准工作曲线绘制
将混合标准工作溶液(4.10),按高效液相色谱和质谱参考工作条件(6.2.1和6.2.2)进行测定,以定
量离子色谱峰的峰面积为纵坐标,与其对应的溶液浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线。15种喹诺
酮类抗生素标准物质的多反应监测色谱图参见附录B中图B.1。
6.2.4 试样测定
按高效液相色谱和质谱参考工作条件(6.2.1和6.2.2)测定试样溶液(6.1)。如果试样中待测物质的
色谱峰保留时间与标准溶液的一致,并且在扣除背景后的试样质谱图中......
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